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水稻OsABCC10基因的克隆及功能分析

發(fā)布時(shí)間:2021-01-30 13:05
  鹽脅迫是抑制農(nóng)作物產(chǎn)量的主要非生物脅迫之一。目前,全球約20%的耕地和近一半的灌溉土地受到鹽漬化的影響,土壤鹽漬化面積達(dá)9.0× 108 hm2,這對(duì)全球農(nóng)業(yè)生產(chǎn)力和可持續(xù)性構(gòu)成嚴(yán)重威脅。水稻是中國(guó)乃至整個(gè)世界的主要糧食作物之一,中國(guó)超過(guò)一半的人口以水稻為主食。水稻作為一種對(duì)鹽脅迫中度敏感作物,鹽脅迫條件下將嚴(yán)重影響其產(chǎn)量,這嚴(yán)重威脅到人類(lèi)糧食的安全問(wèn)題。因此,研究水稻耐鹽機(jī)理,為培育耐鹽水稻優(yōu)良品種提供理論依據(jù),以期解決日益嚴(yán)重的糧食問(wèn)題就顯得尤為重要。ABC(ATP-binding cassette proteins,ABC)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白是已知的最大蛋白超家族之一,存在于所有的生物體中。植物ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白不僅參與植物體內(nèi)脂質(zhì)、激素、金屬離子、次生代謝物和外源物質(zhì)的運(yùn)輸,并且還參與植物與病原體間的相互作用和植物體內(nèi)離子通道調(diào)控等重要的生理過(guò)程的進(jìn)行,是一類(lèi)重要的跨膜運(yùn)輸?shù)鞍准易。ABCC蛋白為ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白超家族中的一個(gè)亞家族,又稱(chēng)多藥耐藥相關(guān)蛋白(Multidrugresistance-associatedprotein,MRP)亞家族,主要參與各種分子從細(xì)胞質(zhì)向外部介質(zhì)或細(xì)胞器基質(zhì)的... 

【文章來(lái)源】:廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】:84 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

水稻OsABCC10基因的克隆及功能分析


圖2?-?1?基因的組織表達(dá)模式??Fig?2-?1?Tissue?expression?of?OsABCCIO??

基因,梯度,濃度,正常條件


用濃度為丨00?mmol/LNaC丨分別處理5天幼齡水稻幼苗12小時(shí)和24小時(shí),隨后分別提??取其處理后的幼苗根部總RNA,通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄得到相應(yīng)的cDNA,并利用qRT-PCR的方??法進(jìn)行表達(dá)分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果(圖2-3)顯示,以正常條件下的表達(dá)量為棊準(zhǔn),0心15〇:川??基因在鹽脅迫條件的表達(dá)量隨著NaC'l處理時(shí)間的延長(zhǎng)而増強(qiáng),在處理24小時(shí)后表達(dá)景??達(dá)到正常條件下的3倍。該結(jié)果表明川基因在水稻中的表達(dá)量隨鹽脅迫時(shí)間的??延長(zhǎng)而升高。??17??

雙元,條帶,大腸桿菌,菌落


通過(guò)Golden?Gate?cloning的克降策略,以邊切邊連的方式將其連接到雙元表達(dá)哉體??pYLCRISPR/Cas9上,轉(zhuǎn)入大腸桿菌,使用特定的引物通過(guò)菌落PCR的方法進(jìn)行陽(yáng)性??驗(yàn)證。結(jié)果獲得清晰單一的條帶,條帶大小約為800?bp?(圖3-2),與預(yù)期相吻合。??31??

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]水稻蛋白酶抑制劑基因OsLTPL164和OsLTPL151的組成型及誘導(dǎo)型表達(dá)模式[J]. 何雨娟,鞠迪,王悅,楊雪清,王小奇.  中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2018(12)
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碩士論文
[1]改良劑對(duì)蘇打鹽堿土及玉米生理特性的影響[D]. 王明華.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]蘋(píng)果兩個(gè)WRKY轉(zhuǎn)錄因子的克隆和表達(dá)分析[D]. 谷彥冰.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2016
[3]不同濃度鹽堿脅迫對(duì)水稻生長(zhǎng)及生理生態(tài)特性影響[D]. 高顯穎.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[4]鹽堿脅迫下野生大豆幼苗光合特性與離子動(dòng)態(tài)平衡研究[D]. 邵帥.東北師范大學(xué) 2012



本文編號(hào):3008952

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