水稻OsABCC10基因的克隆及功能分析
發(fā)布時間:2021-01-30 13:05
鹽脅迫是抑制農(nóng)作物產(chǎn)量的主要非生物脅迫之一。目前,全球約20%的耕地和近一半的灌溉土地受到鹽漬化的影響,土壤鹽漬化面積達(dá)9.0× 108 hm2,這對全球農(nóng)業(yè)生產(chǎn)力和可持續(xù)性構(gòu)成嚴(yán)重威脅。水稻是中國乃至整個世界的主要糧食作物之一,中國超過一半的人口以水稻為主食。水稻作為一種對鹽脅迫中度敏感作物,鹽脅迫條件下將嚴(yán)重影響其產(chǎn)量,這嚴(yán)重威脅到人類糧食的安全問題。因此,研究水稻耐鹽機(jī)理,為培育耐鹽水稻優(yōu)良品種提供理論依據(jù),以期解決日益嚴(yán)重的糧食問題就顯得尤為重要。ABC(ATP-binding cassette proteins,ABC)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白是已知的最大蛋白超家族之一,存在于所有的生物體中。植物ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白不僅參與植物體內(nèi)脂質(zhì)、激素、金屬離子、次生代謝物和外源物質(zhì)的運(yùn)輸,并且還參與植物與病原體間的相互作用和植物體內(nèi)離子通道調(diào)控等重要的生理過程的進(jìn)行,是一類重要的跨膜運(yùn)輸?shù)鞍准易。ABCC蛋白為ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白超家族中的一個亞家族,又稱多藥耐藥相關(guān)蛋白(Multidrugresistance-associatedprotein,MRP)亞家族,主要參與各種分子從細(xì)胞質(zhì)向外部介質(zhì)或細(xì)胞器基質(zhì)的...
【文章來源】:廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校
【文章頁數(shù)】:84 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖2?-?1?基因的組織表達(dá)模式??Fig?2-?1?Tissue?expression?of?OsABCCIO??
用濃度為丨00?mmol/LNaC丨分別處理5天幼齡水稻幼苗12小時和24小時,隨后分別提??取其處理后的幼苗根部總RNA,通過逆轉(zhuǎn)錄得到相應(yīng)的cDNA,并利用qRT-PCR的方??法進(jìn)行表達(dá)分析。實驗結(jié)果(圖2-3)顯示,以正常條件下的表達(dá)量為棊準(zhǔn),0心15〇:川??基因在鹽脅迫條件的表達(dá)量隨著NaC'l處理時間的延長而増強(qiáng),在處理24小時后表達(dá)景??達(dá)到正常條件下的3倍。該結(jié)果表明川基因在水稻中的表達(dá)量隨鹽脅迫時間的??延長而升高。??17??
通過Golden?Gate?cloning的克降策略,以邊切邊連的方式將其連接到雙元表達(dá)哉體??pYLCRISPR/Cas9上,轉(zhuǎn)入大腸桿菌,使用特定的引物通過菌落PCR的方法進(jìn)行陽性??驗證。結(jié)果獲得清晰單一的條帶,條帶大小約為800?bp?(圖3-2),與預(yù)期相吻合。??31??
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]水稻蛋白酶抑制劑基因OsLTPL164和OsLTPL151的組成型及誘導(dǎo)型表達(dá)模式[J]. 何雨娟,鞠迪,王悅,楊雪清,王小奇. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2018(12)
[2]改良劑對蘇打鹽堿土玉米幼苗生長和生理特性的影響[J]. 王明華,李明,高祺,甄善繼,李喬,高紅秀,金萍. 生態(tài)學(xué)雜志. 2016(11)
[3]吉林省粳稻種質(zhì)萌發(fā)期耐堿性和耐鹽性綜合評價[J]. 馮鐘慧,劉曉龍,姜昌杰,梁正偉. 土壤與作物. 2016(02)
[4]植物耐鹽堿基因工程研究進(jìn)展[J]. 郭文芳,農(nóng)萬廷,李剛強(qiáng),劉德虎. 生物技術(shù)通報. 2015(07)
[5]不同供氮水平下鹽脅迫對水稻光合特性和某些生理特性的影響[J]. 劉曉龍,徐晨,徐克章,崔菁菁,張治安,凌鳳樓,安久海,武志海. 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2015(02)
[6]不同濃度鹽堿脅迫對水稻生長發(fā)育及產(chǎn)量的影響[J]. 朱明霞,高顯穎,邵璽文,金峰,耿艷秋,王帥. 吉林農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(06)
[7]鹽堿脅迫對農(nóng)牧作物種子萌發(fā)的影響研究進(jìn)展[J]. 胡宗英,張紅香,孫澤威. 中國種業(yè). 2014(05)
[8]植物ATP結(jié)合盒(ABC)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白研究進(jìn)展[J]. 邵若玄,沈憶珂,周文彬,方佳,鄭炳松. 浙江農(nóng)林大學(xué)學(xué)報. 2013(05)
[9]植物ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白研究綜述[J]. 趙胡,李裕紅. 海峽科學(xué). 2012(02)
[10]植物鹽脅迫響應(yīng)及耐鹽的分子機(jī)制[J]. 金光德,南桂仙. 農(nóng)技服務(wù). 2011(10)
碩士論文
[1]改良劑對蘇打鹽堿土及玉米生理特性的影響[D]. 王明華.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]蘋果兩個WRKY轉(zhuǎn)錄因子的克隆和表達(dá)分析[D]. 谷彥冰.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2016
[3]不同濃度鹽堿脅迫對水稻生長及生理生態(tài)特性影響[D]. 高顯穎.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[4]鹽堿脅迫下野生大豆幼苗光合特性與離子動態(tài)平衡研究[D]. 邵帥.東北師范大學(xué) 2012
本文編號:3008952
【文章來源】:廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校
【文章頁數(shù)】:84 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖2?-?1?基因的組織表達(dá)模式??Fig?2-?1?Tissue?expression?of?OsABCCIO??
用濃度為丨00?mmol/LNaC丨分別處理5天幼齡水稻幼苗12小時和24小時,隨后分別提??取其處理后的幼苗根部總RNA,通過逆轉(zhuǎn)錄得到相應(yīng)的cDNA,并利用qRT-PCR的方??法進(jìn)行表達(dá)分析。實驗結(jié)果(圖2-3)顯示,以正常條件下的表達(dá)量為棊準(zhǔn),0心15〇:川??基因在鹽脅迫條件的表達(dá)量隨著NaC'l處理時間的延長而増強(qiáng),在處理24小時后表達(dá)景??達(dá)到正常條件下的3倍。該結(jié)果表明川基因在水稻中的表達(dá)量隨鹽脅迫時間的??延長而升高。??17??
通過Golden?Gate?cloning的克降策略,以邊切邊連的方式將其連接到雙元表達(dá)哉體??pYLCRISPR/Cas9上,轉(zhuǎn)入大腸桿菌,使用特定的引物通過菌落PCR的方法進(jìn)行陽性??驗證。結(jié)果獲得清晰單一的條帶,條帶大小約為800?bp?(圖3-2),與預(yù)期相吻合。??31??
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]水稻蛋白酶抑制劑基因OsLTPL164和OsLTPL151的組成型及誘導(dǎo)型表達(dá)模式[J]. 何雨娟,鞠迪,王悅,楊雪清,王小奇. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2018(12)
[2]改良劑對蘇打鹽堿土玉米幼苗生長和生理特性的影響[J]. 王明華,李明,高祺,甄善繼,李喬,高紅秀,金萍. 生態(tài)學(xué)雜志. 2016(11)
[3]吉林省粳稻種質(zhì)萌發(fā)期耐堿性和耐鹽性綜合評價[J]. 馮鐘慧,劉曉龍,姜昌杰,梁正偉. 土壤與作物. 2016(02)
[4]植物耐鹽堿基因工程研究進(jìn)展[J]. 郭文芳,農(nóng)萬廷,李剛強(qiáng),劉德虎. 生物技術(shù)通報. 2015(07)
[5]不同供氮水平下鹽脅迫對水稻光合特性和某些生理特性的影響[J]. 劉曉龍,徐晨,徐克章,崔菁菁,張治安,凌鳳樓,安久海,武志海. 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2015(02)
[6]不同濃度鹽堿脅迫對水稻生長發(fā)育及產(chǎn)量的影響[J]. 朱明霞,高顯穎,邵璽文,金峰,耿艷秋,王帥. 吉林農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(06)
[7]鹽堿脅迫對農(nóng)牧作物種子萌發(fā)的影響研究進(jìn)展[J]. 胡宗英,張紅香,孫澤威. 中國種業(yè). 2014(05)
[8]植物ATP結(jié)合盒(ABC)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白研究進(jìn)展[J]. 邵若玄,沈憶珂,周文彬,方佳,鄭炳松. 浙江農(nóng)林大學(xué)學(xué)報. 2013(05)
[9]植物ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白研究綜述[J]. 趙胡,李裕紅. 海峽科學(xué). 2012(02)
[10]植物鹽脅迫響應(yīng)及耐鹽的分子機(jī)制[J]. 金光德,南桂仙. 農(nóng)技服務(wù). 2011(10)
碩士論文
[1]改良劑對蘇打鹽堿土及玉米生理特性的影響[D]. 王明華.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]蘋果兩個WRKY轉(zhuǎn)錄因子的克隆和表達(dá)分析[D]. 谷彥冰.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2016
[3]不同濃度鹽堿脅迫對水稻生長及生理生態(tài)特性影響[D]. 高顯穎.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[4]鹽堿脅迫下野生大豆幼苗光合特性與離子動態(tài)平衡研究[D]. 邵帥.東北師范大學(xué) 2012
本文編號:3008952
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