從江香豬LPL基因克
發(fā)布時間:2021-01-30 11:56
脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)具有調(diào)控動物機體脂肪沉積的功能,但在小型地方豬種中LPL基因分子遺傳機制研究鮮有報道。為探究LPL基因調(diào)控功能,揭示其對從江香豬(Sus scrofa)肉質(zhì)性狀的影響,本研究以從江香豬為實驗動物,利用RT-PCR技術(shù)克隆從江香豬LPL基因CDS區(qū)(Gen Bank No.1994531),生物信息學(xué)軟件預(yù)測蛋白理化性質(zhì)及結(jié)構(gòu)特征,通過限制性片段長度多態(tài)性聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)技術(shù)對從江香豬LPL基因第5內(nèi)含子AfaⅠ位點進行遺傳效應(yīng)分析,運用q RT-PCR技術(shù)分析不同月齡階段從江香豬背最長肌組織中LPL mRNA表達發(fā)育規(guī)律,并研究其與肌內(nèi)脂肪(intramuscular fat,IMF)含量相關(guān)性。結(jié)果表明,從江香豬LPL基因CDS區(qū)全序列長1 437 bp,共編碼478個氨基酸,構(gòu)成具有PLAT/LH2結(jié)構(gòu)域的穩(wěn)定親水性蛋白。不同品種豬間氨基酸序列的同源性很高,其中從江香豬與挪威長...
【文章來源】:農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 2017,25(04)北大核心
【文章頁數(shù)】:8 頁
【部分圖文】:
Smartv6.0程序?qū)慕阖iLPL蛋白結(jié)構(gòu)域分析
699.299.699.899.899.6298.799.299.499.499.6398.798.998.998.7499.499.499.2599.699.4699.47表2不同品種豬種間LPL蛋白氨基酸同源相似度(%)分析Table2AminoacidhomologyanalysisofLPLproteinfordifferentswinebreeds1:從江香豬;2:杜洛克;3:貴州白香豬;4:大白豬;5:陸川豬;6:挪威長白豬;7:清平豬1:Congjiangxiang;2:DurocAY559454.1;3:Guizhoubaixi-angHQ699490.1;4:LargewhiteAY686761.1;5:Luchuan;6:NorwegianLandraceX62984.1;7:QingpingAY559452.1圖3不同品種豬LPL氨基酸系統(tǒng)進化樹Figure3TheaminoacidphylogenetictreeofLPLofdifferentswinebreeds從江香豬LPL基因克壟多態(tài)及時序表達圖譜構(gòu)建Cloning,PolymorphismsandTissueExpressionProfileofLPLGeneinCongjiangPigs(Susscrofa)603
臣〕?度)存在極顯著相關(guān),已將其作為調(diào)控豬胴體性能的重要候選位點(Leietal.,2004)。為探究LPL基因內(nèi)含子5中AfaⅠ位點是否可作為肉質(zhì)性狀的分子遺傳標記來利用,本實驗通過對從江香豬AfaⅠ位點遺傳效應(yīng)分析發(fā)現(xiàn),該群體中G等位基因頻率為0.6495,高于C等位基因頻率,該結(jié)果與王剛等(2007)報道國內(nèi)脂肪型萊蕪豬LPL基因內(nèi)含子5中AfaⅠ位點A型等位基因頻率較高,而國外瘦肉型大白豬B型等位基因頻率較高相一致。關(guān)聯(lián)性分析顯示,從江香豬群體中CC基因型皮厚顯著高于CG型,且CC型個體間背膘厚、眼肌面積和肌內(nèi)脂圖4LPL基因PCR產(chǎn)物電泳(A)和內(nèi)含子5擴增產(chǎn)物AfaⅠ酶切結(jié)果(B)Figure4ImageofPCRproductsofLPLgene(A)andbandpatternsofintron5ofLPLgenedigestedwithAfaⅠ(B)M:DL2000DNA分子量標準;2:CC型;3、4和6:CG型;1和5:GG型M:DL2000DNAmarker;2:CC;3,4and6:CG;1and5:GGM12345620001000750500250100bp336bpbpM123456bp20001000750500250100336232104AB圖5PCR產(chǎn)物測序驗證結(jié)果Figure5ThesequencingoftheverificationresultsofPCRproductsGTACTGAGTACTGAGTAGTGACCCGGG基因型GenotypeCCCGGG皮厚(ST)/mmSkinthickness4.60±0.37a3.74±0.69b4.11±0.59ab背膘厚(BFT)/mmBackfatthickness24.34±5.1521.99±5.3122.49±5.52眼肌面積(LMA)/cm2Lioneyearea17.67±1.4217.29±3.7616.43±2.45眼肌深度(LMD)/mmLioneyedepth36.35±2.4237.07±5.0236.97±4.54肌內(nèi)脂肪(IMF)/%Intramuscularfat3.27±0.923.18±1.032.97±0.77表4AfaⅠ位點與肉質(zhì)指標關(guān)聯(lián)性分析Table4AssociationbetweendifferentgenotypeandmeatqualitytraitsofAfaⅠl
【參考文獻】:
期刊論文
[1]牦牛CYGB基因CDS區(qū)克隆與生物信息學(xué)分析[J]. 孫雪婧,杜曉華,楊孝樸,羅玉柱,劉霞. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(13)
[2]陸川豬脂蛋白脂酶基因的克隆與序列分析[J]. 黃艷娜,李莉,何少婧,韋玲靜,梁明振,蘭干球,蔣欽楊. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2014(06)
[3]豬肌肉組織MDH和LPL基因表達與肌內(nèi)脂肪含量和脂肪酸組成關(guān)系的研究[J]. 祝仁鑄,尹遜河,王元虎,李少青,武道留,王倩. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2013(08)
[4]貴州白香豬脂蛋白酯酶基因cDNA的克隆與序列分析[J]. 趙佳福,許厚強,乜玉麗,張勇,陳祥,龔婷. 江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2012(01)
[5]貴州白香豬母系與父系遺傳檢測[J]. 王兆龍,劉若余,田甜. 山地農(nóng)業(yè)生物學(xué)報. 2009(03)
[6]豬生長肥育期背最長肌LPL基因表達與肌內(nèi)脂肪含量相關(guān)研究[J]. 廉紅霞,盧德勛,高民. 畜牧與獸醫(yī). 2007(12)
[7]豬肌肉組織LPL基因表達的發(fā)育性變化及其與肌內(nèi)脂肪沉積關(guān)系的研究[J]. 王剛,曾勇慶,武英,魏述東,包新見,劉嬋娟,孫延曉. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2007(03)
[8]萊蕪豬脂肪代謝酶活性的發(fā)育性變化及其對肌內(nèi)脂肪沉積的影響[J]. 楊海玲,曾勇慶,魏述東,武英,曹洪防,劉嬋娟,王剛,包新見. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2005(11)
[9]二花臉豬與大約克豬生長期肌內(nèi)脂肪合成與水解基因表達特征的比較研究[J]. 高勤學(xué),李俊,劉紅林,王林云,徐銀學(xué). 遺傳學(xué)報. 2004(11)
博士論文
[1]豬脂蛋白脂酶(LPL)和激素敏感脂肪酶(HSL)基因的序列和多態(tài)性分析及體外表達的研究[D]. 張振波.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005
碩士論文
[1]豬LPL基因cDNA的克隆、多態(tài)性和表達譜分析[D]. 王研.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[2]野豬、野家雜交豬及家豬LPL基因表達規(guī)律及定量比較研究[D]. 丁琳琳.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
本文編號:3008856
【文章來源】:農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 2017,25(04)北大核心
【文章頁數(shù)】:8 頁
【部分圖文】:
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699.299.699.899.899.6298.799.299.499.499.6398.798.998.998.7499.499.499.2599.699.4699.47表2不同品種豬種間LPL蛋白氨基酸同源相似度(%)分析Table2AminoacidhomologyanalysisofLPLproteinfordifferentswinebreeds1:從江香豬;2:杜洛克;3:貴州白香豬;4:大白豬;5:陸川豬;6:挪威長白豬;7:清平豬1:Congjiangxiang;2:DurocAY559454.1;3:Guizhoubaixi-angHQ699490.1;4:LargewhiteAY686761.1;5:Luchuan;6:NorwegianLandraceX62984.1;7:QingpingAY559452.1圖3不同品種豬LPL氨基酸系統(tǒng)進化樹Figure3TheaminoacidphylogenetictreeofLPLofdifferentswinebreeds從江香豬LPL基因克壟多態(tài)及時序表達圖譜構(gòu)建Cloning,PolymorphismsandTissueExpressionProfileofLPLGeneinCongjiangPigs(Susscrofa)603
臣〕?度)存在極顯著相關(guān),已將其作為調(diào)控豬胴體性能的重要候選位點(Leietal.,2004)。為探究LPL基因內(nèi)含子5中AfaⅠ位點是否可作為肉質(zhì)性狀的分子遺傳標記來利用,本實驗通過對從江香豬AfaⅠ位點遺傳效應(yīng)分析發(fā)現(xiàn),該群體中G等位基因頻率為0.6495,高于C等位基因頻率,該結(jié)果與王剛等(2007)報道國內(nèi)脂肪型萊蕪豬LPL基因內(nèi)含子5中AfaⅠ位點A型等位基因頻率較高,而國外瘦肉型大白豬B型等位基因頻率較高相一致。關(guān)聯(lián)性分析顯示,從江香豬群體中CC基因型皮厚顯著高于CG型,且CC型個體間背膘厚、眼肌面積和肌內(nèi)脂圖4LPL基因PCR產(chǎn)物電泳(A)和內(nèi)含子5擴增產(chǎn)物AfaⅠ酶切結(jié)果(B)Figure4ImageofPCRproductsofLPLgene(A)andbandpatternsofintron5ofLPLgenedigestedwithAfaⅠ(B)M:DL2000DNA分子量標準;2:CC型;3、4和6:CG型;1和5:GG型M:DL2000DNAmarker;2:CC;3,4and6:CG;1and5:GGM12345620001000750500250100bp336bpbpM123456bp20001000750500250100336232104AB圖5PCR產(chǎn)物測序驗證結(jié)果Figure5ThesequencingoftheverificationresultsofPCRproductsGTACTGAGTACTGAGTAGTGACCCGGG基因型GenotypeCCCGGG皮厚(ST)/mmSkinthickness4.60±0.37a3.74±0.69b4.11±0.59ab背膘厚(BFT)/mmBackfatthickness24.34±5.1521.99±5.3122.49±5.52眼肌面積(LMA)/cm2Lioneyearea17.67±1.4217.29±3.7616.43±2.45眼肌深度(LMD)/mmLioneyedepth36.35±2.4237.07±5.0236.97±4.54肌內(nèi)脂肪(IMF)/%Intramuscularfat3.27±0.923.18±1.032.97±0.77表4AfaⅠ位點與肉質(zhì)指標關(guān)聯(lián)性分析Table4AssociationbetweendifferentgenotypeandmeatqualitytraitsofAfaⅠl
【參考文獻】:
期刊論文
[1]牦牛CYGB基因CDS區(qū)克隆與生物信息學(xué)分析[J]. 孫雪婧,杜曉華,楊孝樸,羅玉柱,劉霞. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(13)
[2]陸川豬脂蛋白脂酶基因的克隆與序列分析[J]. 黃艷娜,李莉,何少婧,韋玲靜,梁明振,蘭干球,蔣欽楊. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2014(06)
[3]豬肌肉組織MDH和LPL基因表達與肌內(nèi)脂肪含量和脂肪酸組成關(guān)系的研究[J]. 祝仁鑄,尹遜河,王元虎,李少青,武道留,王倩. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2013(08)
[4]貴州白香豬脂蛋白酯酶基因cDNA的克隆與序列分析[J]. 趙佳福,許厚強,乜玉麗,張勇,陳祥,龔婷. 江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2012(01)
[5]貴州白香豬母系與父系遺傳檢測[J]. 王兆龍,劉若余,田甜. 山地農(nóng)業(yè)生物學(xué)報. 2009(03)
[6]豬生長肥育期背最長肌LPL基因表達與肌內(nèi)脂肪含量相關(guān)研究[J]. 廉紅霞,盧德勛,高民. 畜牧與獸醫(yī). 2007(12)
[7]豬肌肉組織LPL基因表達的發(fā)育性變化及其與肌內(nèi)脂肪沉積關(guān)系的研究[J]. 王剛,曾勇慶,武英,魏述東,包新見,劉嬋娟,孫延曉. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2007(03)
[8]萊蕪豬脂肪代謝酶活性的發(fā)育性變化及其對肌內(nèi)脂肪沉積的影響[J]. 楊海玲,曾勇慶,魏述東,武英,曹洪防,劉嬋娟,王剛,包新見. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2005(11)
[9]二花臉豬與大約克豬生長期肌內(nèi)脂肪合成與水解基因表達特征的比較研究[J]. 高勤學(xué),李俊,劉紅林,王林云,徐銀學(xué). 遺傳學(xué)報. 2004(11)
博士論文
[1]豬脂蛋白脂酶(LPL)和激素敏感脂肪酶(HSL)基因的序列和多態(tài)性分析及體外表達的研究[D]. 張振波.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005
碩士論文
[1]豬LPL基因cDNA的克隆、多態(tài)性和表達譜分析[D]. 王研.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[2]野豬、野家雜交豬及家豬LPL基因表達規(guī)律及定量比較研究[D]. 丁琳琳.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
本文編號:3008856
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