為探索擬南芥的冷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子CBF3和抗寒基因COR15A在"黔白"系列大白菜的轉(zhuǎn)化體系,以"黔白"系列大白菜3個(gè)優(yōu)良自交系作為研究對象,分別用大白菜4d苗齡的帶柄子葉、半子葉、下胚軸作為外植體,利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法將同時(shí)含有CBF3和COR15A雙價(jià)抗寒基因的表達(dá)載體轉(zhuǎn)入大白菜,就影響大白菜再生和遺傳轉(zhuǎn)化的因素進(jìn)行研究。通過抗生素篩選得到大白菜T0代轉(zhuǎn)基因抗性植株36株,經(jīng)PCR檢測后獲得轉(zhuǎn)基因陽性植株6株。經(jīng)抗寒性初步鑒定,轉(zhuǎn)基因大白菜植株抗寒性超過對照。 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2016,21(06)北大核心

【文章頁數(shù)】：11 頁

【文章目錄】：
1材料與方法
    1.1試驗(yàn)材料
        1.1.1材料
        1.1.2菌種及表達(dá)載體
        1.1.3主要試劑和引物
    1.2方法
        1.2.1無菌苗的獲得
        1.2.2不定芽的再生
        1.2.3大白菜的遺傳轉(zhuǎn)化
        1.2.4大白菜轉(zhuǎn)化植株的分子檢測
        1.2.5轉(zhuǎn)基因大白菜抗寒性的初步鑒定
2結(jié)果與分析
    2.1大白菜高頻再生體系的建立
        2.1.1大白菜不同基因型和外植體對不定芽再生的影響
        2.1.2植物生長調(diào)節(jié)劑對大白菜愈傷誘導(dǎo)和芽分化的影響
        2.1.3 AgNO3濃度對外植體再生率的影響
        2 .1 .4苗齡對大白菜再生率的影響
        2.1.5再生芽的生根培養(yǎng)
    2.2大白菜遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立
        2.2.1卡那霉素（Kan）選擇壓濃度的確定
        2.2.2抑菌抗生素Carb濃度的確定
        2 .2 .3預(yù)培養(yǎng)及共培養(yǎng)時(shí)間對轉(zhuǎn)化效率的影響
    2.3大白菜再生-轉(zhuǎn)化體系的建立
    2.4大白菜轉(zhuǎn)化植株的PCR鑒定
    2.5轉(zhuǎn)基因大白菜的抗寒性初步鑒定
3結(jié)論與討論
    3.1結(jié)論
        3.1.1建立起了“黔白”系列大白菜子葉-子葉柄的高頻再生體系
        3.1.2優(yōu)化了農(nóng)桿菌介導(dǎo)的大白菜遺傳轉(zhuǎn)化體系
        3.1.3獲得6株大白菜轉(zhuǎn)基因植株
    3.2討論
        3.2.1大白菜基因型的影響
        3.2.2生長調(diào)節(jié)劑的選擇
        3.2.3外植體的選擇
        3.2.4其他影響因素
        3.2.5 Kan選擇壓的影響
        3.2.6轉(zhuǎn)基因大白菜的分子鑒定
        3.2.7轉(zhuǎn)基因大白菜抗寒性的鑒定
        3.2.8今后的研究方向與展望



本文編號：3004103