發(fā)布時(shí)間：2021-01-28 01:07

　　暗紋東方鲀是我國(guó)南方重要的淡水養(yǎng)殖種類之一。暗紋東方鲀精巢營(yíng)養(yǎng)價(jià)值很高,規(guī)模化養(yǎng)殖全雄暗紋東方鲀,能夠顯著提高我國(guó)養(yǎng)殖暗紋東方鲀的經(jīng)濟(jì)效益。本研究采用轉(zhuǎn)錄組學(xué)、生物信息學(xué)和分子生物學(xué)的方法,初步探究了暗紋東方鲀性別相關(guān)基因在早期發(fā)育過程中的分子調(diào)控機(jī)制。主要研究結(jié)果如下:1.暗紋東方鲀幼魚遺傳性別的鑒定采用ARMS-PCR技術(shù)快速檢測(cè)暗紋東方鲀的遺傳性別。根據(jù)暗紋東方鲀amhr2激酶結(jié)構(gòu)域內(nèi)存在一個(gè)與性別連鎖的錯(cuò)義突變SNP位點(diǎn),設(shè)計(jì)特異等位基因引物,即在下游PCR引物3’末端不同堿基位點(diǎn)設(shè)計(jì)不同種類的錯(cuò)配堿基,進(jìn)行特異性引物的篩選,并通過優(yōu)化PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件,建立暗紋東方鲀幼魚遺傳性別差異鑒定的ARMS-PCR方法。此外,為了判斷ARMS-PCR方法鑒定暗紋東方鲀幼魚遺傳性別的可行性,我們同時(shí)利用直接測(cè)序法和組織切片法分別鑒定樣品的遺傳性別和表型性別。結(jié)果表明,利用ARMS-PCR方法可以快速區(qū)分暗紋東方鲀的遺傳性別,并且ARMS-PCR方法的鑒定結(jié)果與直接測(cè)序結(jié)果相同,同時(shí)也與組織切片鑒定的表型性別一致。2.暗紋東方鲀?cè)缙诎l(fā)育階段性腺組織的轉(zhuǎn)錄組分析對(duì)孵化后60^1... 

【文章來源】：上海海洋大學(xué)上海市

【文章頁數(shù)】：116 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

暗紋東方鲀性腺的組織學(xué)形態(tài)

暗紋東方鲀性別差異等位基因 PCR 擴(kuò)on of sex difference allele sequence fragmF 表示雌魚，M 表示雄魚。 denotes female fish and M denotes male f圖 2-3 暗紋東方鲀雌雄個(gè)體的 SNP 分型P typing of male and female individuals in特異性的鑒定及反應(yīng)條件的優(yōu)化PCR 擴(kuò)增稀釋產(chǎn)物（50 倍稀釋）的產(chǎn)物來鑒定引物的特異性。5 對(duì)

圖 2-3 暗紋東方鲀雌雄個(gè)體的 SNP 分型 SNP typing of male and female individuals in T.物特異性的鑒定及反應(yīng)條件的優(yōu)化的 PCR 擴(kuò)增稀釋產(chǎn)物（50 倍稀釋）為模增的產(chǎn)物來鑒定引物的特異性。5 對(duì)特70bp 的目的 DNA 片段（圖 2-4a，b，f，8 和引物 F1/inter R9 在雌性個(gè)體中擴(kuò)增，h，i）。引物 F1/inter R3 和引物 F1/i圖 2-4c，e）。引物 F1/inter R4 在雌性個(gè)個(gè)體中均擴(kuò)增出目的 DNA 片段（圖 2-4顯擴(kuò)增條帶，僅在雄性個(gè)體中擴(kuò)增出 1。er R7，對(duì)擴(kuò)增條件進(jìn)行優(yōu)化，如設(shè)置模量減半等，結(jié)果表明引物在模板稀釋200時(shí)擴(kuò)增效果最好。


本文編號(hào)：3004079