粘蟲Mythimna separata（Walker）是一種遷飛性、多食性、暴發(fā)性的世界性害蟲,其已對多種殺蟲劑產(chǎn)生了抗性。本文以玉米粘蟲為研究對象,經(jīng)過氯蟲苯甲酰胺或氟蟲腈處理粘蟲3齡幼蟲24 h后,構(gòu)建轉(zhuǎn)錄組測序文庫并進(jìn)行Illumina RNA-seq測序,運用實時熒光定量PCR（qPCR）篩選出不同條件下最佳的內(nèi)參基因及差異性表達(dá)的P450基因,并通過RNA干擾（RNAi）技術(shù)確定對殺蟲劑具有解毒代謝功能的主效P450基因。具體研究結(jié)果如下:1.采用葉片浸漬法測定氯蟲苯甲酰胺或氟蟲腈對粘蟲的毒力。結(jié)果表明氯蟲苯甲酰胺或氟蟲腈對粘蟲3齡幼蟲致死中濃度LC₅₀分別為0.45和18.72 mg/L,對粘蟲3齡幼蟲的10%致死濃度LC₁₀分別為0.15和13.66 mg/L。2.分別用氯蟲苯甲酰胺(LC₁₀)或氟蟲腈(LC₁₀)處理粘蟲3齡幼蟲24 h后,通過構(gòu)建轉(zhuǎn)錄組測序文庫并進(jìn)行Illumina RNA-seq測序。結(jié)果表明,氯蟲苯甲酰胺處理粘蟲后,共有29個P450基因表達(dá)量上調(diào),27個P45... 

【文章來源】：河南科技學(xué)院河南省

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

Unigenes長度分布柱狀圖

第三章粘蟲轉(zhuǎn)錄組測序及P450基因篩選15Unigenes，總長度為97934563bp，最小長度為201bp，最大長度為30776bp，平均長度為806bp，拼接所得轉(zhuǎn)錄本長度分布如圖3-1，圖3-2。圖3-1Unigenes長度分布柱狀圖Fig3-1Unigeneslengthbar圖3-2Unigenes長度頻率分布圖Fig3-2ThegraphofUnigeneslengthfrenquency將粘蟲轉(zhuǎn)錄組拼接得到的Unigenes通過蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫NR與家蠶（Bombyxmori）、小家鼠（Musmusculus）、黑脈金斑蝶（Danausplexippus）、棉鈴蟲（Helicoverpaarmigera）和小菜蛾（Plutellaxylostella）進(jìn)行比對，Unigenes的同源相似比例分別為43.3%、15.9%、2.3%和15.1%（圖3-3）。

粘蟲對氯蟲苯甲酰胺抗性相關(guān)細(xì)胞色素P450的鑒定16圖3-3Unigene的同源基因百分比Fig3-3ThepercentageofhomologousgenesofUnigene將粘蟲得到的Unigenes與NR、NT、PFAM、KOG、Swiss-Prot、KO和GO七大數(shù)據(jù)庫分別進(jìn)行蛋白序列、核酸序列、蛋白結(jié)構(gòu)域、直系同源關(guān)系、表達(dá)產(chǎn)物代謝途徑及功能注釋，注釋所占比例分別為43.01%、21.76%、33.55%、17.91%、30.49%、18.47%和33.87%（圖3-4）。圖3-4Unigenes的七大數(shù)據(jù)庫注釋比例Fig3-4TheratesofUnigenesannotationwithsevendatabases將被七大數(shù)據(jù)庫注釋后的Unigenes進(jìn)行基因差異表達(dá)分析，其中橫坐標(biāo)是指基因在不同實驗組中/不同樣品中表達(dá)倍數(shù)變化，縱坐標(biāo)指基因表達(dá)量變化的顯著程度，qvalue

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號：3002992