試驗(yàn)旨在對(duì)塔里木馬鹿（Cervus elaphus yarkandensis）鹿茸肝細(xì)胞生長因子（Hepatocyte growth factor, HGF）基因進(jìn)行部分外顯子克隆、序列分析及組織表達(dá)研究。試驗(yàn)采用改良的Trizol法分別提取茸皮組織、間充質(zhì)組織、軟骨組織、骨組織的總RNA;通過RT-PCR擴(kuò)增得到HGF基因,回收純化后,基因與pMD19-T載體連接,轉(zhuǎn)化到大腸桿菌DH5α感受態(tài)細(xì)胞中,鑒定后送測序;利用免疫組化法確定HGF在塔里木馬鹿鹿茸頂端組織茸皮、間充質(zhì)、軟骨、骨組織中的表達(dá)特征。結(jié)果,獲得塔里木馬鹿茸HGF基因部分外顯子大小為349 bp;同源性序列比對(duì)結(jié)果發(fā)現(xiàn)塔里木馬鹿HGF與瘤牛、普通牛、白尾鹿、山羊相似性較高;免疫組化試驗(yàn)表明,塔里木馬鹿HGF基因在茸皮組織和軟骨組織中陽性反應(yīng)明顯,間充質(zhì)組織和骨組織中陽性反應(yīng)微弱。本結(jié)果為進(jìn)一步研究HGF基因在塔里木馬鹿茸生長中的調(diào)控作用提供基礎(chǔ)試驗(yàn)數(shù)據(jù)。 

【文章來源】：塔里木大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,32(03)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

鹿茸不同組織總RNA檢測結(jié)果

取2.1獲得的RNA樣品通過PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)1.0%瓊脂糖凝膠電泳檢測得到一條約349 bp的目的條帶，與預(yù)期片段大小相符，可進(jìn)行下一步試驗(yàn)。結(jié)果圖2所示：2.3 測序結(jié)果與序列分析

HGF在塔里木馬鹿鹿茸皮層的表達(dá)免疫組化結(jié)果見圖3。在倒置顯微鏡下可以看到，茸皮是由表皮、真皮和皮下結(jié)締組織組成，真皮由網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)構(gòu)成，并且存在大量毛囊和皮脂腺，皮下結(jié)締組織中由許多血管和纖維的分布（見圖3中A、B、C和D）。從圖片中觀察到鹿茸茸皮組織免疫組化實(shí)驗(yàn)組有黃褐色陽性反應(yīng)出現(xiàn)，主要分布在鹿茸茸皮組織真皮表皮中間基底層和毛囊周圍的皮脂腺上（見圖3中B、C和D），對(duì)照組為陰性反應(yīng)（見圖3中A），說明鹿茸茸皮組織中存在肝細(xì)胞生長因子的表達(dá)，且表達(dá)明顯。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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