桂花（Osmanthus fragrans）是木犀科（Oleaceae）木犀屬常綠灌木或喬木,根據(jù)花期可分為秋桂與四季桂。四季桂可多季節(jié)成花,其中秋季開花花量大而集中,呈聚傘花序且無總梗,而其他季節(jié)花呈圓錐花序,并且有花序總梗。本研究以四季桂品種‘佛頂珠’和秋桂品種‘堰虹桂’為實(shí)驗(yàn)材料,采用PCR和RACE技術(shù)對(duì)桂花中的成花基因FT、SOC1和AP1進(jìn)行克隆,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)對(duì)成花整合基因進(jìn)行表達(dá)分析,并對(duì)關(guān)鍵整合因子FT和SOC1進(jìn)行擬南芥轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證功能。主要獲得以下結(jié)果:（1）桂花成花基因的克隆與序列分析:克隆得到Of FT、Of SOC1A、Of SOC1B、Of AP1 c DNA序列,其在‘堰虹桂’和‘佛頂珠’中序列一致,其ORF長(zhǎng)度分別為525 bp、657 bp、651 bp和720 bp;克隆得到Of FT DNA含有4個(gè)外顯子和3個(gè)內(nèi)含子,‘堰虹桂’中序列長(zhǎng)度為2034 bp,‘佛頂珠’中序列長(zhǎng)度為2041 bp;RACE克隆發(fā)現(xiàn)Of FT在‘堰虹桂’和‘佛頂珠’中均存在兩種轉(zhuǎn)錄后調(diào)控,分別為同時(shí)缺失第三四外顯子和單獨(dú)缺失第四外顯子。（2）桂花成花基因的表... 

【文章來源】：浙江農(nóng)林大學(xué)浙江省

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

技術(shù)路線

3桂花成花整合基因的克隆和分析173.2結(jié)果與分析3.2.1桂花成花基因cDNA序列克隆與分析3.2.1.1目的片段的獲得克隆得到FT基因1條，其cDNA全長(zhǎng)600bp，通過NCBIBLAST在線比對(duì)分析，其與油橄欖（Oleaeuropaea）、棗樹（Ziziphusjujuba）、貝殼杉（Shoreabeccariana）等物種中的FT基因同源性達(dá)到80%以上，確定為FT的同源基因，將其命名為OfFT，其中編碼區(qū)長(zhǎng)度為525bp，起始密碼子為ATG，終止密碼子為TAG，編碼174個(gè)氨基酸�？寺〉玫絆fSOC1基因2條，兩條序列相似性為64.96%，通過NCBIBLAST在線比對(duì)分析，其均與油橄欖、煙草（Nicotianatabacum）、棗樹等物種中的SOC1基因高達(dá)90%以上的相似性，將其命名為OfSOC1A和OfSOC1B。其中編碼區(qū)長(zhǎng)度分別為657bp和654bp，起始密碼子均為ATG，終止密碼子均為TGA，分別編碼218和217個(gè)氨基酸�？寺〉玫紸P1基因1條，其cDNA全長(zhǎng)720bp，通過NCBIBLAST在線比對(duì)分析，其與油橄欖、芝麻（Sesamumindicum）、歐丁香（Syringavulgaris）等物種中的AP1/CAL基因同源性達(dá)到80%以上，將其命名為OfAP1，其中編碼區(qū)長(zhǎng)度為720bp，起始密碼子為ATG，終止密碼子為TGA，編碼239個(gè)氨基酸。圖3.1桂花OfFT（a）、OfSOC1A（b）、OfSOC1B（c）、OfAP1（d）cDNA克隆Figure3.1AgroseelectrophoresisofOfFT（a）、OfSOC1A（b）、OfSOC1B（c）andOfAP1（d）RT-PCR3.2.1.2桂花成花基因氨基酸結(jié)構(gòu)分析和系統(tǒng)進(jìn)化將OfFT、OfSOC1A、OfSOC1B和OfAP1核苷酸序列翻譯成氨基酸序列后，使用NCBI，BlastConservedDomin分析，發(fā)現(xiàn)OfFT屬于PEBP家族基因，具有

四季桂成花基因 OfFT、OfSOC1、OfAP1 克隆及其功能研究PEBP 家族共同的結(jié)構(gòu)域；OfSOC1A、OfSOC1B 和 OfAP1 都屬于 MADS 家族基因，都含有 MADS 結(jié)構(gòu)域和 K 盒結(jié)構(gòu)（圖 3.2）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]菊花FT-likes基因開花調(diào)控功能研究[D]. 孫靜.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014

碩士論文
[1]綠竹和雷竹SOC1同源基因克隆和功能分析[D]. 馬騰飛.浙江農(nóng)林大學(xué) 2013
[2]桂花不同栽培變種的成花條件及花器官發(fā)育的形態(tài)解剖學(xué)研究[D]. 曹際云.山東大學(xué) 2008



本文編號(hào)：2985490