結(jié)直腸癌是位于消化道的一種惡性的腫瘤。近幾十年,隨著經(jīng)濟建設(shè)的發(fā)展,人們的生活方式發(fā)生了極大的變化,結(jié)直腸癌的發(fā)病率和死亡率明顯上升。“早發(fā)現(xiàn),早治療”對于所有癌癥來說都是一種十分有效的防治原則,因此,篩選和鑒定結(jié)直腸癌早期診斷以及治療的標志物有益于改善結(jié)直腸癌患者的生存與預(yù)后。前期我們通過生物信息學(xué)技術(shù),分析了多組來自GEO數(shù)據(jù)庫的結(jié)直腸癌表達譜芯片數(shù)據(jù),發(fā)現(xiàn)ETV4在結(jié)直腸癌中m RNA的表達量相較于癌旁組織增加了大約100倍,是所有潛在標志物中變化最大的。ETV4（ETS translocation variant 4）屬于ETS（E26 transformation-specific）轉(zhuǎn)錄因子家族,又叫做PEA3或E1AF。根據(jù)前期分析結(jié)果,我們推測ETV4是一個潛在的癌基因。我們將以此為基礎(chǔ),進一步探究ETV4基因在結(jié)直腸癌中的功能以及其臨床意義。（1）ETV4在結(jié)直腸癌細胞中高表達并且與患者不良預(yù)后相關(guān)聯(lián)首先我們利用生物信息學(xué)技術(shù)分析了包括367例結(jié)直腸癌組織和667例正常組織的一個GEO數(shù)據(jù)集,結(jié)果顯示ETV4在癌組織中的表達量明顯高于正常組織。另外,通過生物信息學(xué)技術(shù)我... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

ETV4在結(jié)直腸正常組織及癌組織中的表達Fig.1ETV4expressioninnormalandCRCtissuesA:ExpressionanalysisofETV4innormaltissuesandCRCtissues(TrepresentstumortissuesandN

ETV4 過表達后，明顯促進 HCT116、HT29 和 RKO 細胞增殖（圖4A）。而 ETV4 敲減后，明顯抑制了 HCT116、HT291RKO 細胞增殖（圖 4A）。此外，我們進一步利用平板克隆實驗驗證 ETV4 對結(jié)直腸癌細胞克隆形成能力的影響，結(jié)果顯示，ETV4 過表達組細胞克隆數(shù)量明顯多于對照組細胞克隆數(shù)量（圖4B），而 ETV4 敲減組細胞克隆數(shù)量低于對照組細胞，結(jié)果說明，ETV4 可以促進結(jié)直腸癌細胞的體外增殖能錄。

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文基于前期研究結(jié)果，我們又對 ETV4 的促癌遷移和侵襲能力進行了檢測。我們首先利用細胞劃痕實驗，在穩(wěn)定過表達 ETV4 的 HCT116、HT29 和 RKO 細胞中檢測了 ETV4 過表達對這些細胞遷移能力的影響，同時在 ETV4 穩(wěn)定敲減的這幾種細胞中檢測細胞遷移能力的變化，結(jié)果顯示，在穩(wěn)定過表達 ETV4 的細胞中，其細胞遷移能力強于相對應(yīng)的對照細胞組（圖 6A），而穩(wěn)定敲減 ETV4 的細胞，其遷移能力弱于相應(yīng)對照細胞（圖 6B）。進一步利用 Transwell 遷移與侵襲實驗檢測ETV4 過表達與 ETV4 敲減對結(jié)直腸癌細胞 HCT116、HT29 和 RKO 的遷移與侵襲能力的影響，結(jié)果顯示，與對照細胞相比，ETV4 過表達細胞遷移與侵襲能力明顯增強（圖 6C），而 ETV4 敲減細胞與對照細胞相比，敲降組細胞遷移與侵襲能力顯著下降（圖 6D）。這些結(jié)果說明，ETV4 可明顯促進結(jié)直腸癌細胞的遷移與侵襲。


本文編號：2960140