骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞是肌組織的前體細(xì)胞、可塑性強(qiáng),具有骨骼肌的許多重要生物特性,肌衛(wèi)星細(xì)胞的激活、增殖和分化也是骨骼肌細(xì)胞肥大、數(shù)目增多以及肌纖維轉(zhuǎn)化的重要機(jī)制。因此對(duì)于肌衛(wèi)星細(xì)胞增殖和分化過程調(diào)控的研究能夠?yàn)榧∪獍l(fā)育機(jī)制研究提供重要幫助。microRNA（miRNA）是一種非蛋白質(zhì)的新型基因表達(dá)調(diào)控因子,其在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)節(jié)基因表達(dá)的內(nèi)源性單鏈非編碼RNA（²2-nt長(zhǎng)）。通過與mRNA配對(duì),miRNA可通過抑制翻譯或刺激mRNA降解來下調(diào)基因表達(dá)。在某些情況下,它們也可以上調(diào)靶基因的表達(dá)。很多miRNA靶基因的表達(dá)對(duì)于肌肉的正常發(fā)育具有至關(guān)重要的調(diào)控作用。但是目前對(duì)肌肉中miRNA的了解非常有限,很多miRNA調(diào)控肌肉發(fā)育的細(xì)節(jié)仍不是很清楚。因此鑒定新的miRNA并尋找miRNA對(duì)肌肉發(fā)育功能基因的研究具有緊迫性。本實(shí)驗(yàn)通過前期對(duì)牛骨骼肌分化過程中miRNA高通量深度測(cè)序結(jié)果發(fā)現(xiàn)miR-2425在牛骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞（MDSCs-muscle-derived satellite cells,MDSCs）分化過程中的表達(dá)量呈顯著下降趨勢(shì),推測(cè)其在牛MDSCs細(xì)胞分化和肌肉形... 

【文章來源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

pGL3-BasicVector質(zhì)粒圖譜

東北農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)碩士學(xué)位論文與分析-2425 在牛 MDSCs 增殖分化不同時(shí)期表達(dá)RT-PCR 對(duì)體外培養(yǎng)的牛骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞（MDSCs）不同增殖和分化階段re 3-1，結(jié)果顯示：與非增殖細(xì)胞 0 h 相比，在增殖 24 h 和 48 h 時(shí)，miR顯的增高，而在分化期表達(dá)量降低;當(dāng)與 D-24 h（圖 3-1 所示）相比時(shí)， h）和（D-72 h），其表達(dá)顯著降低（P<0.05）。圖 3-1 的結(jié)果顯示，在增殖和分化期間，miR-2425 表達(dá)在第 2 天（P-48 h）達(dá)到其峰值，然后 h）。

25注：（A）雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)檢測(cè) miR-2425 與 RAD9A 和 MYOG 3'-UTR 結(jié)合；（B）轉(zhuǎn)染 miR-2425M 對(duì)照后在 mRNA 水平上檢測(cè) MYOG 和 RAD9A 的表達(dá)；（C）轉(zhuǎn)染 miR-2425-M 或 miR-2425-I 后的 RAD蛋白表達(dá)；（D）是 C 的統(tǒng)計(jì)結(jié)果（E）轉(zhuǎn)染 miR-2425-M 和 miR-2425-I 后的 MYOG 蛋白表達(dá)；（F）是的統(tǒng)計(jì)結(jié)果。使用單樣本 t 檢驗(yàn)來評(píng)估圖 3-5 中的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。* P<0.05 被認(rèn)為是統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，** P<0.0被認(rèn)為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。NS 沒有顯著差異。圖 3-5 miR-2425 調(diào)節(jié) RAD9A 和 MYOG 表達(dá)。Figure 3-5 miR-2425 regulates RAD9A and MYOG expression.

【參考文獻(xiàn)】：
碩士論文
[1]實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)RAD9基因在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)意義[D]. 李凱敏.河北醫(yī)科大學(xué) 2012
[2]羊肌細(xì)胞生成素（MyoG）基因的克隆、表達(dá)及成肌活性研究[D]. 許峰.揚(yáng)州大學(xué) 2011
[3]豬MYOG基因和CAST基因多態(tài)性研究及部分DNA片段的測(cè)序[D]. 楊又兵.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2003



本文編號(hào)：2942271