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二化螟取食誘導(dǎo)蛋白酶抑制劑基因OsLTPL164和OsLTPL151的表達模式及干擾載體構(gòu)建

發(fā)布時間:2020-12-18 19:57
  二化螟(Chilo suppressalis)作為水稻上危害最為嚴重的常發(fā)性害蟲之一,對水稻產(chǎn)量造成巨大經(jīng)濟損失。作為防治二化螟最主要的武器,化學(xué)殺蟲劑的大量使用已導(dǎo)致農(nóng)藥殘留、環(huán)境污染、糧食安全和害蟲抗藥性等問題凸顯。利用基因工程培育抗螟水稻品種是較安全、高效的方法,但水稻抗螟蟲相關(guān)基因的功能研究相對匱乏。植物蛋白酶抑制劑(Potease Inhibitor,PI)是一類低分子量的多肽或蛋白質(zhì),參與植物對害蟲和其它逆境脅迫的抗性。然而,編碼水稻蛋白酶抑制劑的基因的分子鑒定和表達模式尚不清楚。因此,本試驗以東北地區(qū)常規(guī)種植的水稻1688、1665和1654品系作為供試材料,克隆了兩個水稻蛋白酶抑制劑基因OsLTPL164和OsLTPL151,并運用熒光定量PCR(RT-qPCR)分析了OsLTPL164和OsLTPL151在三個水稻品系中、二化螟取食及機械損傷下的表達模式;測定了二化螟取食及機械損傷下三個水稻品系不同組織的α-淀粉酶活性;通過RNAi技術(shù)和超表達技術(shù)構(gòu)建了OsLTPL164和OsLTPL151的沉默載體和超表達載體。研究結(jié)果為明確OsLTPL164和OsLTPL151在... 

【文章來源】:沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】:83 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

二化螟取食誘導(dǎo)蛋白酶抑制劑基因OsLTPL164和OsLTPL151的表達模式及干擾載體構(gòu)建


二化螟的蟲態(tài)(來自搜狗圖片網(wǎng)絡(luò))

基因功能,片段,植物抗病,驅(qū)動表


圖 1-3 RNA 干擾機制圖(付月靈,2010)Fig.1-3 The mechanism picture of RNA interference基因功能中的研究進展NA 干擾研究廣泛應(yīng)用于植物基因功能分析、植物抗病、抗良和植物發(fā)育及生理代謝途徑的研究(劉愛玲基因功能需要構(gòu)建可以轉(zhuǎn)錄成 dsRNA 的表達需要選擇一段 RNA 干擾片段,此片段需根據(jù)序相反的正向片段和反向片段(任鵬飛等,20芥、煙草等運用較廣泛,植物干擾表達載體常ia1301(劉燕霞等,2014;李林,2010;Allen e)構(gòu)建基因 OsHsfA7 的 RNA 干擾載體對該基因1301M,以 CaMV35S 為啟動子驅(qū)動表達,研因 OsbHLH120 的 RNAi 干擾載體,結(jié)果表明

二級結(jié)構(gòu),水稻品系,組成型表達,結(jié)構(gòu)域


圖 2-1 OsLTPL164、OsLTPL151 的二級結(jié)構(gòu)圖 2-1The secondary structure of OsLTPL164 and OsLTPL151A.OsLTPL164 B.OsLTPL151圖 2-2 OsLTPL164、OsLTPL151 的結(jié)構(gòu)域Fig.2-2 The domain of OsLTPL164 and OsLTPL151A.OsLTPL164 B.OsLTPL1512.2.2 蛋白酶抑制劑基因 OsLTPL164 的組成型表達分析2.2.2.1 同一水稻品系不同組織中的表達水平

【參考文獻】:
期刊論文
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[3]褐飛虱體內(nèi)small RNA的鑒定、利用RNAi技術(shù)培育抗褐飛虱水稻及OsATG7基因的功能研究[D]. 陳秋紅.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
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碩士論文
[1]抗二化螟水稻品種鑒定及抗蟲基因初步挖掘與驗證[D]. 王悅.沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]轉(zhuǎn)Bt基因水稻對二化螟幼蟲抗性及其成蟲產(chǎn)卵選擇行為的影響[D]. 柯剴切.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[3]水稻抗蟲相關(guān)基因OsJAMYB功能解析[D]. 鞠紅平.浙江大學(xué) 2012
[4]轉(zhuǎn)hrfl基因小麥赤霉病抗性分析與水稻RNA沉默通用載體構(gòu)建[D]. 李林.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
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[6]寒地稻區(qū)二化螟發(fā)生規(guī)律、測報方法及防治策略的研究[D]. 吳麗巖.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué) 2009
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[8]水稻逆境相關(guān)基因的遺傳轉(zhuǎn)化和功能鑒定[D]. 黃越敏.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
[9]不同啟動子驅(qū)動下馬鈴薯蛋白酶抑制劑PinⅡ轉(zhuǎn)基因水稻的遺傳、表達和抗蟲性分析[D]. 武亮.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
[10]黑龍江省二化螟發(fā)生規(guī)律及其生物防治的研究[D]. 裴海英.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2003



本文編號:2924522

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