發(fā)布時(shí)間：2020-12-17 22:08

　　草莓不僅是重要的園藝作物,同時(shí)因其生長(zhǎng)周期短、基因組小、可以穩(wěn)定遺傳轉(zhuǎn)化等特點(diǎn)也日益成為果實(shí)發(fā)育和成熟機(jī)理研究的模式材料。CRISPR/Cas9基因組編輯技術(shù)是近年來(lái)興起的生命科學(xué)研究領(lǐng)域的重要技術(shù),具有精確、便捷、高效的特點(diǎn),其在草莓中的應(yīng)用將極大地推動(dòng)草莓遺傳改良和分子生物學(xué)研究。本實(shí)驗(yàn)室前期研究證明,蔗糖可以作為信號(hào)調(diào)控草莓果實(shí)發(fā)育和成熟。為此,本研究首先在草莓中建立了 CRISPR/Cas9介導(dǎo)的基因組編輯技術(shù),在此基礎(chǔ)上,還對(duì)調(diào)控草莓果實(shí)成熟的蔗糖信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制進(jìn)行了研究。首先以二倍體（Fragariaxvescaa）和八倍體（Fragaria x ananassa）草莓果實(shí)為材料,研究了使用CRISPR/Cas9在草莓果實(shí)瞬時(shí)轉(zhuǎn)化體系中進(jìn)行基因組編輯的可行性。本研究設(shè)計(jì)了雙靶點(diǎn)基因組編輯載體,兩個(gè)sgRNA分別靶向FvMYB10和FvCHS。瞬時(shí)轉(zhuǎn)化草莓果實(shí)后并通過(guò)PCR-RE（PCRRestriction enzyme assay）檢測(cè)和測(cè)序檢測(cè)發(fā)現(xiàn),兩個(gè)靶點(diǎn)位置都發(fā)生了堿基突變。以上結(jié)果表明,可以使用CRISPR/Cas9在草莓果實(shí)瞬時(shí)轉(zhuǎn)化系統(tǒng)中進(jìn)行基因組編輯。實(shí)現(xiàn)果實(shí)瞬... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：95 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１－１?ＲＮＡ引導(dǎo)的Ｃａｓ９核酸酶的示意

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【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：2922786