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融安金柑開花關(guān)鍵基因FT/TFL1同源基因克隆及其功能初步研究

發(fā)布時間:2020-12-17 15:04
  Flowering Locus T (FT)/Terminal Flower Like 1 (TFL1)基因家族是植物開花調(diào)控途徑的重要整合因子和調(diào)控植物開花的關(guān)鍵所在,在花形成過程中起著關(guān)鍵的作用。目前已從蘋果、葡萄、山核桃、柑橘、龍眼、杧果等多種果樹中克隆獲得了FT/TFL1同源基因,并對部分植物FT/TFL1同源基因的功能進行了研究。金柑的開花習(xí)性與其它柑橘類果樹不同,其開花的分子機理研究較為鮮見。為初步探明FT/TFL1基因在金柑開花調(diào)控中的作用,本論文以融安金柑為試材,進行其同源基因克隆與生物信息學(xué)分析、表達特性及轉(zhuǎn)基因等研究。主要研究結(jié)果如下:1.獲得3個融安金柑FT/TFL1同源基因的CDS序列,命名為FcFT1 (531 bp)、 FcFT2 (516bp)、FcTFL1(519bp)。對其進行生物信息學(xué)分析可知:FcFT1編碼177個氨基酸,蛋白質(zhì)原子總數(shù)為2791,分析式為C888H1377N255O266S5;理論蛋白質(zhì)分子量為20.0 kDa,等電點為6.74;FcFT2編碼172個氨基酸,蛋白質(zhì)原子總數(shù)為2653,分析式為C845H1328N230O240S1... 

【文章來源】:廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】:69 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮寫及符號說明
1 前言
    1.1 研究背景
    1.2 植物開花調(diào)控相關(guān)基因研究進展
        1.2.1 FT基因研究進展
        1.2.2 TFL1基因研究進展
    1.3 研究目的與意義
    1.4 技術(shù)路線圖
2 材料與方法
    2.1 植物材料
    2.2 試劑藥品
    2.3 主要儀器
    2.4 實驗方法
        2.4.1 樣品RNA提取與逆轉(zhuǎn)錄
        2.4.2 基因全長克隆
        2.4.3 DNA的提取
        2.4.4 基因的生物信息學(xué)分析
        2.4.5 實時熒光定量表達分析
        2.4.6 基因超量表達載體構(gòu)建
        2.4.7 農(nóng)桿菌感受態(tài)的制備和轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌
        2.4.8 農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化擬南芥方法
        2.4.9 擬南芥轉(zhuǎn)基因植株的篩選
        2.4.10 擬南芥轉(zhuǎn)基因植株的檢測方法與性狀觀察
3 結(jié)果與分析
    3.1 同源基因克隆
    3.2 生物信息學(xué)分析
        3.2.1 蛋白質(zhì)理化信息分析
        3.2.2 氨基酸序列同源性比較與進化樹分析
    3.3 FcFT1同源基因時空表達分析
        3.3.1 FcFT1基因的組織特異性分析
        3.3.2 FcFT1基因在不同花器官表達特性分析
        3.3.3 FcFT1在盛花期的日周期變化規(guī)律
    3.4 FcFT2同源基因時空表達分析
        3.4.1 FcFT2基因的組織特異性分析
        3.4.2 FcFT2基因在不同花器官表達特性分析
        3.4.3 FcFT2在盛花期的日周期變化規(guī)律
    3.5 FcTFL1同源基因時空表達分析
        3.5.1 FcTFL1基因的組織特異性分析
        3.5.2 FcTFL1基因在不同花器官表達特性分析
        3.5.3 FcTFL1在盛花期的日周期變化規(guī)律
    3.6 真核載體構(gòu)建及遺傳轉(zhuǎn)化擬南芥
        3.6.1 載體構(gòu)建
        3.6.2 農(nóng)桿菌浸染擬南芥及T0代的篩選
        3.6.3 轉(zhuǎn)基因擬南芥T1代的培養(yǎng)與檢測
        3.6.4 轉(zhuǎn)基因擬南芥T1代植株的特性觀察
4 討論
    4.1 融安金柑FcFT1、FcFT2、FcTFL1基因的克隆及序列分析
        4.1.1 融安金柑FcFT1、FcFT2、FcTFL1同源基因克隆
        4.1.2 融安金柑FcFT1、FcFT2、FcTFL1序列分析和聚類分析
    4.2 融安金柑FcFT1、FcFT2、FcTFL1基因的表達分析
        4.2.1 融安金柑FcFT1、FcFT2、FcTFL1基因的組織特異性分析
        4.2.2 融安金柑FcFT1、FcFT2、FcTFL1基因在不同花器官表達特性分析
        4.2.3 融安金柑FcFT1、FcFT2、FcTFL1基因在盛花期的日周期變化規(guī)律
    4.3 融安金柑FcFT1、FcFT2、FcTFL1基因?qū)M南芥遺傳轉(zhuǎn)化分析
5 結(jié)論與創(chuàng)新性
    5.1 結(jié)論
    5.2 創(chuàng)新性
致謝
參考文獻
附錄


【參考文獻】:
期刊論文
[1]龍眼胚性愈傷組織中TFL1基因克隆及其表達分析[J]. 陳裕坤,林玉玲,賴鐘雄.  園藝與種苗. 2015(08)
[2]高等植物成花素FT基因:基因與機制的研究進展[J]. 呂有軍,王彩霞,楊衛(wèi)軍,張永山.  分子植物育種. 2015(06)
[3]TFL1基因在甜櫻桃童期向成年階段轉(zhuǎn)變過程中的作用[J]. 李長龍,李洋,王晶,閆國華,張曉明,段續(xù)偉,張開春,李天忠.  園藝學(xué)報. 2015(06)
[4]FT/TFL類基因在山葡萄雌雄花中的表達分析[J]. 徐維華,鄭秋玲,劉萬好,沙玉芬,范書亭,唐美玲.  華北農(nóng)學(xué)報. 2014(S1)
[5]桑樹成花素基因FT表達載體的構(gòu)建及轉(zhuǎn)化擬南芥植株的早花現(xiàn)象[J]. 吳素麗,蔣濤,劉立群,郭龍,蘇超,張敏娟,錢永華,焦鋒.  蠶業(yè)科學(xué). 2014(06)
[6]植物開花整合子基因FT的研究進展[J]. 李球紅,費元,龐基良.  北方園藝. 2014(18)
[7]成花基因FT/TFL1基因家族及其對植物成花轉(zhuǎn)變遺傳改良的研究進展[J]. 杜麗,李勇鵬,姚瑤.  江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(07)
[8]木本果樹開花相關(guān)基因的研究進展[J]. 魏丹鳳,曾黎輝.  亞熱帶農(nóng)業(yè)研究. 2014(02)
[9]百子蓮開花相關(guān)基因ApFT的克隆及表達分析[J]. 石玉波,張荻,申曉輝,王玲,卓麗環(huán).  園藝學(xué)報. 2014(04)
[10]黃瓜CsFT基因的克隆及其功能分析[J]. 張娟,顏爽爽,趙文圣,張小蘭.  園藝學(xué)報. 2013(11)

博士論文
[1]龍眼種質(zhì)資源遺傳多樣性分析及低溫對石硤龍眼影響研究[D]. 陳虎.廣西大學(xué) 2012
[2]芒果SCoT分子標記與逆境和重要開花時間相關(guān)基因研究[D]. 羅聰.廣西大學(xué) 2012
[3]大豆FT/TFL1基因克隆、表達模式及功能分析[D]. 胡瑞波.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2009
[4]葡萄花發(fā)育相關(guān)基因的克隆與表達特性研究[D]. 宗成文.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007

碩士論文
[1]早實枳FT類似基因的結(jié)構(gòu)分析和功能驗證[D]. 靖艷玲.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[2]桑樹FT基因的克隆及表達分析[D]. 李四軍.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2013
[3]水稻TFL2基因功能初步研究[D]. 綦煌松.廣西大學(xué) 2012
[4]薔薇科植物TFL1和SOC1基因的克隆及表達分析[D]. 李晶晶.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[5]農(nóng)桿菌介導(dǎo)的TFL1基因轉(zhuǎn)化菊花的研究[D]. 侯香玲.河南大學(xué) 2011
[6]洋蔥LEAFY和FT同源基因的克隆與表達初析[D]. 黃鈺.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[7]薔薇科幾種植物FT同源基因克隆及序列分析[D]. 左陽.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[8]早實枳TFL1/CEN同源基因的表達分析及功能特征[D]. 李紅蓮.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[9]光周期誘導(dǎo)甘菊成花中ClFT基因表達特性的研究[D]. 王琳琳.北京林業(yè)大學(xué) 2010
[10]蘋果MdFT基因克隆及功能的初步鑒定[D]. 李偉明.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009



本文編號:2922244

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