融安金柑開(kāi)花關(guān)鍵基因FT/TFL1同源基因克隆及其功能初步研究
發(fā)布時(shí)間:2020-12-17 15:04
Flowering Locus T (FT)/Terminal Flower Like 1 (TFL1)基因家族是植物開(kāi)花調(diào)控途徑的重要整合因子和調(diào)控植物開(kāi)花的關(guān)鍵所在,在花形成過(guò)程中起著關(guān)鍵的作用。目前已從蘋(píng)果、葡萄、山核桃、柑橘、龍眼、杧果等多種果樹(shù)中克隆獲得了FT/TFL1同源基因,并對(duì)部分植物FT/TFL1同源基因的功能進(jìn)行了研究。金柑的開(kāi)花習(xí)性與其它柑橘類(lèi)果樹(shù)不同,其開(kāi)花的分子機(jī)理研究較為鮮見(jiàn)。為初步探明FT/TFL1基因在金柑開(kāi)花調(diào)控中的作用,本論文以融安金柑為試材,進(jìn)行其同源基因克隆與生物信息學(xué)分析、表達(dá)特性及轉(zhuǎn)基因等研究。主要研究結(jié)果如下:1.獲得3個(gè)融安金柑FT/TFL1同源基因的CDS序列,命名為FcFT1 (531 bp)、 FcFT2 (516bp)、FcTFL1(519bp)。對(duì)其進(jìn)行生物信息學(xué)分析可知:FcFT1編碼177個(gè)氨基酸,蛋白質(zhì)原子總數(shù)為2791,分析式為C888H1377N255O266S5;理論蛋白質(zhì)分子量為20.0 kDa,等電點(diǎn)為6.74;FcFT2編碼172個(gè)氨基酸,蛋白質(zhì)原子總數(shù)為2653,分析式為C845H1328N230O240S1...
【文章來(lái)源】:廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:69 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮寫(xiě)及符號(hào)說(shuō)明
1 前言
1.1 研究背景
1.2 植物開(kāi)花調(diào)控相關(guān)基因研究進(jìn)展
1.2.1 FT基因研究進(jìn)展
1.2.2 TFL1基因研究進(jìn)展
1.3 研究目的與意義
1.4 技術(shù)路線圖
2 材料與方法
2.1 植物材料
2.2 試劑藥品
2.3 主要儀器
2.4 實(shí)驗(yàn)方法
2.4.1 樣品RNA提取與逆轉(zhuǎn)錄
2.4.2 基因全長(zhǎng)克隆
2.4.3 DNA的提取
2.4.4 基因的生物信息學(xué)分析
2.4.5 實(shí)時(shí)熒光定量表達(dá)分析
2.4.6 基因超量表達(dá)載體構(gòu)建
2.4.7 農(nóng)桿菌感受態(tài)的制備和轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌
2.4.8 農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化擬南芥方法
2.4.9 擬南芥轉(zhuǎn)基因植株的篩選
2.4.10 擬南芥轉(zhuǎn)基因植株的檢測(cè)方法與性狀觀察
3 結(jié)果與分析
3.1 同源基因克隆
3.2 生物信息學(xué)分析
3.2.1 蛋白質(zhì)理化信息分析
3.2.2 氨基酸序列同源性比較與進(jìn)化樹(shù)分析
3.3 FcFT1同源基因時(shí)空表達(dá)分析
3.3.1 FcFT1基因的組織特異性分析
3.3.2 FcFT1基因在不同花器官表達(dá)特性分析
3.3.3 FcFT1在盛花期的日周期變化規(guī)律
3.4 FcFT2同源基因時(shí)空表達(dá)分析
3.4.1 FcFT2基因的組織特異性分析
3.4.2 FcFT2基因在不同花器官表達(dá)特性分析
3.4.3 FcFT2在盛花期的日周期變化規(guī)律
3.5 FcTFL1同源基因時(shí)空表達(dá)分析
3.5.1 FcTFL1基因的組織特異性分析
3.5.2 FcTFL1基因在不同花器官表達(dá)特性分析
3.5.3 FcTFL1在盛花期的日周期變化規(guī)律
3.6 真核載體構(gòu)建及遺傳轉(zhuǎn)化擬南芥
3.6.1 載體構(gòu)建
3.6.2 農(nóng)桿菌浸染擬南芥及T0代的篩選
3.6.3 轉(zhuǎn)基因擬南芥T1代的培養(yǎng)與檢測(cè)
3.6.4 轉(zhuǎn)基因擬南芥T1代植株的特性觀察
4 討論
4.1 融安金柑FcFT1、FcFT2、FcTFL1基因的克隆及序列分析
4.1.1 融安金柑FcFT1、FcFT2、FcTFL1同源基因克隆
4.1.2 融安金柑FcFT1、FcFT2、FcTFL1序列分析和聚類(lèi)分析
4.2 融安金柑FcFT1、FcFT2、FcTFL1基因的表達(dá)分析
4.2.1 融安金柑FcFT1、FcFT2、FcTFL1基因的組織特異性分析
4.2.2 融安金柑FcFT1、FcFT2、FcTFL1基因在不同花器官表達(dá)特性分析
4.2.3 融安金柑FcFT1、FcFT2、FcTFL1基因在盛花期的日周期變化規(guī)律
4.3 融安金柑FcFT1、FcFT2、FcTFL1基因?qū)M南芥遺傳轉(zhuǎn)化分析
5 結(jié)論與創(chuàng)新性
5.1 結(jié)論
5.2 創(chuàng)新性
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]龍眼胚性愈傷組織中TFL1基因克隆及其表達(dá)分析[J]. 陳裕坤,林玉玲,賴(lài)鐘雄. 園藝與種苗. 2015(08)
[2]高等植物成花素FT基因:基因與機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 呂有軍,王彩霞,楊衛(wèi)軍,張永山. 分子植物育種. 2015(06)
[3]TFL1基因在甜櫻桃童期向成年階段轉(zhuǎn)變過(guò)程中的作用[J]. 李長(zhǎng)龍,李洋,王晶,閆國(guó)華,張曉明,段續(xù)偉,張開(kāi)春,李天忠. 園藝學(xué)報(bào). 2015(06)
[4]FT/TFL類(lèi)基因在山葡萄雌雄花中的表達(dá)分析[J]. 徐維華,鄭秋玲,劉萬(wàn)好,沙玉芬,范書(shū)亭,唐美玲. 華北農(nóng)學(xué)報(bào). 2014(S1)
[5]桑樹(shù)成花素基因FT表達(dá)載體的構(gòu)建及轉(zhuǎn)化擬南芥植株的早花現(xiàn)象[J]. 吳素麗,蔣濤,劉立群,郭龍,蘇超,張敏娟,錢(qián)永華,焦鋒. 蠶業(yè)科學(xué). 2014(06)
[6]植物開(kāi)花整合子基因FT的研究進(jìn)展[J]. 李球紅,費(fèi)元,龐基良. 北方園藝. 2014(18)
[7]成花基因FT/TFL1基因家族及其對(duì)植物成花轉(zhuǎn)變遺傳改良的研究進(jìn)展[J]. 杜麗,李勇鵬,姚瑤. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(07)
[8]木本果樹(shù)開(kāi)花相關(guān)基因的研究進(jìn)展[J]. 魏丹鳳,曾黎輝. 亞熱帶農(nóng)業(yè)研究. 2014(02)
[9]百子蓮開(kāi)花相關(guān)基因ApFT的克隆及表達(dá)分析[J]. 石玉波,張荻,申曉輝,王玲,卓麗環(huán). 園藝學(xué)報(bào). 2014(04)
[10]黃瓜CsFT基因的克隆及其功能分析[J]. 張娟,顏爽爽,趙文圣,張小蘭. 園藝學(xué)報(bào). 2013(11)
博士論文
[1]龍眼種質(zhì)資源遺傳多樣性分析及低溫對(duì)石硤龍眼影響研究[D]. 陳虎.廣西大學(xué) 2012
[2]芒果SCoT分子標(biāo)記與逆境和重要開(kāi)花時(shí)間相關(guān)基因研究[D]. 羅聰.廣西大學(xué) 2012
[3]大豆FT/TFL1基因克隆、表達(dá)模式及功能分析[D]. 胡瑞波.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2009
[4]葡萄花發(fā)育相關(guān)基因的克隆與表達(dá)特性研究[D]. 宗成文.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
碩士論文
[1]早實(shí)枳FT類(lèi)似基因的結(jié)構(gòu)分析和功能驗(yàn)證[D]. 靖艷玲.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[2]桑樹(shù)FT基因的克隆及表達(dá)分析[D]. 李四軍.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2013
[3]水稻TFL2基因功能初步研究[D]. 綦煌松.廣西大學(xué) 2012
[4]薔薇科植物TFL1和SOC1基因的克隆及表達(dá)分析[D]. 李晶晶.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[5]農(nóng)桿菌介導(dǎo)的TFL1基因轉(zhuǎn)化菊花的研究[D]. 侯香玲.河南大學(xué) 2011
[6]洋蔥LEAFY和FT同源基因的克隆與表達(dá)初析[D]. 黃鈺.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[7]薔薇科幾種植物FT同源基因克隆及序列分析[D]. 左陽(yáng).華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[8]早實(shí)枳TFL1/CEN同源基因的表達(dá)分析及功能特征[D]. 李紅蓮.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[9]光周期誘導(dǎo)甘菊成花中ClFT基因表達(dá)特性的研究[D]. 王琳琳.北京林業(yè)大學(xué) 2010
[10]蘋(píng)果MdFT基因克隆及功能的初步鑒定[D]. 李偉明.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
本文編號(hào):2922244
【文章來(lái)源】:廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:69 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮寫(xiě)及符號(hào)說(shuō)明
1 前言
1.1 研究背景
1.2 植物開(kāi)花調(diào)控相關(guān)基因研究進(jìn)展
1.2.1 FT基因研究進(jìn)展
1.2.2 TFL1基因研究進(jìn)展
1.3 研究目的與意義
1.4 技術(shù)路線圖
2 材料與方法
2.1 植物材料
2.2 試劑藥品
2.3 主要儀器
2.4 實(shí)驗(yàn)方法
2.4.1 樣品RNA提取與逆轉(zhuǎn)錄
2.4.2 基因全長(zhǎng)克隆
2.4.3 DNA的提取
2.4.4 基因的生物信息學(xué)分析
2.4.5 實(shí)時(shí)熒光定量表達(dá)分析
2.4.6 基因超量表達(dá)載體構(gòu)建
2.4.7 農(nóng)桿菌感受態(tài)的制備和轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌
2.4.8 農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化擬南芥方法
2.4.9 擬南芥轉(zhuǎn)基因植株的篩選
2.4.10 擬南芥轉(zhuǎn)基因植株的檢測(cè)方法與性狀觀察
3 結(jié)果與分析
3.1 同源基因克隆
3.2 生物信息學(xué)分析
3.2.1 蛋白質(zhì)理化信息分析
3.2.2 氨基酸序列同源性比較與進(jìn)化樹(shù)分析
3.3 FcFT1同源基因時(shí)空表達(dá)分析
3.3.1 FcFT1基因的組織特異性分析
3.3.2 FcFT1基因在不同花器官表達(dá)特性分析
3.3.3 FcFT1在盛花期的日周期變化規(guī)律
3.4 FcFT2同源基因時(shí)空表達(dá)分析
3.4.1 FcFT2基因的組織特異性分析
3.4.2 FcFT2基因在不同花器官表達(dá)特性分析
3.4.3 FcFT2在盛花期的日周期變化規(guī)律
3.5 FcTFL1同源基因時(shí)空表達(dá)分析
3.5.1 FcTFL1基因的組織特異性分析
3.5.2 FcTFL1基因在不同花器官表達(dá)特性分析
3.5.3 FcTFL1在盛花期的日周期變化規(guī)律
3.6 真核載體構(gòu)建及遺傳轉(zhuǎn)化擬南芥
3.6.1 載體構(gòu)建
3.6.2 農(nóng)桿菌浸染擬南芥及T0代的篩選
3.6.3 轉(zhuǎn)基因擬南芥T1代的培養(yǎng)與檢測(cè)
3.6.4 轉(zhuǎn)基因擬南芥T1代植株的特性觀察
4 討論
4.1 融安金柑FcFT1、FcFT2、FcTFL1基因的克隆及序列分析
4.1.1 融安金柑FcFT1、FcFT2、FcTFL1同源基因克隆
4.1.2 融安金柑FcFT1、FcFT2、FcTFL1序列分析和聚類(lèi)分析
4.2 融安金柑FcFT1、FcFT2、FcTFL1基因的表達(dá)分析
4.2.1 融安金柑FcFT1、FcFT2、FcTFL1基因的組織特異性分析
4.2.2 融安金柑FcFT1、FcFT2、FcTFL1基因在不同花器官表達(dá)特性分析
4.2.3 融安金柑FcFT1、FcFT2、FcTFL1基因在盛花期的日周期變化規(guī)律
4.3 融安金柑FcFT1、FcFT2、FcTFL1基因?qū)M南芥遺傳轉(zhuǎn)化分析
5 結(jié)論與創(chuàng)新性
5.1 結(jié)論
5.2 創(chuàng)新性
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]龍眼胚性愈傷組織中TFL1基因克隆及其表達(dá)分析[J]. 陳裕坤,林玉玲,賴(lài)鐘雄. 園藝與種苗. 2015(08)
[2]高等植物成花素FT基因:基因與機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 呂有軍,王彩霞,楊衛(wèi)軍,張永山. 分子植物育種. 2015(06)
[3]TFL1基因在甜櫻桃童期向成年階段轉(zhuǎn)變過(guò)程中的作用[J]. 李長(zhǎng)龍,李洋,王晶,閆國(guó)華,張曉明,段續(xù)偉,張開(kāi)春,李天忠. 園藝學(xué)報(bào). 2015(06)
[4]FT/TFL類(lèi)基因在山葡萄雌雄花中的表達(dá)分析[J]. 徐維華,鄭秋玲,劉萬(wàn)好,沙玉芬,范書(shū)亭,唐美玲. 華北農(nóng)學(xué)報(bào). 2014(S1)
[5]桑樹(shù)成花素基因FT表達(dá)載體的構(gòu)建及轉(zhuǎn)化擬南芥植株的早花現(xiàn)象[J]. 吳素麗,蔣濤,劉立群,郭龍,蘇超,張敏娟,錢(qián)永華,焦鋒. 蠶業(yè)科學(xué). 2014(06)
[6]植物開(kāi)花整合子基因FT的研究進(jìn)展[J]. 李球紅,費(fèi)元,龐基良. 北方園藝. 2014(18)
[7]成花基因FT/TFL1基因家族及其對(duì)植物成花轉(zhuǎn)變遺傳改良的研究進(jìn)展[J]. 杜麗,李勇鵬,姚瑤. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(07)
[8]木本果樹(shù)開(kāi)花相關(guān)基因的研究進(jìn)展[J]. 魏丹鳳,曾黎輝. 亞熱帶農(nóng)業(yè)研究. 2014(02)
[9]百子蓮開(kāi)花相關(guān)基因ApFT的克隆及表達(dá)分析[J]. 石玉波,張荻,申曉輝,王玲,卓麗環(huán). 園藝學(xué)報(bào). 2014(04)
[10]黃瓜CsFT基因的克隆及其功能分析[J]. 張娟,顏爽爽,趙文圣,張小蘭. 園藝學(xué)報(bào). 2013(11)
博士論文
[1]龍眼種質(zhì)資源遺傳多樣性分析及低溫對(duì)石硤龍眼影響研究[D]. 陳虎.廣西大學(xué) 2012
[2]芒果SCoT分子標(biāo)記與逆境和重要開(kāi)花時(shí)間相關(guān)基因研究[D]. 羅聰.廣西大學(xué) 2012
[3]大豆FT/TFL1基因克隆、表達(dá)模式及功能分析[D]. 胡瑞波.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2009
[4]葡萄花發(fā)育相關(guān)基因的克隆與表達(dá)特性研究[D]. 宗成文.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
碩士論文
[1]早實(shí)枳FT類(lèi)似基因的結(jié)構(gòu)分析和功能驗(yàn)證[D]. 靖艷玲.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[2]桑樹(shù)FT基因的克隆及表達(dá)分析[D]. 李四軍.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2013
[3]水稻TFL2基因功能初步研究[D]. 綦煌松.廣西大學(xué) 2012
[4]薔薇科植物TFL1和SOC1基因的克隆及表達(dá)分析[D]. 李晶晶.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[5]農(nóng)桿菌介導(dǎo)的TFL1基因轉(zhuǎn)化菊花的研究[D]. 侯香玲.河南大學(xué) 2011
[6]洋蔥LEAFY和FT同源基因的克隆與表達(dá)初析[D]. 黃鈺.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[7]薔薇科幾種植物FT同源基因克隆及序列分析[D]. 左陽(yáng).華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[8]早實(shí)枳TFL1/CEN同源基因的表達(dá)分析及功能特征[D]. 李紅蓮.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[9]光周期誘導(dǎo)甘菊成花中ClFT基因表達(dá)特性的研究[D]. 王琳琳.北京林業(yè)大學(xué) 2010
[10]蘋(píng)果MdFT基因克隆及功能的初步鑒定[D]. 李偉明.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
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