干旱災害在我國頻繁發(fā)生,每年因干旱帶來的損失十分嚴重。小麥是我國重要的糧食作物,但是干旱、病蟲危害等自然脅迫已經(jīng)影響到其產(chǎn)量和品質(zhì)。因此,提高作物抗旱能力成為育種工作的一個重要目標。近年來,隨著對農(nóng)作物等表皮蠟質(zhì)成分和生物學功能的進一步研究,人們對小麥表皮蠟質(zhì)的關(guān)注越來越多。超長鏈脂肪醇合成基因FAR（Fatty acyl-coenzyme A reductase）曾在擬南芥和小麥中被證實參與脂肪醇的合成過程。因此,本實驗克隆了二穗短柄草表皮蠟質(zhì)脂肪醇合成基因BdFAR 2,并通過酵母異源表達和二穗短柄草過表達,對其功能進行了分析驗證,獲得了以下的研究結(jié)果:1.蠟質(zhì)的檢測結(jié)果表明:二穗短柄草葉片表皮蠟質(zhì)主要由初級醇、脂肪酸、醛和烷烴組成,其中,初級醇的含量最多,并以C₂₆醇為主,脂肪酸、醛和烷烴的含量相對較低。葉片正反面表皮蠟質(zhì)晶體均為片狀結(jié)構(gòu)。2.通過生物信息學技術(shù)分析目的基因與小麥蠟質(zhì)合成基因蛋白序列,從二穗短柄草中克隆了1個超長鏈脂肪醇合成基因,命名為BdFAR 2,3.BdFAR 2基因在酵母中異源表達的結(jié)果表明,BdFAR 2基因具有合成C_24... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：碩士

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葉片表皮不同蠟質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)（引自KochandEnsikat2008）

結(jié)果發(fā)現(xiàn)，擬南芥的蠟質(zhì)合成主要有兩種途徑，即脫羰途徑和�；�原途徑（圖1-2）（Kolattukudy 1996）。圖1-2 擬南芥莖蠟質(zhì)合成途徑（包括�；�原途徑及脫羰基途徑）Fig.1-2 Pathways for wax biosynthesis in Arabidopsis stems (including acyl reduction pathway anddecarbonylation pathway)兩種途徑中，�；�原途徑因主要合成的產(chǎn)物為伯醇，又被稱為初級醇途徑，前人通過對小麥的�；�原途徑進行分析研究發(fā)現(xiàn)，小麥中，�；�原途經(jīng)主要合成的是C28伯醇（Baker 1982）。關(guān)于蠟質(zhì)合成途徑的研究一般認為初級醇的合成是通過兩個分開的酶分別催化合成的，即 VLCFA �；o酶 A 酯先形成初級醇，該過程通過酯酰還原

公司進行將其部分菌液進行測序，測序正確的單克冰箱備用。粒將正確的單克隆接種到含有一定比例的 Kan（50 m和 200 r·min-1條件下，進行 12~14 h 的培養(yǎng)后，按照取試劑盒中說明書的具體步驟進行提取質(zhì)粒，并將體的構(gòu)建以連接帶有候選基因的克隆載體 pMD18-T 為模板與經(jīng)過相同雙酶切反應 pYES2 酵母表達載體上，方 2.2.2.2。pYES2-BdFAR 2 和空載體 pYES2 質(zhì)粒 DNA 轉(zhuǎn)入到charomyces cerevisiae）INVSc1 菌株中，通過營養(yǎng)缺目的基因的酵母菌株。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]冬閑田種植大麥不同生育期的營養(yǎng)價值和青貯品質(zhì)[J]. 田靜,謝昭良,劉家杏,許留興,唐國建,張建國.  草業(yè)科學. 2017(04)
[2]小麥品系CP98(11)不同器官表皮蠟質(zhì)組分和蠟質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)的差異分析[J]. 羅文巧,吳洪啟,趙帥,汪勇,趙璟琛,王中華.  西北植物學報. 2017(03)
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碩士論文
[1]一粒小麥、節(jié)節(jié)麥葉片表皮蠟質(zhì)組成及β-酮脂酰輔酶A合成酶KCS基因的克隆與功能分析[D]. 王艷婷.西北農(nóng)林科技大學 2015
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本文編號：2922190