干旱災(zāi)害在我國頻繁發(fā)生,每年因干旱帶來的損失十分嚴(yán)重。小麥?zhǔn)俏覈匾募Z食作物,但是干旱、病蟲危害等自然脅迫已經(jīng)影響到其產(chǎn)量和品質(zhì)。因此,提高作物抗旱能力成為育種工作的一個重要目標(biāo)。近年來,隨著對農(nóng)作物等表皮蠟質(zhì)成分和生物學(xué)功能的進(jìn)一步研究,人們對小麥表皮蠟質(zhì)的關(guān)注越來越多。超長鏈脂肪醇合成基因FAR（Fatty acyl-coenzyme A reductase）曾在擬南芥和小麥中被證實參與脂肪醇的合成過程。因此,本實驗克隆了二穗短柄草表皮蠟質(zhì)脂肪醇合成基因BdFAR 2,并通過酵母異源表達(dá)和二穗短柄草過表達(dá),對其功能進(jìn)行了分析驗證,獲得了以下的研究結(jié)果:1.蠟質(zhì)的檢測結(jié)果表明:二穗短柄草葉片表皮蠟質(zhì)主要由初級醇、脂肪酸、醛和烷烴組成,其中,初級醇的含量最多,并以C₂₆醇為主,脂肪酸、醛和烷烴的含量相對較低。葉片正反面表皮蠟質(zhì)晶體均為片狀結(jié)構(gòu)。2.通過生物信息學(xué)技術(shù)分析目的基因與小麥蠟質(zhì)合成基因蛋白序列,從二穗短柄草中克隆了1個超長鏈脂肪醇合成基因,命名為BdFAR 2,3.BdFAR 2基因在酵母中異源表達(dá)的結(jié)果表明,BdFAR 2基因具有合成C_24... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

葉片表皮不同蠟質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)（引自KochandEnsikat2008）

結(jié)果發(fā)現(xiàn)，擬南芥的蠟質(zhì)合成主要有兩種途徑，即脫羰途徑和�；�原途徑（圖1-2）（Kolattukudy 1996）。圖1-2 擬南芥莖蠟質(zhì)合成途徑（包括�；�原途徑及脫羰基途徑）Fig.1-2 Pathways for wax biosynthesis in Arabidopsis stems (including acyl reduction pathway anddecarbonylation pathway)兩種途徑中，�；�原途徑因主要合成的產(chǎn)物為伯醇，又被稱為初級醇途徑，前人通過對小麥的�；�原途徑進(jìn)行分析研究發(fā)現(xiàn)，小麥中，�；�原途經(jīng)主要合成的是C28伯醇（Baker 1982）。關(guān)于蠟質(zhì)合成途徑的研究一般認(rèn)為初級醇的合成是通過兩個分開的酶分別催化合成的，即 VLCFA �；o酶 A 酯先形成初級醇，該過程通過酯酰還原

公司進(jìn)行將其部分菌液進(jìn)行測序，測序正確的單克冰箱備用。粒將正確的單克隆接種到含有一定比例的 Kan（50 m和 200 r·min-1條件下，進(jìn)行 12~14 h 的培養(yǎng)后，按照取試劑盒中說明書的具體步驟進(jìn)行提取質(zhì)粒，并將體的構(gòu)建以連接帶有候選基因的克隆載體 pMD18-T 為模板與經(jīng)過相同雙酶切反應(yīng) pYES2 酵母表達(dá)載體上，方 2.2.2.2。pYES2-BdFAR 2 和空載體 pYES2 質(zhì)粒 DNA 轉(zhuǎn)入到charomyces cerevisiae）INVSc1 菌株中，通過營養(yǎng)缺目的基因的酵母菌株。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]冬閑田種植大麥不同生育期的營養(yǎng)價值和青貯品質(zhì)[J]. 田靜,謝昭良,劉家杏,許留興,唐國建,張建國.  草業(yè)科學(xué). 2017(04)
[2]小麥品系CP98(11)不同器官表皮蠟質(zhì)組分和蠟質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)的差異分析[J]. 羅文巧,吳洪啟,趙帥,汪勇,趙璟琛,王中華.  西北植物學(xué)報. 2017(03)
[3]不同小麥品種(系)穗部表皮蠟質(zhì)的成分及含量分析[J]. 楊昊虹,史雪,夏凌峰,汪勇,王中華,李春蓮.  麥類作物學(xué)報. 2017(03)
[4]大麥葉片表皮蠟質(zhì)組分和含量及其與抗旱性的關(guān)系[J]. 趙東賓,張海祿,王仙,齊軍倉,惠宏杉,林立昊,王鳳,鄭許光.  新疆農(nóng)業(yè)科學(xué). 2017(01)
[5]大麥幼苗葉片表皮蠟質(zhì)組分及含量對外源ABA的響應(yīng)及其對表皮透性的影響[J]. 朱雙艷,齊軍倉,惠宏杉,廖樂,林立昊,華淼源.  西南農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2015(05)
[6]基于可變模糊評價法的農(nóng)業(yè)旱災(zāi)災(zāi)后恢復(fù)力評估研究——以河北省為例[J]. 谷洪波,劉新意,劉芷妤.  干旱地區(qū)農(nóng)業(yè)研究. 2014(05)
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[8]小麥葉片表皮蠟質(zhì)成分及含量分析[J]. 張蕓蕓,李婷婷,孫瑜琳,王艷婷,王美玲,汪勇,史雪,權(quán)力,李春蓮,王中華.  麥類作物學(xué)報. 2014(07)
[9]紐荷爾臍橙果皮光澤型突變體貯藏性研究[J]. 曾瓊,吳啟,王玥辰,劉德春,劉山蓓,劉傳福,劉勇.  江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2013(03)
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碩士論文
[1]一粒小麥、節(jié)節(jié)麥葉片表皮蠟質(zhì)組成及β-酮脂酰輔酶A合成酶KCS基因的克隆與功能分析[D]. 王艷婷.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2015
[2]小麥葉片和穗表皮蠟質(zhì)組分分析及其相關(guān)合成基因的篩選[D]. 孫瑜琳.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2015
[3]干旱、鹽、UV-B、ABA對小麥、水稻葉片角質(zhì)層的影響[D]. 宮慧芳.山西師范大學(xué) 2012



本文編號：2922190