葫蘆素是藥西瓜中重要的藥用活性成分,具有抗炎、保肝、抗癌、提高機體免疫力等多種生物活性功能。植物體內(nèi)葫蘆素配糖體與葫蘆素的含量相當(dāng),已有研究表明葫蘆素E配糖體（CuE-Glu）是決定藥西瓜苦味的主要因素。UDP-糖基轉(zhuǎn)移酶是催化葫蘆素形成葫蘆素配糖體的關(guān)鍵酶。本研究以藥西瓜“WM9”品種葉片為材料,成功克隆了兩個UDP-糖基轉(zhuǎn)移酶基因的cDNA序列,并對其進行了原核表達分析。本實驗采用RT-PCR法,成功獲得1,546 bp和1,559 bp的基因全長序列,分別命名為UDP-E1和UDP-E2。對擴增獲得的編碼序列進行生物學(xué)信息分析,確定UDP-E1基因的完整開放閱讀框（ORF）為1314bp,可編碼氨基酸437個,蛋白質(zhì)命名為:UDP-E1,理論分子量為49.02kDa,等電點為5.99,屬于穩(wěn)定蛋白質(zhì)。UDP-E2基因的ORF為846bp,可編碼氨基酸281個,蛋白質(zhì)命名為:UDP-E2,理論分子量為32.78 kDa,等電點為5.23,屬不穩(wěn)定蛋白質(zhì),這兩個基因?qū)儆谔腔D(zhuǎn)移酶超家族。通過分析發(fā)現(xiàn)這兩個基因的氨基酸序列均不具有跨膜結(jié)構(gòu),不具有信號肽結(jié)構(gòu)。蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)表明,蛋白UD... 

【文章來源】：延邊大學(xué)吉林省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２．１?ｐｃｒ擴增ｕｄｐ－糖基轉(zhuǎn)移酶基因??

？ＳＫＸＸｒＣＴＧ－ＣＸＸＣＡＪ＊ａｋ＿ＫＫＴＯＣＴＣＧＴ?ＴＸＴＴＸＸＴＯＣＸＴＸＣ．ａＣＪＷＸＴＴｔｉＣＴＸ．ＣＣＪＣｒｒａＪｖＸＴＯＧｉＸＯＧｒｒａＣｉ＾Ｔ?ＸＡＪＣＴＴＪ＾ＴＧＣ?Ｘ：ＴＸＣｒｒ＊Ｊ４ｊｋＣ??Ｇ?ＴＴ?ＡｊＯＴ?ＪｔＵＴＣＣＣ?ＪｋＴＣＣＣ?ＡＣ?ＣＴＸ?ＴＴ?ＣＴＴＡＣＴｉｉ?ＴＣ??圖２．３：藥西瓜基因的編碼區(qū)核酸序列及推導(dǎo)氨基酸序列??Ｆｉｇ?２．３?Ｅｎｃｏｄｉｎｇ?ｎｕｃｌｅｉｃ?ａｃｉｄ?ｓｅｑｕｅｎｃｅ?ａｎｄ?ｄｅｄｕｃｅｄ?ａｍｉｎｏ?ａｃｉｄ?ｓｅｑｕｅｎｃｅ?ｏｆ?Ｍｅｄｉｃｉｎｅ??ｗａｔｅｒｍｅｌｏｎ?ＵＤＰ?－?Ｅ２?ｇｅｎｅ??２．?２．４．?２蛋白保守區(qū)預(yù)測結(jié)果??在ＮＣＢＩ網(wǎng)站上利用Ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ?Ｄｏｍａｉｎ工具中的ＣＤ－ｓｅａｒｃｈ進行功能域分??析

延邊大學(xué)碩士畢業(yè)論文??．?２．?４．?３蛋白的親水性預(yù)測結(jié)果??使用ＰｒｏｔＳｃａｌｅ軟件對蛋白質(zhì)親水性進行分析，結(jié)果顯示蛋白ＵＤＰ－Ｅ１的疏水性為２．０６７，位于第２３８位點；最小值是－２．３４４，位于第７４位點，總平水性指數(shù)為－０．００９，依據(jù)氨基酸分值越低親水性越強反之亦然的規(guī)律可預(yù)測ＵＤＰ－Ｅ１整體表現(xiàn)為親水性（見圖２．６）?〇??蛋白ＵＤＰ－Ｅ２的最大疏水性為２．１５６，位于第１６位點；最小值是－２．８６７，第１８０位點，總平均親水性指數(shù)為－０．２８０，依據(jù)氨基酸分值越低親水性越強亦然的規(guī)律可預(yù)測蛋白ＵＤＰ－Ｅ２整體表現(xiàn)為親水性（見圖２．７）。??ＰｒｏｔＳｃａｌｅ?ｏｕｔｐｕｔ?ｆｏｒ?ｕｓｅｒ＿ｓｅｑｕｅｎｃｅ??

【參考文獻】：
期刊論文
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[3]葫蘆素B治療喉鱗狀細胞癌的實驗研究[D]. 劉亭彥.中國醫(yī)科大學(xué) 2008
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碩士論文
[1]藥西瓜蔓中葫蘆素B提取及其固體脂質(zhì)納米粒制備與功能特性研究[D]. 劉鈺瑩.沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[2]葫蘆素E通過PI3K/Akt/NF-κB信號通路抑制TNF-α誘導(dǎo)的MH7A細胞炎癥因子的分泌[D]. 賈慶運.山東中醫(yī)藥大學(xué) 2015
[3]葫蘆素E誘導(dǎo)HeLa細胞發(fā)生自噬的分子機制研究[D]. 張曉鈺.暨南大學(xué) 2015
[4]葫蘆素B對食管鱗癌細胞放射敏感性影響的相關(guān)研究[D]. 潘丁龍.福建醫(yī)科大學(xué) 2015
[5]葫蘆素B對于結(jié)腸癌細胞生長與增殖抑制作用的研究[D]. 黃琛.河北醫(yī)科大學(xué) 2015
[6]葫蘆素E對脂多糖誘導(dǎo)的小鼠巨噬細胞RAW264.7炎癥反應(yīng)的抑制作用及其機制研究[D]. 喬靜.暨南大學(xué) 2013
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本文編號：2908036