本研究通過針對海南島番木瓜發(fā)病情況進行采樣調(diào)查,進一步確認了番木瓜環(huán)斑病毒（papaya ringspot virus,PRSV）仍然是目前嚴重危害海南地區(qū)番木瓜生產(chǎn)的主要病害,嚴重制約著番木瓜產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,給農(nóng)民帶來巨大的經(jīng)濟損失。常規(guī)的田間管理或栽培措施對病毒控制的效果較差或者成本較高,防治PRSV最直接有效的措施是種植抗病品種,目前商業(yè)化種植的主要抗病品種都是轉(zhuǎn)基因品系。但是通過我們的調(diào)查發(fā)現(xiàn),現(xiàn)有的轉(zhuǎn)基因品系己經(jīng)對PRSV的一些株系表現(xiàn)出抗性減弱,甚至不抗的現(xiàn)象。近幾年發(fā)展起來的CRISPR技術(shù)提供了新的抗病毒策略。我們通過與美國明尼蘇達大學(xué)Dan Voytas實驗室合作,在本實驗室建立起了用golden gate法構(gòu)建CRISPR基因編輯載體的體系,構(gòu)建了兩套基因編輯載體。（1）將編輯DNA雙鏈的CRISPR/Cas9系統(tǒng)進行了改造,用FnCas9替換了 Cas9的CRISPR/FnCas9系統(tǒng)可以識別切割RNA。本研究對病毒不同株系和不同基因的保守區(qū)域進行分析,并設(shè)計了多個不同的gRNA,串聯(lián)到植物轉(zhuǎn)化表達載體中,可以對不同株系的病毒進行識別并切割其RNA,真正達到廣譜抗PR... 

【文章來源】：海南大學(xué)海南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１全球番木瓜產(chǎn)ａ：與其他重要熱帶水果的比較（２０１４年）??Ｆｉｇ．ｌ?Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｏｕｔｐｕｔ?ｏｆ?ｐａｐａｙａ?ｗｉｔｈ?ｏｔｈｅｒ?ｉｍｐｏｒｔａｎｔ?ｔｒｏｐｉｃａｌ?ｆｒｕｉｔｓ?（２０１４）??

（Ｍｉｎｇ，?ｅｔａＬ，?２００８）；同時這將為研究番木瓜的抗病機制找出病毒作用靶點，培育高??產(chǎn)抗病品質(zhì)優(yōu)良的番木瓜提供理論依據(jù)。我國番木瓜種植區(qū)主要位于熱帶和亞熱帶地??區(qū)，如臺灣、海南、廣東、廣西、云南、四川等地區(qū)（林尤奮，２００４）。如圖２所示，??２??

ｎａｓａｓ，?Ａ％；?５９Ｋ）和夕卜殼蛋白（ｃｏａｔ?ｐｒｏｔｅｉｎ，?ＣＰ；?３５Ｋ）。??ＰＲＳＶ植株的葉片上會表現(xiàn)出嵌紋、黃化和扭曲的癥狀，果實上會莖和葉柄上則會出現(xiàn)水漬狀油性條紋。ＰＲＳＶ是由幾種蚜蟲以非持的，這個過程同時還需要ＣＰ和／／Ｃ－ｉＶｏ的參與（Ｐｉｒｏｎｅ?ａｎｄ?Ｂｌａｎｃ，毒分離物可以分為兩種類型：Ｐ型和Ｗ型。ＰＲＳＶ－Ｐ和ＰＲＳＶ－Ｗ都物，但是只有ＰＲＳＶ－Ｐ能在自然狀態(tài)下感染番木瓜（Ｇｏｎｓａｌｖｅｓ，?ｅｔ?ａｌ．，的ＰＲＳＶ均可以接種到用作單病斑分離的藜科作物上，且只會引起于番木瓜科和葫蘆科植物則是系統(tǒng)發(fā)病。ＰＲＳＶ在我國于１９５９年（任佩瑜等，丨９６４），迄今為止ＰＲＳＶ己廣泛流行于世界范圍內(nèi)的限制約著番木瓜產(chǎn)業(yè)的進一步持續(xù)發(fā)展。目前已報道的ＰＲＳＶ－Ｐ危區(qū)有非洲、亞洲熱帶地區(qū)、加勒比地區(qū)、美洲中部和南部地區(qū)、南ｎａｎｔ，?ＦｅｒｍｉｎａｎｄＲｏｙｅ，２００７）。由于ＰＲＳＶ分布如此廣泛，現(xiàn)在它己熱帶地區(qū)番木瓜生產(chǎn)的主要限制因素。??

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號：2901855