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五倍子基于中醫(yī)箍圍對轉(zhuǎn)基因K14-VEGF銀屑病小鼠的治療作用與抗血管增生機制研究

發(fā)布時間:2020-11-13 20:26
   目的:1、通過觀察五倍子乳膏對轉(zhuǎn)基因K14-VEGF銀屑病小鼠PASI評分、Baker評分及炎細(xì)胞數(shù)的影響,初步評價五倍子乳膏治療轉(zhuǎn)基因K14-VEGF銀屑病小鼠的療效。2、通過研究五倍子乳膏對轉(zhuǎn)基因K14-VEGF銀屑病小鼠血清VEGF、NO和皮損MVD、Ang-2的影響,初步探討其治療該小鼠的機制。方法:選取轉(zhuǎn)基因K14-VEGF銀屑病鼠60只、FVB鼠10只。將60只轉(zhuǎn)基因K14-VEGF銀屑病鼠隨機分為6組,每組10只,分別為五倍子乳膏高(50%,A組)、中(25%,B組)、低(15%,C組)濃度組,陽性對照組(0.1%他扎羅汀乳膏,D組),基質(zhì)對照組(凡士林,E組),模型組(空白組,F組)。FVB鼠(G組)為1組。分組后對各組小鼠耳后皮損予以標(biāo)記,以蓋頂圍涂方式分別對A、B、C、D、E組鼠耳后皮損部位涂以相應(yīng)乳膏,E組涂搽乳膏基質(zhì)。藥量為0.1g/cm~2,2次/日,持續(xù)30天。F、G組不做任何處理。用藥4周后進(jìn)行PASI評分,采集小鼠血清及皮損標(biāo)本,對皮損標(biāo)本予以HE染色后進(jìn)行Baker評分及炎細(xì)胞計數(shù),分別采用ELISA法和硝酸根還原酶法測定血清VEGF和NO含量,使用免疫組化法對皮損中MVD、Ang-2水平進(jìn)行檢測。應(yīng)用統(tǒng)計軟件SPSS 20.0處理所有數(shù)據(jù):滿足正態(tài)分布的定量資料用x±s表示,組間對比用單因素方差分析,組內(nèi)兩兩對比用LSD法。非正態(tài)分布的定量資料組間對比用秩和檢驗。檢驗水準(zhǔn)α=0.05,以P0.05作為有顯著性差異的標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果:1、轉(zhuǎn)基因K14-VEGF銀屑病小鼠分別經(jīng)高、中、低濃度的五倍子乳膏、他扎羅汀乳膏、凡士林治療4周后,高、中、低濃度的五倍子乳膏組、他扎羅汀乳膏組小鼠皮損嚴(yán)重程度(PASI評分)明顯低于凡士林、空白組小鼠,結(jié)果有顯著性差異(P0.05)。以他扎羅汀乳膏組小鼠的療效最為明顯,高、中、低濃度組次之,不同濃度間的療效差異不顯著(P0.05)。凡士林組小鼠皮損嚴(yán)重程度和空白組相比,兩者差異不顯著(P0.05)。以上5種藥物均不能使轉(zhuǎn)基因K14-VEGF銀屑病小鼠皮損(PASI評分)恢復(fù)至FVB鼠水平。2、各組小鼠耳部皮損的Baker積分比較:高、中、低濃度的五倍子乳膏組、他扎羅汀乳膏組小鼠的Baker積分明顯低于凡士林、空白組,結(jié)果有顯著性差異(P0.05)。以他扎羅汀乳膏組小鼠療效最為明顯,高、中、低濃度組次之,不同濃度間差異有顯著性(P0.05)。凡士林組小鼠皮損Baker評分和空白組無著性差異(P0.05)。以上5種藥物均不能使轉(zhuǎn)基因K14-VEGF銀屑病小鼠皮損組織病理學(xué)積分恢復(fù)至FVB鼠水平。3、各組小鼠耳部皮損的炎細(xì)胞計數(shù)比較:高、中、低濃度的五倍子乳膏組、他扎羅汀乳膏組的炎細(xì)胞計數(shù)低于凡士林、空白組低,結(jié)果存在顯著性差異(P0.05)。以他扎羅汀乳膏組小鼠的療效最為明顯,高、中、低濃度組次之,高濃度組與中濃度組、低濃度組療效差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),中濃度組與低濃度組療效差異不顯著(P0.05)。凡士林組小鼠皮損的炎細(xì)胞計數(shù)與空白組差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。以上5種藥物均不能使轉(zhuǎn)基因K14-VEGF銀屑病小鼠皮損炎細(xì)胞浸潤恢復(fù)至FVB鼠水平。4、每組動物血清中VEGF水平比較:高、中、低濃度的五倍子乳膏組、他扎羅汀乳膏組小鼠血清VEGF水平低于凡士林、空白組,結(jié)果存在顯著性差異(P0.05)。以他扎羅汀乳膏組小鼠療效最為明顯,高、中、低濃度組次之,不同濃度間差異有顯著性(P0.05)。凡士林組和空白組間,差異不顯著(P0.05)。以上5種藥物均不能使轉(zhuǎn)基因K14-VEGF銀屑病小鼠血清中VEGF水平降至FVB鼠水平。5、每組動物血清中NO水平比較:高、中、低濃度的五倍子乳膏組、他扎羅汀乳膏組小鼠血清NO水平比凡士林組、空白組小鼠低,結(jié)果存在顯著性差異(P0.05)。以他扎羅汀乳膏組小鼠的療效最為明顯,高、中、低濃度組次之,高、低濃度間、中、低濃度間療效有顯著性差異(P0.05)。高、中濃度間、凡士林組與空白組,差異不不顯著(P0.05)。以上5種藥物均不能使轉(zhuǎn)基因K14-VEGF銀屑病小鼠血清NO水平降至FVB鼠水平。6、每組動物皮損組織中MVD比較:高、中、低濃度的五倍子乳膏組、他扎羅汀乳膏組小鼠皮損組織中MVD水平比凡士林組、空白組小鼠低,結(jié)果存在顯著性差異(P0.05)。以他扎羅汀乳膏組小鼠的療效最為明顯,高、中、低濃度組次之,高、低濃度組間、中、低濃度組間療效具有顯著差異(P0.05)。高、中濃度組間、凡士林與空白組,無顯著差異(P0.05)。以上5種藥物均不能使轉(zhuǎn)基因K14-VEGF銀屑病小鼠皮損組織中MVD水平降至FVB鼠水平。7、每組動物皮損組織中Ang-2比較:他扎羅汀乳膏組小鼠皮損組織中Ang-2水平比高、中、低濃度的五倍子乳膏組、凡士林組、空白組小鼠低,結(jié)果存在顯著性差異(P0.05)。他扎羅汀乳膏尚不能使皮損組織中Ang-2水平降至FVB鼠水平。高、中、低濃度五倍子乳膏、凡士林、空白組之間,結(jié)果不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1、五倍子乳膏對轉(zhuǎn)基因K14-VEGF銀屑病小鼠的皮損嚴(yán)重程度、組織病理表現(xiàn)、炎細(xì)胞浸潤有明顯改善作用。以高濃度組效果最明顯,其作用弱于他扎羅汀乳膏。2、五倍子乳膏可明顯降低轉(zhuǎn)基因K14-VEGF銀屑病小鼠血清NO、VEGF水平,改善耳部皮損MVD,對耳部皮損的Ang-2作用不明顯,其中高濃度組改善作用最明顯。3、五倍子乳膏治療轉(zhuǎn)基因K14-VEGF銀屑病小鼠的療效與濃度相關(guān),其療效隨濃度遞減。4、五倍子乳膏對轉(zhuǎn)基因K14-VEGF銀屑病小鼠的作用可能是通過抗微血管增生實現(xiàn)。
【學(xué)位單位】:西南醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位年份】:2018
【中圖分類】:R285.5
【部分圖文】:

小鼠,五倍子,乳膏


各組小鼠

耳部,小鼠,光鏡


圖 2 各組小鼠耳部皮損 PASI 評分的比較Fig. 2 Comparison of PASI scores in ear lesions of mice in each group2 HE 染色2.1 HE 染色光鏡下表現(xiàn)

耳部,小鼠,五倍子,乳膏


各組小鼠耳部皮損
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