MicroRNAs在正常細(xì)胞的自我更新,分化和腫瘤發(fā)生發(fā)展中扮演著十分重要的角色。MircroRNA100(MiR100)在2002年首次被發(fā)現(xiàn),其位于11號(hào)染色體的q24.1區(qū)域(內(nèi)含子2號(hào)),與let7a-2共轉(zhuǎn)錄。MiR1OO在許多癌癥中表現(xiàn)出抑制增殖的功能。我們已經(jīng)證明在乳腺癌細(xì)胞系和正常的乳腺細(xì)胞系中含有具有干細(xì)胞特性的一小類細(xì)胞,其可以通過(guò)Aldefluor分析實(shí)驗(yàn)將更具有Aldehyde dehydrogenase(ALDH)酶活性的細(xì)胞分離出。通過(guò)對(duì)ALDH陽(yáng)性(干細(xì)胞)和陰性乳腺癌細(xì)胞中的microRNAs分析發(fā)現(xiàn),MiR1OO可能對(duì)干細(xì)胞發(fā)揮重要作用。我們發(fā)現(xiàn)MiR100在ALDH陰性細(xì)胞中比ALDH陽(yáng)性細(xì)胞中顯著低表達(dá)。利用一種四環(huán)素誘導(dǎo)的MiR100慢病毒過(guò)表達(dá)系統(tǒng),我們發(fā)現(xiàn)過(guò)表達(dá)MiR100可以在乳腺癌細(xì)胞系和小鼠異種移植瘤模型中減少ALDH陽(yáng)性細(xì)胞比例,并且可以抑制腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。這其中的機(jī)制是由于MiR100直接下調(diào)了BMPR2和一系列干細(xì)胞相關(guān)的調(diào)控基因和染色體重構(gòu)基因的表達(dá),如SMARCA5,SMARCD1,BAZ2A,FGFR and IGFR。內(nèi)源性抑制MiR1OO可以促進(jìn)小鼠異種移植模型中腫瘤的發(fā)展。這些結(jié)果表明MiR1OO可以調(diào)控乳腺癌中的腫瘤干細(xì)胞的自我更新和腫瘤發(fā)展,其在生物學(xué)和臨床上都具有十分重要的應(yīng)用前景。后續(xù)的研究我們發(fā)現(xiàn),N端豆蔻�；窷MT1是MiR1OO的下游靶標(biāo)之一。豆蔻�；堑鞍追g時(shí)和翻譯后的一種修飾,其在細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和腫瘤生成中扮演著十分重要的角色。近年來(lái)的證據(jù)表明,針對(duì)豆蔻�；闹委熓且环N有效清除癌癥的新方法。然而,對(duì)其機(jī)制的研究尚不清楚。我們?cè)谘芯恐邪l(fā)現(xiàn),shRNA介導(dǎo)的NMT1敲低在體外和體內(nèi)模型中抑制乳腺腫瘤的起始,增殖和發(fā)展。我們發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)活性氧可以負(fù)調(diào)NMT1的表達(dá),反過(guò)來(lái)NMT1的敲低會(huì)進(jìn)一步增強(qiáng)細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激反應(yīng),從而形成一種正反饋調(diào)節(jié)機(jī)制。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn),抑制NMT1會(huì)導(dǎo)致降解蛋白的聚集和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng),后者可以和線粒體互相作用從而產(chǎn)生更多的活性氧。產(chǎn)生的氧化應(yīng)激反應(yīng)和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)繼而可以激活JNK通路,產(chǎn)生自噬等反應(yīng)抑制了三陰性乳腺腫瘤的發(fā)展。這些研究為靶向NMT1治療乳腺癌提供了理論依據(jù)。
【學(xué)位單位】：中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R737.9
【部分圖文】：

２．２．２質(zhì)粒構(gòu)建和病毒感染??一種高效的可誘導(dǎo)型的慢病毒載體ｐＴＲＩＰＺ用來(lái)過(guò)表達(dá)ＭｉＲｌＯＯ，其示意圖??如圖２．１所示。其中有兩個(gè)重要組件使得其為可誘導(dǎo)型的，一個(gè)是ＴＲＥ，即為??四環(huán)素響應(yīng)原件，一個(gè)是ｒｔＴＡ３，反式四環(huán)素激活因子，當(dāng)存在四環(huán)素時(shí)其可以??促進(jìn)反式四環(huán)素誘導(dǎo)因子去結(jié)合四環(huán)素響應(yīng)原件，從而起始ＭｉＲｌＯＯ的表達(dá)。??其中又有紅色熒光蛋白指示ＭｉＲｌＯＯ的表達(dá)有無(wú)。??ＴＲＥ?ＵＢＣ??ｍｉｒ１０°??髮?ｐＴＲＩＰＺ?Ｉ??＾＿ｍｍｍｍ匪！；謂￣）??圖２．１?ｐＴＲＩＰＺ質(zhì)粒示意圖??１０??

進(jìn)行表達(dá)譜的測(cè)序分析。我們發(fā)現(xiàn)了一系列的ＭｉＲＮＡｓ在這兩類細(xì)胞群??中出現(xiàn)明顯差異表達(dá)，其中ＭｉＲｌＯＯ的表達(dá)量在ＡＬＤＨ陰性細(xì)胞群中明顯要高??于ＡＬＤＨ陽(yáng)性細(xì)胞群（圖３．１．Ａ）。為了驗(yàn)證測(cè)序結(jié)果，我們對(duì)ＳＵＭ１５９中的??ＡＬＤＨ陽(yáng)性和陰性群體進(jìn)行了?Ｑ－ＰＣＲ驗(yàn)證，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明ＳＵＭ１５９中的ＡＬＤＨ??陰性細(xì)胞群中ＭｉＲｌＯＯ的表達(dá)量更高（圖３．１．Ｂ）。此結(jié)果表明，在ＳＵＭ１５９細(xì)??胞系中，ＭｉＲｌＯＯ的表達(dá)在乳腺腫瘤干細(xì)胞中是顯著下調(diào)的。??Ａ?Ｂ??繼?ｍｉｒ－２００ｃ?０?７?＊?＇?＊?＇??ｉ?？｜Ｅ：??美各遍祕(mì)丨一ｔ７ａ?！�。骸浚�?■??泛?０?Ｈｉｎｒ—?，??ｔ??＾?’?ＳＵＭ１５９ＡＬＤＨ＋?ＳＵＭ１６９ＡＬＤＨ．??圖３．１?ＭｉＲｌＯＯ在ＳＵＭ１５９中的ＡＬＤＨ＋乳腺腫瘤干細(xì)胞中低表達(dá)??Ａ．氣泡圖呈現(xiàn)出不同種ＭｉＲＮＡｓ在ＳＵＭ１５９ＡＬＤＨ＋與ＡＬＤＨ－中的表達(dá)豐富與差異的??顯著性；Ｂ．通過(guò)ｑＲＴ－ＰＣＲ檢測(cè)ＭｉＲｌＯＯ在ＳＵＭ１５９?ＡＬＤＨ＋與ＡＬＤＨ－細(xì)胞群中的表達(dá)??量。Ｅｒｒｏｒ?ｂａｒｓ＝?Ｍｅａｎ土?ＳＴＤＥＶ．?＊，戶?＜?０．０５。??３．２?ＭｉＲｌＯＯ在乳腺癌ＡＬＤＨ陽(yáng)性干細(xì)胞群中低表達(dá)??接下來(lái)，我們想驗(yàn)證上述結(jié)果是否對(duì)不同分子類別的乳腺癌具有普適性。??我們按照同樣的分離方法，分離了管腔型乳腺癌細(xì)胞系ＭＣＦ７，基底型乳腺癌??細(xì)胞系ＳＵＭ１４９以及三種人乳腺癌移植瘤模型ＵＭ２

??ＵＭ２來(lái)自于基底型乳腺癌）。如圖３．２所示，這些細(xì)胞中分離得到的結(jié)果與??ＳＵＭ１５９中相一致，即ＭｉＲｌＯＯ在具有腫瘤干細(xì)胞特性的ＡＬＤＨ陽(yáng)性乳腺癌細(xì)??胞群體中表達(dá)量低。??０．１５?，??〇?？￣￣１￣？?０?０８?１??ｉｒ?ｉ〇．１?－?ｍＬｈ?？?？?０．０６?．??Ｉ｜〇＊＇?Ｉ?ｉｆ?０?０４?■??復(fù)?〇ｌ．■■■■■＿ｍｍ?，??ＭＣＦ７ＡＬＯＨ＋?ＭＣＦ７?ＡＬＤＨ－?ＳＵＭ?１４９?ＡＬＯＨ－ｆ?ＳＵＭ１４９?ＡＬＤＨ－??＿?°００２６?■ｍｒｆ－ｌＯＯ?ｆ?〇?〇３?？ｍｉｒ－１００?－?＿?０?０４?＊ｍ＞ｆ?＾?？??Ｉｆ０００２?＇＾ｉ｜＃ｗ６＇?＇ｉ｜°〇０３Ｍ６：??§?§０．００１５?？?■■?ｇ?§?０．０２?－?９Ｈ?８?§?０．０２Ｓ?＇??１§?■?ｉ?？?０．０１６．?■?｜｜?０．０２?Ｔ??ｆＬｉｌＪＬ??Ｌ＾ｉｌｉ?Ｉ??ＵＭ２ＡＬＤＨ＋?ＵＭ２?ＡＬＤＨ－?ＭＣＩ?ＡＬＤＨ＋?ＭＣ１?ＡＬＤＨ－?ＵＭ１?ＡＬＤＨ＋?ＵＭ１?ＡＬＯＨ－??圖３．２?ＭｉＲｌＯＯ在不同種乳腺腫瘤干細(xì)胞中低表達(dá)??ｑＲＴ－ＰＣＲ檢測(cè)ＭｉＲｌＯＯ在不同類型的乳腺癌細(xì)胞系和移植瘤模型中ＡＬＤＨ＋與ＡＬＤＨ－??細(xì)胞群中的表達(dá)量。Ｅｒｒｏｒｂａｒｓ＝?Ｍｅａｎ土ＳＴＤＥＶ．?＊，尸?＜?０．０５。??３．３?ＭｉＲｌＯＯ表達(dá)量與細(xì)胞系分型無(wú)明顯關(guān)系??基于上述的結(jié)果，我們先猜測(cè)ＭｉＲｌＯＯ表達(dá)量可能與乳腺癌細(xì)胞系的分子??類型或者細(xì)胞中所含有的ＡＬＤＨ陽(yáng)性細(xì)胞群的比例有關(guān)。如圖３．３．Ａ所示，??Ａ?Ｂ??１０??０６?ｌ?？?９??．．．」
【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 郭奕陽(yáng);朱彩虹;郭秀娟;;人表皮生長(zhǎng)因子受體2陽(yáng)性乳腺癌與抗人表皮生長(zhǎng)因子受體2新型藥物[J];河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2018年01期

2 閆東;;人表皮生長(zhǎng)因子受體3在人表皮生長(zhǎng)因子受體2陽(yáng)性乳腺癌組織中的表達(dá)[J];腫瘤基礎(chǔ)與臨床;2017年06期

3 張青;甘淋;;乳腺癌生物標(biāo)志物的研究進(jìn)展[J];生命的化學(xué);2018年01期

4 張斌;梁愛(ài)玲;劉勇軍;;外泌體在乳腺癌中耐藥機(jī)制的研究進(jìn)展[J];中國(guó)醫(yī)藥生物技術(shù);2018年02期

5 張國(guó)強(qiáng);劉增艷;王曉紅;楊振林;;血清微小RNA-409-3p表達(dá)在乳腺癌早期診斷中的價(jià)值[J];江蘇醫(yī)藥;2018年04期

6 王晨飛;胡浩霖;呂建鑫;張亞男;;乳腺癌侵襲相關(guān)分子的研究熱點(diǎn)[J];東南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2018年04期

7 童彤;;草莓能抑制乳腺癌擴(kuò)散[J];中國(guó)果業(yè)信息;2017年05期

8 陳暢;黃欣;茅楓;周易冬;林燕;孫強(qiáng);;乳腺癌眼部轉(zhuǎn)移的診治現(xiàn)狀[J];中華乳腺病雜志(電子版);2018年05期

9 易堅(jiān);劉志勇;劉鳳恩;;二氫丹參酮Ⅰ抑制乳腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)的機(jī)制[J];廣東醫(yī)學(xué);2016年22期

10 夏超;鄭馬慶;劉媛;陳群英;陳妍;黃新恩;許瀟月;沈波;;槲寄生抗腫瘤有效成份提取及其對(duì)乳腺癌細(xì)胞的抑制作用[J];南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2016年11期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 馬蕓;乳腺癌組織中FANCF相關(guān)基因的表達(dá)及其與順鉑耐藥的作用機(jī)制研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2018年

2 趙建華;MRI動(dòng)態(tài)增強(qiáng)聯(lián)合鉬靶在乳腺癌早期診治臨床路徑中的價(jià)值研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2017年

3 李俊堂;miR-568抑制乳腺癌細(xì)胞體內(nèi)外轉(zhuǎn)移機(jī)制的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2014年

4 王秋麗;攜帶自殺基因Dm-dNK和CD40L的選擇復(fù)制型腺病毒對(duì)乳腺癌殺傷作用的研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2018年

5 徐璐;袢狀核酸內(nèi)切酶FEN1參與乳腺癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移及他莫昔芬耐藥的機(jī)制研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2018年

6 林姝;miR-30c和miR-181a調(diào)控腫瘤阿霉素耐藥與發(fā)生發(fā)展的機(jī)制研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2018年

7 劉崇;SALL4與乳腺癌生物學(xué)行為的相關(guān)性及影響乳腺癌阿霉素耐藥性的機(jī)制研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2018年

8 楊得娟;乳腺癌細(xì)胞分解利用脂肪細(xì)胞來(lái)源的脂質(zhì)促進(jìn)自身惡性發(fā)展的研究探討[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2017年

9 劉蜀;MAP2K4在乳腺癌中的表達(dá)、功能及分子機(jī)制的初步研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2018年

10 劉鵬英;Prohibitin對(duì)雌激素受體陽(yáng)性乳腺癌中雄激素受體表達(dá)調(diào)控的研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2018年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 張艾潔;黃芩苷對(duì)高侵襲性乳腺癌的作用及分子機(jī)制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2017年

2 于鶴;同一觀察者對(duì)乳腺癌Ki67免疫組化檢測(cè)結(jié)果判讀重復(fù)性研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2018年

3 董程程;EZH2相互作用蛋白在乳腺癌細(xì)胞中功能研究[D];桂林醫(yī)學(xué)院;2018年

4 張恒瑀;ING3過(guò)表達(dá)對(duì)乳腺癌細(xì)胞生物學(xué)特性影響[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2018年

5 楊德春;血尿酸水平與乳腺癌臨床相關(guān)性研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2018年

6 陳婉;阿霉素及其納米載藥系統(tǒng)在敏感及耐藥乳腺癌中的抗癌作用及機(jī)制研究[D];浙江大學(xué);2016年

7 陳趣;IL-6R mRNA對(duì)卵巢癌、肺癌和乳腺癌的預(yù)后作用研究[D];蘇州大學(xué);2018年

8 謝逸;1,25(OH)_2D_3通過(guò)調(diào)節(jié)Ras表達(dá)干預(yù)乳腺癌細(xì)胞增殖、凋亡的實(shí)驗(yàn)研究[D];湖南師范大學(xué);2018年

9 杜佩云;MiR-296-5p/GAB對(duì)雌激素信號(hào)通路的調(diào)節(jié)及功能研究[D];福建農(nóng)林大學(xué);2015年

10 黃竹媛;MRI聯(lián)合USPIO示蹤技術(shù)對(duì)乳腺癌骨轉(zhuǎn)移早期發(fā)現(xiàn)的實(shí)驗(yàn)研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2018年

本文編號(hào)：2879745