關(guān)于衰老的研究一直是老年醫(yī)學(xué)以及生物學(xué)研究的熱點(diǎn)。衰老是一切生物發(fā)展的自然規(guī)律,是不以人類意志為轉(zhuǎn)移的生物學(xué)法規(guī)。實(shí)驗(yàn)表明,通過服用一些具有抗衰老的藥(食)物,可以有效延緩衰老的進(jìn)程。Klotho基因是科學(xué)家在1997年發(fā)現(xiàn)的又一個(gè)與衰老相關(guān)的基因。研究表明,Klotho基因在體內(nèi)的表達(dá)量與機(jī)體的衰老程度有密切關(guān)系,因此研究藥物對(duì)Klotho基因的表達(dá)調(diào)控,對(duì)揭示藥物的抗衰老機(jī)理具有非常重要的指導(dǎo)意義。白藜蘆醇是一種廣泛存在于植物中的非黃酮多酚類化合物,目前已經(jīng)在21個(gè)科32個(gè)屬72種植物中發(fā)現(xiàn)了白藜蘆醇。白黎蘆醇的生物學(xué)活性一直是研究的熱點(diǎn),但有關(guān)于白藜蘆醇抗衰老活性,特別是對(duì)Klotho基因的調(diào)控作用缺乏系統(tǒng)研究。本研究通過體內(nèi)外抗衰老實(shí)驗(yàn),系統(tǒng)研究白藜蘆醇的抗衰老活性以及對(duì)小鼠體內(nèi)Klotho基因表達(dá)的調(diào)控。主要內(nèi)容如下:1.白藜蘆醇的體外抗氧化活性。本實(shí)驗(yàn)中通過DPPH法,ABTS法,鄰二氮菲-Fe~(2+)法,以及總還原能力的測(cè)定,結(jié)果表明白藜蘆醇在體外具有抗氧化活性,其中對(duì)ABTS自由基的清除能力強(qiáng)于Vc;2.白藜蘆醇體外抗衰老作用。通過CCK-8細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)找到適宜的用藥濃度,通過酶聯(lián)免疫分析(Elisa)檢測(cè)白藜蘆醇對(duì)小鼠腎小管上皮細(xì)胞(TCMK-1)中小鼠丙二醛(MDA),小鼠過氧化氫酶(CAT),小鼠超氧化物歧化物酶(SOD),小鼠谷胱甘肽-過氧化氫酶(GSH-PX)等抗氧化酶的調(diào)節(jié)作用;過氧化氫作用于小鼠以及大鼠的腎小管上皮細(xì)胞造氧化損傷模型,白藜蘆醇作用后改善小鼠以及大鼠腎小管上皮細(xì)胞的氧化應(yīng)激狀態(tài),修復(fù)過氧化氫損傷的腎小管上皮細(xì)胞;3.白藜蘆醇體內(nèi)抗衰老活性及其對(duì)Klotho基因的表達(dá)調(diào)控作用。D-半乳糖法造小鼠衰老模型,造模成功后給藥治療觀察小鼠狀態(tài),提取小鼠腎臟以及腦組織中總RNA,檢測(cè)小鼠腎組織和腦組織中Klotho基因的表達(dá)量,以及各組織中(心、肝、脾、腎)中小鼠丙二醛(MDA),小鼠過氧化氫酶(CAT),小鼠超氧化物歧化物(SOD)酶含量,結(jié)合組織病理切片觀察白藜蘆醇對(duì)腦組織、腎組織、肝組織的保護(hù)作用,以及降低氧化損傷、增強(qiáng)腎功能,提高認(rèn)知能力。研究結(jié)果表明,白藜蘆醇主要通過三種途徑發(fā)揮抗衰老活性。首先,利用自身抗氧化功能清除體內(nèi)自由基;其次,通過介導(dǎo)體內(nèi)抗氧化酶活性增強(qiáng)機(jī)體清除自由基的能力,避免氧化應(yīng)激損傷;在基因水平上,上調(diào)腦組織以及腎組織中Klotho基因的表達(dá)發(fā)揮抗衰老活性,具有增強(qiáng)腎功能,減少由衰老導(dǎo)致的腎功能減退以及腦組織損傷。
【學(xué)位單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R285.5
【部分圖文】：

Klotho 能夠激活 Nrf2 顯著地認(rèn)知功能障礙的重要原因，腦體缺少相應(yīng)的抗氧化體系，腦部抗氧化防御體系的調(diào)控[21高，氧化損傷加劇。Klotho 基行性疾病以及其它的慢性病[22陷導(dǎo)致的小鼠認(rèn)知功能的衰退trol）是一種具有很強(qiáng)生物活性羥基二苯乙烯[23]，自然界中白穩(wěn)定的形式，如圖 1.1 為反

基的清除率測(cè)定9.2 mg 的 ABTS，加入溶液，避光，4 ℃保存純水定容，得到濃度為8 μL 的 K2S2O4溶液混母液，使其在 734 nm8.55 mg 的白藜蘆醇， 的 Vc，定容至 25 mL的白藜蘆醇溶液，充分

還原性測(cè)定配置：稱取鐵氰化鉀 1 g，用雙蒸水稀釋鉀溶液，保存，備用；的配置：稱取三氯化鐵 0.1 g，用雙蒸水氯化鐵溶液；的配制：稱取三氯乙酸 10 g，用雙蒸水稀氯乙酸溶液；配置：稱取 28.5 mg 的白藜蘆醇，定容至 2，備用；：稱取 22 mg 的 Vc，定容至 25 mL，得到 5液 1 mL 于 EP 管中，再加入 2.5 mL 的磷

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2827506