【摘要】：老芒麥是廣泛分布在我國西北地區(qū)的一種優(yōu)質(zhì)牧草,飼草及種子產(chǎn)量較高,適應(yīng)性較強。但在種子保存過程中,常會因更新繁殖不及時或較差的保存環(huán)境,使種子發(fā)生老化。本研究以內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學育成的國審品種“農(nóng)牧老芒麥”種子為材料,在高溫高濕條件下老化,獲得相對發(fā)芽率75.21%、54.00%和36.00%的樣本材料,以未經(jīng)老化處理的種子(相對發(fā)芽率100%)為對照,相對應(yīng)的老化時間為0 h、24h、72 h和144 h。對老化的種子活力、生理生化和差異基因表達等進行研究,擬探討農(nóng)牧老芒麥種子老化的可能原因,揭示其種子老化機理以及抗老化的生理和分子機制,為種子生產(chǎn)和長期保存提供理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:(1)農(nóng)牧老芒麥種子相對發(fā)芽勢、相對發(fā)芽率、相對發(fā)芽指數(shù)、相對活力指數(shù)、抗氧化酶活性和可溶性蛋白含量均隨老化時間的延長而下降;而電導率、丙二醛含量、脯氨酸和可溶性糖逐漸升高。老化處理抑制農(nóng)牧老芒麥的萌發(fā),隨老化程度的加深,細胞膜結(jié)構(gòu)和功能遭到破壞。(2)相關(guān)分析表明,超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化物酶(POD)、過氧化氫酶(CAT)活性和可溶性蛋白與各個活力指標之間呈現(xiàn)極顯著正相關(guān)關(guān)系;電導率、丙二醛、脯氨酸和可溶性糖與各個活力指標之間呈現(xiàn)顯著或極顯著負相關(guān)關(guān)系。該結(jié)果表明,上述代謝調(diào)節(jié)物質(zhì)含量及相關(guān)酶活性可以用作判斷農(nóng)牧老芒麥種子老化階段程度的指標。(3)利用256對引物組合,對農(nóng)牧老芒麥的四個老化梯度進行cDNA-AFLP分析,共篩選出136對多態(tài)性較好、條帶清晰的引物組合,經(jīng)擴增得到2720個條帶,回收了老化過程中一直保留的50條上調(diào)表達條帶。(4)回收的50條差異片段二次擴增后,對亮度較好的22個條帶測序分析,其中與NCBI blast比對的19個差異表達片段中有13個與已知序列同源,功能上主要涉及細胞生長發(fā)育、能量代謝、防御和修復機制等類別;另外6個差異表達片段在數(shù)據(jù)庫里暫時沒有找到同源序列,它們可能屬于與老化相關(guān)的未知基因序列。
【學位授予單位】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：S543.9
【圖文】：

.01 or P=0.05 levels,respectively四個梯度農(nóng)牧老芒麥葉片進整齊清晰，無拖尾。紫外分A280 均在 1.9～2.0，表明總A 的試驗要求（圖 5）。T 活性 電導率 丙二醛 脯.943**-0.837*-0.964**-0.984**-0.864*-0.943**-0.972**-0.852*-0.941**-0.900**-0.860*-0.972**-0

圖6 雙鏈 cDNA 電泳檢測圖Fig. 6 2nd cDNA electrophoresis test results泳道 M：2000 bp ladder；泳道 1：對照；泳道 2-4：老化 24 h，72 h，144 hlane M：2000 bp ladder；lane 1：ck；lane 2-4：aging 24 h，72 h，144 h3.6 cDNA-AFLP 差異基因表達分析3.6.1 預擴增結(jié)果預擴增既能反應(yīng)酶切與連接效果的好壞，又能為 AFLP 選擇性擴增提供模版。對雙鏈 cDNA 進行雙酶切，采用表 1 中的接頭和預擴引物進行連接和預擴增，預擴增產(chǎn)物經(jīng) 1.2%瓊脂糖凝膠電泳檢測顯示

圖6 雙鏈 cDNA 電泳檢測圖g. 6 2nd cDNA electrophoresis test resladder；泳道 1：對照；泳道 2-4：老化 ladder；lane 1：ck；lane 2-4：aging 2達分析連接效果的好壞，又能為 A采用表 1 中的接頭和預擴引電泳檢測顯示，條帶均勻彌散擴增模版進行后續(xù)試驗。

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

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本文編號：2784803