【摘要】：目的探究電針對去卵巢骨質(zhì)疏松模型大鼠骨密度、生物力學變化及Wnt3a和β-catenin的基因及蛋白表達的影響,從分子水平揭示電針對去卵巢大鼠的作用機制。方法1動物分組與干預(yù)方法選取60只SPF級雌性SD大鼠,日齡60d左右,體質(zhì)量180~220g,隨機抽取24只分為空白組和假手術(shù)組,每組12只。假手術(shù)組不切除雙側(cè)卵巢只暴露;其余行雙側(cè)切卵巢法建立骨質(zhì)疏松模型大鼠,模型復(fù)制成功后,隨機分成模型組、藥物組、針刺組,每組12只。造模后飼養(yǎng)13周,檢測骨密度和骨礦物含量以證實骨質(zhì)疏松癥模型復(fù)制成功。之后開始治療,針刺組取“腎俞”、“脾俞”、“三陰交、“足三里”,每次電針刺激30min并灌服與藥物組相同體積的蒸餾水,每日1次,連續(xù)治療5d,間隔2d,20d為1個療程,共治療3個療程;藥物組大鼠以戊酸雌二醇水溶液灌胃,療程同針刺組;空白組不予處理,常規(guī)飼養(yǎng);模型組、假手術(shù)組大鼠灌服與藥物組相同體積的蒸餾水,療程同針刺組;各組大鼠每周稱重1次,以便調(diào)整給藥劑量。治療期結(jié)束后麻醉處死大鼠,分離股骨、脛骨和第4腰椎,保存待用。2指標檢測2.1全身骨密度及股骨、腰椎骨密度檢測使用雙能X線骨密度儀(DXA)檢測造模13周后全身骨密度,以及治療結(jié)束后左側(cè)股骨和腰椎的骨密度。2.2生物力學檢測(1)三點彎曲試驗:將檢測完骨密度的左側(cè)股骨放置在加載平臺上,檢測完,記錄并計算最大載荷和彈性模量。(2)壓縮試驗:將檢測完骨密度的椎骨分離出第4腰椎,放置在加載平臺上,記錄并計算最大載荷和彈性模量。2.3 Wnt3a、β-catenin基因表達:RT-PCR分析法檢測。2.4 Wnt3a、β-catenin蛋白表達:免疫組化法檢測。結(jié)果1.大鼠全身及股骨、腰椎骨密度測定結(jié)果飼養(yǎng)13周時,全身骨密度檢測結(jié)果顯示,模型組與空白組比較,大鼠的全身骨密度和骨礦物含量顯著降低(P0.05),證明骨質(zhì)疏松模型建立成功。治療3個療程后,股骨、腰椎骨密度檢測結(jié)果顯示,模型組與空白組及假手術(shù)組比較,骨密度顯著降低(P0.05);針刺組和藥物組與模型組比較,大鼠骨密度顯著增高(P0.05);針刺組、藥物組與假手術(shù)組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。2.生物力學檢測三點彎曲試驗、壓縮實驗結(jié)果:模型組與假手術(shù)組比較,彈性模量、最大載荷顯著降低(P0.05)。藥物組和針刺組與模型組比較,藥物組大鼠彈性模量、最大載荷顯著增高(P0.05),針刺組和藥物組與假手術(shù)組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。3.Wnt3a和β-catenin基因表達模型組Wnt3a和β-catenin蛋白表達量最低與空白組和假手術(shù)組相比Wnt3a和β-catenin基因表達量顯著下降(P0.05);經(jīng)過藥物或針刺干預(yù)后,Wnt3a和β-catenin蛋白表達顯著升高,與模型組相比具有統(tǒng)計學意義(P0.05)4.Wnt3a和β-catenin蛋白表達模型組Wnt3a和β-catenin基因表達量最低與空白組和假手術(shù)組相比Wnt3a和β-catenin蛋白表達量顯著下降(P0.05);經(jīng)過藥物或針刺干預(yù)后,Wnt3a和β-catenin基因表達顯著升高,與模型組相比具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論針刺能有效增加大鼠骨密度,減少骨量流失,改善骨生物力學的性能,對絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的治療作用機制,可能是通過調(diào)控Wnt3a(起始因子)和β-catenin(介導(dǎo)因子)的蛋白及基因表達作用,來激活Wnt信號通路,這一信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑在整個成骨細胞分化增殖過程中起著重要的作用,以此調(diào)節(jié)骨重建系統(tǒng)的平衡,從而達到治療效果。
【學位授予單位】：甘肅中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R245
【圖文】：

比較：*P>0.05，**P＜0.05；與模型組比較：▲P＜0.0骨 Wnt3a 基因表達結(jié)果 6 所示，模型組 Wnt3a 基因表達量最低，與空白組和假P＜0.05）；經(jīng)藥物或針刺干預(yù)后，Wnt3a 基因表達顯統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。表 6 各組大鼠 Wnt3a 基因表達量比較（ X ±S）n MOD12121212121.014±0.181.093±0.260.609±0.21.505±0.512.050±0.82較，**P＜0.05。

電針對去卵巢大鼠 Wnt3a 和β-catenin 的基因及蛋白表達影響的實驗研究表 8 各組大鼠 Wnt3a 蛋白表達量比較（ X ±S）組別 n MOD空白組假手術(shù)組模型組藥物組針刺組121212121297.25±11.409**94.583±10.384**83.616±4.088132.928±6.381**129.6±5.991**注：與模型組比較，**P＜0.05。

【參考文獻】

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1 王桐桐;溫強;韓玉萍;王婷;高大鵬;陳明龍;陳瑜;趙R

本文編號：2727677