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溫度對滯育期大豆食心蟲體內(nèi)代謝酶及儲存蛋白基因表達(dá)的影響

發(fā)布時間:2020-06-11 06:46
【摘要】:大豆食心蟲Leguminivora glycinivorella Matsumura是大豆上的重要害蟲,是蛀莢為害的專性滯育害蟲,以啃食、鉆蛀豆莢為害,嚴(yán)重影響大豆的品質(zhì)和產(chǎn)量。它以老熟幼蟲作繭越冬,滯育期10個月左右,防治困難。明確大豆食心蟲的未滯育-滯育-滯育解除過程的代謝變化,可為我們準(zhǔn)確的測報大豆食心蟲的發(fā)生期,進(jìn)而做好防治,減少農(nóng)藥的使用提供科學(xué)依據(jù)。本文研究了經(jīng)4℃、13℃、18℃、23℃、25℃及室外自然條件不同溫度處理后的大豆食心蟲Leguminirora glycinioorella從未滯育(滯育前,9月)-滯育(滯育初,11月;滯育中期,2月)-滯育解除(6月)過程中,其體內(nèi)抗凍、滯育主要代謝酶-海藻糖酶(trehalase,THL)、山梨醇脫氫酶(sorbitol dehydrogenase,SH)、丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK)、過氧化物酶(peroxidase,POD)及儲存蛋白hexamerin基因在不同階段表達(dá)量的變化,為今后大豆食心蟲的發(fā)生測報提供依據(jù)。本研究采用試劑盒法測定大豆食心蟲在滯育前后,經(jīng)誘導(dǎo)滯育溫度處理后和進(jìn)入滯育期不同階段體內(nèi)上述4種酶的表達(dá)量變化。用SPSS 23.0和Excel數(shù)據(jù)分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。研究結(jié)果表明:(1)自然條件下,大豆食心蟲由滯育前(9月)到滯育初期(11月)體內(nèi)的海藻糖酶、山梨醇脫氫酶、丙酮酸激酶、過氧化物酶的活力均發(fā)生顯著變化,海藻糖酶活力由11.37 U/mg降到10.34 U/mg,山梨醇脫氫酶活力由3.84 U/mg降到0.98 U/mg;丙酮酸激酶活力由9.10U/mg降到1.23 U/mg;而過氧化物酶活力由6.53 U/mg增加到8.12 U/mg。(2)經(jīng)4℃、13℃、18℃、23℃、25℃不同誘導(dǎo)溫度處理的大豆食心蟲至滯育初期(11月),其體內(nèi)的丙酮酸激酶、海藻糖酶、山梨醇脫氫酶、過氧化物酶4種代謝酶活力變化明顯,均分別與自然條件下的對照組相應(yīng)代謝酶酶活力差異顯著;4℃誘導(dǎo)下大豆食心蟲體內(nèi)海藻糖酶、山梨醇脫氫酶、丙酮酸激酶活力比自然條件下(對照)的這3種酶酶活力顯著降低,分別降低4.41 U/mg,2.88 U/mg,4.51 U/mg,而過氧化物酶的酶活力則顯著升高了5.55 U/mg。(3)經(jīng)4℃、13℃、18℃、23℃、25℃不同誘導(dǎo)溫度下處理的大豆食心蟲至滯育中期(2月),其體內(nèi)的丙酮酸激酶、海藻糖酶、山梨醇脫氫酶、過氧化物酶4種代謝酶活力變化差異顯著。4℃、13℃、18℃、23℃、25℃不同溫度處理的下滯育的大豆食心蟲轉(zhuǎn)移到室外條件下均可解除滯育,23℃和25℃處理后的大豆食心蟲比自然條件滯育蟲體更易解除滯育。滯育中期(2月)4℃誘導(dǎo)處理的大豆食心蟲,(1)其體內(nèi)山梨醇脫氫酶活力顯著高于25℃誘導(dǎo)處理的大豆食心蟲體內(nèi)山梨醇脫氫酶活力;(2)其體內(nèi)海藻糖酶和丙酮酸激酶活力與18℃誘導(dǎo)處理的大豆食心蟲體內(nèi)的酶活力相似;(3)其體過氧化物酶活力低于18℃誘導(dǎo)處理的大豆食心蟲體內(nèi)的酶活力;(4)滯育中期,18℃誘導(dǎo)處理的大豆食心蟲體內(nèi)海藻糖酶、山梨醇脫氫酶和過氧化物酶活力高于其它4個溫度處理的大豆食心蟲體內(nèi)相應(yīng)的這3種酶的活力;(5)滯育中期25℃誘導(dǎo)的大豆食心蟲體內(nèi)上述4種代謝酶活力與自然條件下的相應(yīng)的4種酶活力相似。滯育解除期(6月),4℃、13℃、18℃、23℃、25℃誘導(dǎo)處理的大豆食心蟲體內(nèi)丙酮酸激酶活力高于滯育初期和滯育中期上述5個溫度處理的大豆食心蟲體內(nèi)丙酮酸激酶的活力,但滯育解除期上述5個溫度處理的大豆食心蟲體內(nèi)丙酮酸激酶活力差異不明顯。(4)大豆食心蟲經(jīng)4℃,13℃,18℃,23℃,25℃,5個溫度誘導(dǎo)進(jìn)入滯育后,至2月其體內(nèi)海藻糖酶、山梨醇脫氫酶、過氧化物酶的活力均達(dá)到了最高值,分別為15.25 U/mg,1.94 U/mg,35.56 U/mg,之后逐漸降低;而丙酮酸激酶活力達(dá)到了滯育期的最低值1.57 U/mg,之后逐漸升高。因此,2月是大豆食心蟲滯育期間代謝的發(fā)生變化的轉(zhuǎn)折時期,是由深度滯育向滯育解除轉(zhuǎn)變的關(guān)鍵期,即滯育“蘇醒期”,代謝開始由弱轉(zhuǎn)強(qiáng)。(5)大豆食心蟲在不同誘導(dǎo)溫度處理進(jìn)入滯育后,不同滯育階段其體內(nèi)儲存蛋白hexamerin基因的表達(dá)量變化明顯。4℃誘導(dǎo)處理的大豆食心蟲體內(nèi)儲存蛋白hexamerin基因的表達(dá)量比同期自然條件下的該蛋白基因表達(dá)量明顯要高,且差異顯著。大豆食心蟲滯育初期(11月)、滯育轉(zhuǎn)折期(2月)、滯育解除后(6月)均達(dá)到峰值,分別為5.58 U/mg,9.84U/mg,10.11 U/mg,同樣也是在2月份其表達(dá)量出現(xiàn)了轉(zhuǎn)折。
【圖文】:

海藻糖酶,過氧化物酶,活力,酶活力


3.1.2 溫度對滯育幼蟲代謝酶活力影響3.1.2.1 過氧化物酶和海藻糖酶活力從圖3-2中可以看出,海藻糖酶活力在5.74 U/mg-11.41 U/mg之間,其中4℃、13℃、18℃、25℃都顯著低于室外對照的酶活力11.41 U/mg,23℃誘導(dǎo)的大豆食心蟲酶活力稍低于室外條件酶活力,表現(xiàn)為差異不顯著(P>0.05)。過氧化物酶活力在6.53 U/mg-12.41 U/mg之間,各誘導(dǎo)溫度跟室外條件下6.53 U/mg相比,都達(dá)到差異顯著水平(P<0.05)。4℃誘導(dǎo)下酶活力12.09 U/mg顯著高于23℃、25℃誘導(dǎo)條件的酶活力8.19 U/mg,8.99 U/mg

山梨醇脫氫酶,丙酮酸激酶,活力,酶活力


25℃誘導(dǎo)條件的酶活力8.19 U/mg,8.99 U/mg,,表現(xiàn)為差異顯著(P<0.05)。結(jié)導(dǎo)溫度下各代謝酶活力變化明顯不同于對照酶活力,低溫誘導(dǎo)下海藻糖酶活力顯化物酶活力顯著升高。圖 3-2 過氧化物酶、海藻糖酶活力Fig. 3-2 The enzyme activity of POD and THL 山梨醇脫氫酶和丙酮酸激酶活力
【學(xué)位授予單位】:東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號】:S435.651

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本文編號:2707529

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