【摘要】：第一章Parkin基因在原發(fā)性肝細胞癌中的表達及臨床意義目的:檢測parkin蛋白在原發(fā)性肝細胞癌組織中的表達,并分析其意義。方法:收集永州市中心醫(yī)院南北院2013年1月至2017年12月經(jīng)病理組織學檢查確診為原發(fā)性肝細胞癌患者的手術(shù)標本60例,采用免疫組織化學方法檢測60例原發(fā)性肝細胞癌患者的癌組織及其癌旁正常肝組織中parkin蛋白的表達情況。結(jié)果:1、癌旁正常肝組織中parkin蛋白的陽性表達率明顯高于肝癌組織,其差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。2、60例肝癌組織中parkin蛋白表達水平與性別、年齡、腫瘤的大小之間差異無明顯統(tǒng)計學意義(P均0.05),與肝癌細胞的分化程度、有無包膜以及有無門靜脈癌栓之間的差異均具有統(tǒng)計學意義(P均0.05)。結(jié)論:Parkin蛋白在原發(fā)性肝細胞癌的癌旁正常肝組織中呈高表達,在肝癌組織中低表達或缺失,表明parkin基因?qū)υl(fā)性肝癌的發(fā)生發(fā)展可能有一定抑制作用。第二章Parkin基因?qū)Ω伟〩epG2細胞生長增殖的影響目的:1.以質(zhì)粒為載體將parkin基因(Park2)轉(zhuǎn)染至肝癌HepG2細胞中,探討parkin基因?qū)Ω伟┘毎L增殖、遷移能力及凋亡的影響;2.探討parkin基因影響肝癌HepG2細胞生長增殖的初步機制,為肝癌的早期診治及預(yù)后評估提供幫助。方法:實驗分為3組:1)空白細胞組(Control組:未轉(zhuǎn)染質(zhì)粒的HepG2細胞組;2)pcDNA3.1-3x Flag組(NC組:轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒的HepG2細胞組);3)Park2 pcDNA3.1-3x Flag組(Park2組:轉(zhuǎn)染parkin基因的HepG2細胞組)。1)以質(zhì)粒為載體將parkin基因轉(zhuǎn)染至HepG2細胞,采用qRT-PCR方法鑒定HepG2細胞的parkin基因是否轉(zhuǎn)染成功。2)流式細胞術(shù)檢測三組細胞的凋亡情況。3)MTT實驗檢測三組細胞的生長、增殖。4)細胞劃痕實驗檢測三組細胞的遷移、侵襲能力。5)Western Blot法檢測三組細胞中caspase-8蛋白的表達水平。結(jié)果:1、qRT-PCR示Park2組HepG2細胞中parkin mRNA表達量較control組、NC組明顯增高,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。2、MTT實驗示Park2組細胞的增殖能力低于control組、NC組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。3、流式細胞術(shù)示Park2組HepG2細胞凋亡率高于control組、NC組,具有明顯差異(P0.05)。4、細胞劃痕實驗結(jié)果顯示:Park2組細胞的劃痕修復(fù)率較control組及NC組低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。5.Western Blot實驗示:Park2組中caspase-8蛋白表達量明顯高于control組、NC組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論Parkin基因可以抑制HepG2細胞的生長增殖、遷移及侵襲,并誘導(dǎo)HepG2細胞凋亡,其抑制HepG2細胞生長增殖的機制可能與上調(diào)caspase-8的表達有關(guān)。
【圖文】：

Parkin蛋白在肝癌組織陽性表達（SP法×200）

Parkin蛋白在癌旁正常肝組織陽性表達（SP法×200）
【學位授予單位】：南華大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R735.7

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