【摘要】：試驗(yàn)以小麥溫敏細(xì)胞質(zhì)雄性不育系KTP116A,其同型保持系TP116B,及其恢復(fù)系LK783為材料,采用SSR分子標(biāo)記、BSR-Seq分析、KASP標(biāo)記等方法對(duì)細(xì)胞質(zhì)雄性不育的育性恢復(fù)基因Rfk1進(jìn)行定位,利用比較基因組學(xué)和測(cè)序手段,尋找和開(kāi)發(fā)與恢復(fù)基因緊密連鎖的分子標(biāo)記,并根據(jù)基因注釋預(yù)測(cè)候選基因功能。為小麥K型雄性不育育性恢復(fù)的遺傳機(jī)理的探索提供理論基礎(chǔ)。研究結(jié)果如下:1.對(duì)兩種供試材料KTP116A、LK783,進(jìn)行花粉粒制片觀察(K-I_2染色和醋酸洋紅染色),并對(duì)供試材料的三核期的花藥形態(tài)、內(nèi)壁、外壁以及小孢子做掃描電鏡觀察。結(jié)果表明:KTP116A的敗育類(lèi)型為染敗,其花藥末端不開(kāi)裂;外壁排列紊亂;二核期小孢子萎縮和畸形。對(duì)回交后代作圖群體進(jìn)行小孢子育性鑒定發(fā)現(xiàn):回交分離群體不育株與可育株接近1:3的分離比例,由此推測(cè)LK783上能夠恢復(fù)其小孢子育性的基因?yàn)閮蓚�(gè)。2.恢復(fù)系LK783與保持系TP116B雜交再與不育系KTP116A回交得到的BC_1F_1群體,測(cè)回交群體單株結(jié)實(shí)率并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果表明:不育系TP116A為配子體不育;不育系KTP116A的育性恢復(fù)受LK783上的兩對(duì)主效恢復(fù)基因控制。并通過(guò)對(duì)群體的SSR標(biāo)記分析找出了兩對(duì)可靠的分子標(biāo)記Xgwm413和Xbarc137,遺傳距離分別為1.5cM和2.1cM,又根據(jù)(劉保申等2006)的研究結(jié)果把Rfk1定位在了Xgwm413和Xgwm264之間,遺傳距離為分別為1.5cM和5.7cM的區(qū)間內(nèi)。3.通過(guò)對(duì)作圖群體的BSR-Seq分析,發(fā)掘與不育相關(guān)的SNP位點(diǎn);同時(shí)在親本和作圖群體上對(duì)相關(guān)SNP進(jìn)行KASP分型檢測(cè),找出在親本之間存在多態(tài)性的標(biāo)記并利用這些標(biāo)記在分離群體上對(duì)Rfk1精細(xì)定位。試驗(yàn)通過(guò)親本篩選,共篩選出31對(duì)具有多態(tài)性的KASP標(biāo)記,再通過(guò)分離群體篩選總共獲得了八對(duì)相關(guān)的KASP標(biāo)記,其中有兩個(gè)標(biāo)記與Rfk1疑似共分離,分別命名為G29121341A和A40269228G。然后把這些標(biāo)記依次對(duì)應(yīng)在SNP index物理圖譜上,最終把Rfk1定位在標(biāo)記G29121341A和A40269228G之間共10MB的區(qū)間內(nèi)。4.通過(guò)篩選出的KASP標(biāo)記對(duì)118個(gè)恢復(fù)系、13個(gè)不育系、其他不育材料3個(gè)回交群體的139個(gè)單株進(jìn)行分型分析,開(kāi)發(fā)出了KASP標(biāo)記A40269228G。根據(jù)Ensembl Plants網(wǎng)站上的基因注釋信息對(duì)候選SNP所在基因進(jìn)行功能預(yù)測(cè),找到了兩個(gè)候選基因及其注釋,其基因ID為T(mén)raes_1BS_D837C1ADC與Traes_1BS_51DD23078。
【圖文】：

且端部存在開(kāi)裂現(xiàn)象(圖 2-3 e)，其花藥的末端出現(xiàn)了不同程度的分叉(圖 2-3 e)花外壁排列十分整齊(圖 2-3 i)；小孢子圓潤(rùn)飽滿(圖 2-3 b c)。圖 2-2 群體 KTP116A//LK783/TP116B 的各級(jí)可育小孢百分比單株統(tǒng)計(jì)igure 3 - 2 percentage of viable microspores at each stage of KTP 116A/ / LK 783 / TP 116B populati8910392412627514336100542040204060801001201級(jí) 2級(jí) 3級(jí) 4級(jí) 5級(jí) 6級(jí) 7級(jí) 8級(jí) 9級(jí) 10級(jí) 11級(jí) 12級(jí) 13級(jí)

．四種K型CMS的BC1F1群體育性統(tǒng)計(jì)
【學(xué)位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：S512.1

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2670293