【摘要】：目的:研究ATP6AP2基因分型、等位基因頻率、單倍體型與糖尿病腎病的相關(guān)性,闡述遺傳性易感位點在糖尿病腎病發(fā)生發(fā)展中的作用,為糖尿病腎病防治提供一定的幫助。方法:收集2015年12月至2016年12月期間吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院體檢中心體檢的患者46例,為正常對照組(Control group);內(nèi)分泌科及腎內(nèi)科住院的2型糖尿病患者100例,均符合1999年WHO糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn),分為2型糖尿病組(Type 2 diabetes,T2DM)和糖尿病腎病組(Diabetic nephropathy,DN)。SNP位點等位基因的識別采用連接酶連接反應(yīng)的高特異性實現(xiàn),然后通過引入不同長度的非特異序列在連接探針末段,并通過連接酶加接反應(yīng)獲得位點對應(yīng)的不同長度連接產(chǎn)物,利用標(biāo)記熒光的通用引物對連接產(chǎn)物進行PCR擴增,通過熒光毛細(xì)管電泳對擴增產(chǎn)物進行電泳分離,最后通過對電泳圖譜的分析獲取各個SNP位點的基因型。研究ATP6AP2基因多態(tài)性與2型糖尿病腎病發(fā)病及臨床表型的相關(guān)性。結(jié)果:1.糖尿病腎病組空腹血糖、膽固醇、肌酐、胱抑素C、體重指數(shù)、收縮壓、舒張壓均明顯高于正常對照組和糖尿病組,具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),糖尿病組與糖尿病腎病組甘油三酯明顯高于正常對照組,具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.002)。2.糖尿病腎病的相關(guān)危險因素進行Logistic回歸分析,結(jié)果表明空腹血糖、胱抑素C、收縮壓是糖尿病腎病的危險因素(P0.05)。3.ATP6AP2基因的rs1060063(C/T)CC基因分型、等位基因C頻率2型糖尿病組分布頻率高于正常對照組(P0.05);ATP6AP2基因的rs2971599(A/C)基因分型與等位基因分布頻率2型糖尿病組與正常對照組無統(tǒng)計學(xué)差異。4.ATP6AP2基因的rs1060063與rs2971599單體型分析顯示C-C單倍體型2型糖尿病組的分布頻率高于正常對照組(P=0.013),其糖尿病發(fā)病風(fēng)險系數(shù)為2.136。5.ATP6AP2基因的rs1060063(C/T)等位基因C頻率糖尿病腎病組高于正常對照組(P=0.028);ATP6AP2基因的rs1060063與rs2971599單體型分析顯示C-C單倍體型糖尿病腎病組的分布頻率高于正常對照組(P=0.013),其糖尿病腎病發(fā)病風(fēng)險系數(shù)為2.248;T-C單倍體型糖尿病腎病組的分布頻率低于正常對照組(P=0.010),其糖尿病腎病發(fā)病風(fēng)險系數(shù)為0.456。6.ATP6AP2基因的rs1060063與rs2971599基因分型、等位基因頻率、單倍體型2型糖尿病組與糖尿病腎病組無統(tǒng)計學(xué)差異。7.rs1060063位點各基因分型糖尿病腎病相關(guān)生化指標(biāo)差異分析,TC型患者高密度脂蛋白低于CC、TT型,具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。8.rs2971599位點各基因分型糖尿病腎病相關(guān)生化指標(biāo)差異分析,AA型患者甘油三酯明顯高于CA、CC型,具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);AA型患者舒張壓明顯高于CA、CC型,具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);CA型患者肌酐水平明顯高于AA、CC型,具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1.ATP6AP2 rs1060063基因位點與中國東北漢族人群糖尿病的發(fā)病風(fēng)險具有相關(guān)性,其基因型CC、基因C頻率為發(fā)病風(fēng)險基因位點。2.ATP6AP2基因的rs1060063和rs2971599單體型C-C是中國東北漢族人群糖尿病的易感因素,攜帶此單體型個體糖尿病的發(fā)病風(fēng)險是正常人2倍。3.ATP6AP2基因的rs1060063和rs2971599與中國東北漢族人群糖尿病腎病的發(fā)病風(fēng)險無相關(guān)性;但與糖尿病腎病患者的舒張壓升高及甘油三酯、血肌酐水平增高具有相關(guān)性。
【圖文】：

S138/）進行 ATP6AP2 基因標(biāo)簽 SNP 篩查。篩查基因名稱：ATP6AP2，篩查基因范圍包括上游 2000bp 的基因全長 SNP 的標(biāo)準(zhǔn)為：（1）人群為中國漢族人；（2）MAF 值≥5%；（3）S置為上游啟動子區(qū)、編碼區(qū)、UTR 區(qū)；（4）標(biāo)簽 SNP。2.4 ATP6AP2 基因 SNP 分型基因分型方法為 SNPscanTM 多重 SNP 分型，該技術(shù)的基本原理是采用酶連接反應(yīng)的高特異性實現(xiàn)對 SNP 位點等位基因的識別，然后通過在連接末段引入不同長度的非特異序列以及通過連接酶加接反應(yīng)獲得位點對應(yīng)的長度連接產(chǎn)物，利用標(biāo)記熒光的通用引物對連接產(chǎn)物進行PCR擴增，，通過熒光管電泳對擴增產(chǎn)物進行電泳分離，最后通過對電泳圖譜的分析獲取各個SNP 位基因型，具體檢測由上海天昊生物科技有限公司完成。具體原理見圖3-1。
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R587.2;R692.9

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 Jean Jacques N Noubiap;Jashira Naidoo;Andre P Kengne;;Diabetic nephropathy in Africa:A systematic review[J];World Journal of Diabetes;2015年05期

2 張光民;;辛伐他汀聯(lián)合非諾貝特對糖尿病高脂血癥患者的降脂療效[J];中國醫(yī)藥導(dǎo)刊;2014年03期

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1 吳英;高糖培養(yǎng)系膜細(xì)胞JAK_2/STAT_3信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路活性的變化及對活性氧簇產(chǎn)生的影響[D];中國醫(yī)科大學(xué);2007年

本文編號：2652697