【摘要】：類受體激酶是植物體內(nèi)信號分子的重要受體,幾乎參與了所有的細胞代謝過程,包括生長發(fā)育、表達調(diào)控和逆境反應等。ERECTA是從擬南芥中分離得到的一種類受體激酶基因,該基因在調(diào)控花和葉等地上器官的生長發(fā)育、權衡擬南芥光合作用和蒸騰作用、參與激素調(diào)節(jié)、識別與轉(zhuǎn)導光信號以及抗病抗逆信號等生理生化過程中扮演重要角色。本研究以從高粱中分離克隆的一種ERECTA基因(SbER2)為研究對象,通過轉(zhuǎn)入擬南芥原生質(zhì)體進行亞細胞定位,構建VE2表達載體并進行玉米遺傳轉(zhuǎn)化,對獲得的過表達SbER2轉(zhuǎn)基因植株與對照非轉(zhuǎn)基因植株進行不同程度干旱脅迫處理,分析各項抗旱性指標在不同處理之間的差異,解析SbER2基因在抗旱中的生物學功能。主要研究結果如下:(1)運用生物信息學方法對SbER2基因進行亞細胞定位預測分析,并成功構建了pE3449-SbER2載體,轉(zhuǎn)導擬南芥原生質(zhì)體,通過共聚焦顯微鏡觀察GFP位置,初步確定SbER2基因蛋白在細胞膜、葉綠體、線粒體和細胞質(zhì)基質(zhì)中表達。(2)構建VE2表達載體,通過農(nóng)桿菌介導轉(zhuǎn)化法將目的基因SbER2轉(zhuǎn)入玉米材料ZPM9,并進行分子檢測,成功獲得SbER2轉(zhuǎn)基因植株;(3)將SbER2轉(zhuǎn)化T2代植株SbER2-1、SbER2-2和非轉(zhuǎn)基因?qū)φ罩仓闦PM9進行不同程度的干旱脅迫,發(fā)現(xiàn)過表達SbER2基因提高了植株的凈光合速率和水分利用效率,降低了植株體內(nèi)丙二醛的積累,增強了玉米受體材料對干旱脅迫的耐受程度。
【圖文】：

25圖 3.2 pE3449 載體的雙酶切驗證2 Verification of pE3449 carrier by double enzyMarker 1Kb 由上至下依次為（Kb）：10、8、6、5、4、ker 15Kb 由上至下依次為（Kb）：15、10、7.5、5、3、切產(chǎn)物的電泳條帶約為4Kb，和pE3449載可以確定 6 條帶均為陽性條帶，將凝膠條帶

圖 3.1 pE3449-SbER2 表達載體的的構建流程Figure 3.1 The construction process of pE3449-SbER2 expression vectorpE3449 載體的構建E3449 載體經(jīng)過轉(zhuǎn)化、搖菌和提取質(zhì)粒后，測得質(zhì)粒濃度大部00ng/ul，滿足實驗要求，可以進行后續(xù)的實驗操作。通過 KpnI/Xm9 載體，進行電泳、凝膠成像儀（Tanon 1600）成像分析（圖 3.2）。圖 3.2 pE3449 載體的雙酶切驗證
【學位授予單位】：山西大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：S514

【參考文獻】

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本文編號：2632205