【摘要】：谷子,其耐旱、抗逆性強(qiáng)、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高的特性使其成為我國(guó)北方重要的糧食作物之一。隨著世界人口的增加,對(duì)糧食的需求量也在快速增加;另一方面,谷子全基因組測(cè)序的完成,對(duì)谷子基因工程育種有了重要意義。而建立一套穩(wěn)定、高效的谷子再生和轉(zhuǎn)化體系是轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育谷子新品種,增加谷子產(chǎn)量的基礎(chǔ)。本研究以晉谷21、晉谷40、晉谷45、晉谷57的成熟胚及莖尖為外植體,研究愈傷組織誘導(dǎo)、不定芽分化、成熟胚莖尖叢生芽誘導(dǎo)、生根培養(yǎng),篩選再生能力強(qiáng)的谷子品種和培養(yǎng)基激素配比,建立成熟胚和莖尖高效離體再生系統(tǒng);并對(duì)農(nóng)桿菌介導(dǎo)EPSPS基因轉(zhuǎn)化萌發(fā)的谷子莖尖進(jìn)行了初步研究。結(jié)果表明:1.以谷子成熟胚為外植體進(jìn)行愈傷組織的誘導(dǎo)和分化的研究表明,晉谷21成熟胚愈傷組織誘導(dǎo)最佳培養(yǎng)基為MS+2.0mg/L2,4-D+0.5mg/LKT+5%蔗糖,產(chǎn)生的愈傷組織在該培養(yǎng)基上繼代一次后,愈傷變得致密,顏色淡黃,狀態(tài)更佳,有利于進(jìn)一步的分化;最佳分化培養(yǎng)基是MS+1.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+1.5%蔗糖,分化率為75.71%。蔗糖對(duì)谷子成熟胚愈傷組織的誘導(dǎo)和分化有不同的影響,較高濃度蔗糖(5%)有利于高質(zhì)量愈傷的誘導(dǎo),較低濃度蔗糖(1.5%)有利于芽的分化。谷子離體再生體系在品種間存在差異,晉谷21、晉谷40、晉谷45、晉谷57在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上均取得較好的出愈率,差異不顯著;在分化率上,品種間差異顯著,晉谷21的分化率最佳。2.以萌發(fā)的谷子莖尖為外植體進(jìn)行叢生芽的誘導(dǎo),結(jié)果表明,晉谷21的最佳萌發(fā)培養(yǎng)基為MS+3mg/LTDZ;最佳叢生芽增殖培養(yǎng)基為MS+3mg/LTDZ+0.5mg/LIBA;最佳生根培養(yǎng)基是1/2MS+1.0mg/LNAA。晉谷21、晉谷40、晉谷45、晉谷57四個(gè)谷子品種的叢生芽誘導(dǎo)存在顯著差異,晉谷21叢生芽誘導(dǎo)率最高(79.17%)、每叢芽數(shù)達(dá)4.77個(gè)。3.農(nóng)桿菌介導(dǎo)EPSPS基因轉(zhuǎn)化谷子莖尖的研究表明,農(nóng)桿菌菌液OD600值0.7,真空滲透時(shí)間10min為最佳農(nóng)桿菌侵染條件;通過(guò)草甘膦篩選,獲得了 6株存活植株,存活率為3.33%。在四葉期用涂抹法對(duì)存活植株進(jìn)行草甘膦抗性鑒定,轉(zhuǎn)化植株離體葉片對(duì)草甘膦的抗性高于未處理谷子葉片。
【圖文】：

邐錒齲矗靛戊喙齲擔(dān)峰義賢跡常彼鬧只蛐凸茸映墑炫呔ゼ獯隕康撓盞悸叔義希疲椋玨澹常卞澹桑睿洌酰悖簦椋錚鑠澹潁幔簦邋澹錚駑澹悖歟酰螅簦澹潁澹溴澹猓酰洌簀澹錚駑澹恚幔簦酰潁邋澹澹恚猓潁錚睿椋沐澹螅簦澹礤澹簦椋皰澹椋鑠澹媯錚酰蟈澹紓澹睿錚簦穡邋澹恚椋歟歟澹簦簀義希咤澹鈴澹煎澹常砑玻歟裕模冢蓿埃擔(dān)恚紓希剩攏痢靛義希靛澹埃啊浮蹂澹洛澹煎澹卞澹埃睿蓿蹋叮攏粒蓿板澹靛澹睿蓿蹋危粒粒╁義希村澹常板澹у危模緬澹ǎ玻埃睿蓿蹋叮攏粒�？－１．０？？／Ｌ２，４－Ｄ）辶x�？逦４．００邋－逦ｂ辶x希叔澹常擔(dān)板澹，

本文編號(hào)：2630629