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牙鲆抗淋巴囊腫病轉(zhuǎn)錄組重測(cè)序及3個(gè)抗病基因的克隆與表達(dá)

發(fā)布時(shí)間:2020-04-06 15:14
【摘要】:牙鲆是一種具有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的海洋魚(yú)類(lèi),在亞洲許多國(guó)家的水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中都具有重要的地位。然而,日益增加的工業(yè)化養(yǎng)殖使牙鲆對(duì)多種病原菌(細(xì)菌、病毒和寄生蟲(chóng))敏感,各種傳染病的頻發(fā)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。這其中淋巴囊腫病的暴發(fā),已成為限制牙鲆養(yǎng)殖發(fā)展的瓶頸。為了減少淋巴囊腫病的影響,通過(guò)研究相關(guān)的免疫系統(tǒng)來(lái)探索淋巴囊腫病毒的防御機(jī)制,對(duì)建立抗病品種或開(kāi)發(fā)有效的疫苗和抗微生物藥物都具有重要的意義。本文主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:(1)對(duì)患淋巴囊腫病(S)和抗淋巴囊腫病(R)的牙鲆頭腎進(jìn)行了轉(zhuǎn)錄組重測(cè)序,所得到的原始數(shù)據(jù)經(jīng)過(guò)質(zhì)控后,我們?cè)诳共〗M獲得了平均序列條數(shù)為50712071條,包含5056521585 bp的clean data;患病組獲得了平均序列條數(shù)為53221069條,包含5307450541 bp的clean data,堿基質(zhì)量值超過(guò)20的在96.91%以上。并且所得到的clean data與牙鲆參考轉(zhuǎn)錄組mapping比率超過(guò)了82.73%。(2)以p
【圖文】:

牙鲆,淋巴囊腫


在日本和韓國(guó)先后發(fā)現(xiàn)了患淋巴囊腫病的牙鲆和石斑魚(yú)[6]。我國(guó)于 1992 年首次發(fā)現(xiàn)了此病[7],并于 1997 年在威海地區(qū)的牙鲆養(yǎng)殖場(chǎng)大規(guī)模暴發(fā),,涉病魚(yú)報(bào)道,淋巴囊腫病毒能引起 9 目、42 科,140 種以上海水魚(yú)、淡水魚(yú)感染此病0 科,呈世界性分布[9, 10]。病魚(yú)最主要的特征是口唇部、鰭條和體表等處形成單頭瘤狀贅生物(圖 1-1)。病魚(yú)因攝食困難或呼吸受阻及體內(nèi)組織的病變而影間接的死亡,其死亡率約為 30%。雖然該病死亡率不高,但因其能通過(guò)多種渠患病率可達(dá) 80%以上,并且病魚(yú)因外形異樣而失去商業(yè)價(jià)值,成為養(yǎng)殖中對(duì)魚(yú)性疾病之一[11]。目前我國(guó)養(yǎng)殖的牙鲆、大菱鲆、真鯛、鱸魚(yú)、紫紅笛鯛和軍曹此病[7, 12-14]。并且,淋巴囊腫病的暴發(fā)與溫度有關(guān),當(dāng)水溫處于 10~20℃時(shí),期。并且隨著水溫的升高出現(xiàn)自愈現(xiàn)象,當(dāng)水溫超過(guò) 24℃,囊腫物脫落,病毒此外,該病的發(fā)病率還與鹽度、養(yǎng)殖密度、水質(zhì)及魚(yú)體自身免疫等相關(guān)[17-19]

示意圖,測(cè)序,示意圖,生物芯片技術(shù)


圖 1-2 雙脫氧鏈終至法(sanger 法)測(cè)序示意圖Figure 1-2 Sequencing of the dideoxy chain-finger method (sanger method) 90 年代,生物芯片技術(shù)成為了生物信息學(xué)研究的主流技術(shù)。生物品中所包含的各種生物信息解剖。基因芯片(Microarray)又稱(chēng) DN聚核苷酸芯片和 cDNA 芯片。該技術(shù)基于核酸分子原位雜交原理RNA 反轉(zhuǎn)錄得到 cDNA 進(jìn)行雜交進(jìn)而測(cè)定基因表達(dá)量[46, 47]。雖序技術(shù)相比,提高了測(cè)序通量,降低了測(cè)序成本,但是仍然存在著
【學(xué)位授予單位】:河北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類(lèi)號(hào)】:S943

【參考文獻(xiàn)】

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2 劉曉君;東亞飛蝗免疫與繁殖相關(guān)基因表達(dá)分析[D];杭州師范大學(xué);2015年

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5 宋曉青;注射和浸泡免疫疫苗后牙鲆免疫相關(guān)基因表達(dá)的變化研究[D];中國(guó)海洋大學(xué);2014年

6 高任;斜帶石斑魚(yú)(Epinephelus coioides)NF-κB信號(hào)通路相關(guān)基因的分子克隆及其功能初步研究[D];海南大學(xué);2014年

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8 馬亞青;腫瘤壞死因子受體及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白TRAF2在甲狀腺癌中的表達(dá)及意義[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2005年



本文編號(hào):2616679

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