【摘要】：目的:蛋白去乙酰化酶9基因(Histone deacetylases 9 Gene,HDAC9)為全基因組關(guān)聯(lián)分析(Genome-wide association study,GWAS)在歐洲人群體(3548名IS患者及5972名對照)中篩選出的與缺血性卒中的易感性具有相關(guān)性的基因。國內(nèi)有針對北方人群的研究提示其多態(tài)性與缺血性卒中的發(fā)作有顯著的相關(guān)性,但是沒有以南方人群為研究人群的相關(guān)研究,也沒有關(guān)于該基因多態(tài)性與中醫(yī)證候易感性的相關(guān)性研究,所以本研究通過研究HDAC9基因的2個位點rs2240419及rs2389995的多態(tài)性在廣東漢族人群中與缺血性卒中及其中醫(yī)證候易感性的相關(guān)性,從而探討廣東漢族人群HDAC9基因單核苷酸多態(tài)性與缺血性卒中及其中醫(yī)證候的易感性的關(guān)系,并希望能為進一步研究遺傳機制對缺血性卒中的影響提供一定的思路及基礎(chǔ),為中風(fēng)病中醫(yī)證候的辨別提供一定的遺傳學(xué)方面的科學(xué)解釋。方法:本研究采用前瞻性研究的方法,選擇HDAC9基因位點rs2240419及rs2389995作為研究位點,并依據(jù)納入排除標(biāo)準(zhǔn)納入IS組184例(缺血性卒中組,病例組)及對照組116例。對所有研究對象進行血樣采集,然后基于Sanger基因分型技術(shù)的運用對該血樣提取DNA后對所進行基因分型。與此同時,請經(jīng)過培訓(xùn)的調(diào)查者及醫(yī)務(wù)工作者對所有研究對象進行資料采集,主要包括一般資料、既往史、過敏史、個人史、家族史、神經(jīng)功能缺損相關(guān)評分、中醫(yī)證候(僅IS組進行中醫(yī)證候分型)及實驗室數(shù)據(jù)結(jié)果,并通過自行設(shè)計的研究對象觀察表(CRF表)進行記錄。最后,將基因分型的結(jié)果和CRF表的信息錄入Excel軟件中建立數(shù)據(jù)庫,并導(dǎo)入SPSS 17.0軟件中進行統(tǒng)計分析。結(jié)果:1.本研究共納入IS組184例,其中男性112名,女性72名;對照組116例,其中男性55名,女性61名。2.中醫(yī)證候方面,對IS組研究對象進行辨別證候得到風(fēng)證141例,火證13例,痰證121例,血瘀證149例,氣虛證82例。3.所有研究對象中,rs2240419位點(n=300)共檢測出CC、CT、TT 3種基因型,rs2389995位點(n=291)共檢測出AA、AG、GG 3種基因型,由前往后三種基因型分別代表為野生純合子、雜合子、突變純合子。4.對所有研究對象進行哈溫平衡(Hardy-Weinberg Equilibrium,HWE)檢驗,最終結(jié)果提示IS組與對照組HDAC9基因SNP位點rs2240419及rs2389995的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P0.05)。提示本研究所使用的對照組的對象為隨機人群分布,為同一孟德爾群體人群,具有該基因位點群體代表性。5.IS組和對照組基本特征組間比較結(jié)果:(1)性別構(gòu)成比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.02);年齡、年齡分段與BMI構(gòu)成比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(2)既往史及個人史分組比較中,可見既往腦卒中、既往高血壓病、既往糖尿病、既往冠心病、既往高HCY(同型半胱氨酸)、飲酒史和吸煙史這7個項目的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),且均與缺血性卒中出現(xiàn)成正相關(guān);既往TIA(短暫性腦缺血發(fā)作)和既往血脂異常、過敏史這3個項目的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(3)實驗室檢驗結(jié)果分組比較中,可見SBP(收縮壓)、DBP(舒張壓)、HB(血紅蛋白)、TG(甘油三酯)、HDL(高密度脂蛋白)、HCY這6個項目的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);其余項目的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(4)多因素分析結(jié)果提示年齡、HDL及SBP這3項組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),年齡和HDL與腦卒中發(fā)病呈負(fù)相關(guān),SBP與腦卒中發(fā)病呈正相關(guān)關(guān)系,但年齡及SBP這2項可信區(qū)間范圍均較小,相關(guān)程度可能不大。6.IS組和對照組基因多態(tài)性組間差異比較結(jié)果:(1)單因素及多因素分析結(jié)果均提示各基因型的組間差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)(2)通過構(gòu)建5個遺傳模型對缺血性卒中患者(IS組)及對照組進行Logistic回歸分析,結(jié)果顯示位點rs2240419及rs2389995位點的多態(tài)性與缺血性卒中的關(guān)聯(lián)性差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。7.非風(fēng)證組(n=43)和風(fēng)證組(n=141)基本特征組間比較結(jié)果:(1)性別、年齡、年齡分段、BMI、既往史、個人史及實驗室檢驗結(jié)果比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(2)多因素分析方面,所構(gòu)建模型無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。8.非痰證組(n=63)和痰證組(n=121)基本特征組間比較結(jié)果:(1)性別、年齡、年齡分段及BMI、既往史及個人史組間比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(2)實驗室檢驗分組比較中,可見HB、TG、TC這3個項目的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);其余9個項目的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(3)多因素分析結(jié)果提示TG、過敏史這2項的組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),其中TG與出現(xiàn)痰證呈正相關(guān),且具有一定的具有一定相關(guān)程度,而過敏史與出現(xiàn)痰證呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。9.非血瘀證組(n=35)和血瘀證組(n=149)基本特征組間比較結(jié)果:(1)性別、年齡和年齡分段、既往史、個人史和實驗室檢驗結(jié)果組間差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);BMI組成比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(2)多因素分析結(jié)果提示BMI的組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義且呈正相關(guān)關(guān)系,但可信區(qū)間范圍均較小,相關(guān)程度可能不大。10.各證候分組之間基因多態(tài)性組間差異比較結(jié)果:(1)單因素及多因素分析結(jié)果均提示各證候分組(非風(fēng)證組與風(fēng)證組、非痰證組與痰證組、非血瘀證組與血瘀證組)基因型的組間差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)(2)通過構(gòu)建5個遺傳模型對中風(fēng)病各證候分組(非風(fēng)證與風(fēng)證、非痰證與痰證、非血瘀證與血瘀證)的研究對象進行Logistic回歸分析結(jié)果顯示HDAC9基因的位點rs2240419及rs2389995的多態(tài)性在各證候分組(非風(fēng)證組與風(fēng)證組、非痰證組與痰證組、非血瘀證組與血瘀證組)的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:對于廣東漢族人群來說:1.性別為男性、既往腦卒中、高血壓病、糖尿病、冠心病、高HCY、飲酒史、吸煙史均可能為缺血性腦卒中發(fā)作危險因素。2.實驗室檢驗結(jié)果方面,SBP、DBP、HB、TG、HDL、HCY指標(biāo)均可能是缺血性腦卒中的影響因素。其中HDL可能為缺血性卒中發(fā)作的保護因素。3.缺血性卒中患者的中醫(yī)證候是否為痰證可能與HB、TG和TC指標(biāo)存在關(guān)聯(lián)。其中TG升高可能增加痰證出現(xiàn)的可能性。4.缺血性卒中患者的中醫(yī)證候是否為血瘀證與可能BMI指標(biāo)存在關(guān)聯(lián),越肥胖的人可能越易出現(xiàn)血瘀證。5.HDAC9基因的rs2240419位點及rs2389995位點的多態(tài)性與缺血性卒中發(fā)病易感性可能無關(guān)。6.HDAC9基因SNP位點rs2240419及rs2389995的多態(tài)性與中風(fēng)病中醫(yī)證候(風(fēng)證、痰證、血瘀證)的易感性可能無關(guān)。7.本研究的研究結(jié)果與歐洲地區(qū)及我國北方區(qū)域同類基因位點的研究所報道的結(jié)果不同,未見其陽性發(fā)現(xiàn),但是并不能據(jù)此就明確否認(rèn)該基因位點的多態(tài)性與缺血性卒中及其中醫(yī)證候的易感性不存在關(guān)聯(lián)性。不排除是本研究與所參考的研究在研究對象、干擾因素控制等方面的研究方案不同,或者本研究本身存在的一定的局限與不足導(dǎo)致陰性結(jié)果的產(chǎn)生。8.目前從基因?qū)用鎸τ谧C候的研究仍處于初始發(fā)展階段,下一步有必要針對這些局限與不足完善方案,為將來進一步研究基因多態(tài)性與缺血性卒中及其中醫(yī)證候的易感性的相關(guān)性提供更優(yōu)質(zhì)有效的研究方案。
【學(xué)位授予單位】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R277.7

【參考文獻】

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本文編號：2609194