【摘要】：目的應用β-1,3-半乳糖基轉移酶2(B3galt2)基因敲除小鼠研究該基因對學習記憶及海馬內神經元、突觸可塑性的影響,從而進一步闡明B3galt2在學習記憶和海馬內神經元及突觸可塑性調控中的重要作用,為進一步研究B3galt2及其它糖基轉移酶在中樞神經系統中作用提供理論依據。方法應用β-1,3-半乳糖基轉移酶2基因敲除小鼠繁育及基因型鑒定的方法,獲得來自同一窩、相同性別的6個月野生型、雜合子和純合子小鼠,采用水迷宮方法檢測動物學習記憶功能,應用β-半乳糖苷酶染色方法驗證B3galt2基因在海馬內的表達方式,應用免疫組織化學染色法觀察海馬內神經元及突觸的變化。結果1、通過繁育β-1,3-半乳糖基轉移酶2基因敲除小鼠,成功獲得來自同一窩及相同性別的6個月野生型、雜合子和純合子小鼠。2、β-1,3-半乳糖基轉移酶2基因敲除影響小鼠的學習和記憶功能。3、β-1,3-半乳糖基轉移酶2在小鼠海馬內表達。4、β-1,3-半乳糖基轉移酶2基因敲除降低海馬內神經元的數目及突觸相關性蛋白SNAP25和樹突標記性蛋白MAP2的表達水平。結論1、β-1,3-半乳糖基轉移酶2基因在6個月小鼠海馬中明顯表達。2、β-1,3-半乳糖基轉移酶2參與小鼠學習記憶功能及海馬內神經元和突觸的調控。
【圖文】：

實驗結果一、基因型鑒定結果采用PCR方法、應用小鼠鼠尾組織中基因組DNA對小鼠的基因型進行鑒定，圖 1 為 PCR 結果舉例。該實驗選用來自同一窩、相同性別的 6 個月的野生型、雜合子和純合子小鼠完成除了β-半乳糖苷酶染色以外的實驗，選用來自同一窩、相同性別的 6 個月的野生型和雜合子完成β-半乳糖苷酶染色實驗。

14圖2 小鼠Morris水迷宮實驗結果A:各小鼠連續(xù)5天測試訓練期間游泳距離；B:各小鼠連續(xù)5天測試訓練期間平均游泳速度；C: 各小鼠連續(xù)5天測試訓練期間通過各個象限的次數；D:撤掉平臺的探索訓練中野生型、雜合子、純合子小鼠游泳軌跡圖。三、β-半乳糖苷酶染色結果為了驗證B3galt2基因在6個月小鼠腦內的表達，，我們用6個月的B3galt2雜合子小鼠腦組織做了x-gal染色。同時，用6個月的野生型小鼠做相同顏色，作為陰性對照。實驗結果表明，B3galt2雜合子小鼠腦中海馬及皮層β-半乳糖苷酶染色陽性，在海馬內DG、CA1區(qū)域中β-半乳糖苷酶表達明顯（見圖3）。該實驗結果提示6個月小鼠海馬內的DG、CA1區(qū)域表達B3galt2。
【學位授予單位】：錦州醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：Q42

【參考文獻】

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1 Hui Wang;Rui-Yun Peng;;Basic roles of key molecules connected with NMDAR signaling pathway on regulating learning and memory and synaptic plasticity[J];Military Medical Research;2016年04期

本文編號：2604724