【摘要】：目的:探討ACE2基因多態(tài)性與新疆維吾爾族成人CKD的關(guān)系。方法:在2013年03月~2014年04月新疆墨玉縣農(nóng)村維吾爾族成人慢性腎臟病(CKD)流行病學(xué)調(diào)查的數(shù)據(jù)庫(kù)基礎(chǔ)上,隨機(jī)抽取資料完整的CKD及健康對(duì)照樣本共254例,采用聚合酶連反應(yīng)和限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(PCR-RFLP)分型技術(shù)對(duì)ACE2 G8790A、A1075G兩位位點(diǎn)單個(gè)核酸多態(tài)性(SNPs)進(jìn)行基因分型鑒定。結(jié)果:ACE2基因G8790A位點(diǎn)基因型及等位基因頻率分布情況:在女性CKD組中AA基因型頻率高于健康對(duì)照組(P0.05)。在男性CKD組中A等位基因頻率高于健康對(duì)照組(P0.05)。ACE2基因A1075G位點(diǎn)基因型及等位基因頻率分布情況:在女性CKD并高血壓組中AA基因型頻率高于非高血壓組(P0.05)。結(jié)論:ACE2G8790A基因多態(tài)性可能與新疆維吾爾族成人CKD有關(guān)。ACE2 A1075G基因多態(tài)性可能與新疆維吾爾族女性成人CKD合并高血壓有關(guān)。
【圖文】：

GTCA，G8790AＲ:CATTCTCTTCAGCAAAATTTCCATTG，A1075GF:GAAAGGGAGAGAACTTTGGAAACCTG，A1075GＲ:TCCCAAAA-CAGTATCCTTAAGTGGTGA。3．2．2反應(yīng)體系(10μl)2×GCbuffer5μl，25mmol/LMgCl20．2μl，2．5mmol/LdNTP0．8μl，DNA1μl，引物1μl，DNA聚合酶0．1μl，ddH201．9μl。3．2．3反應(yīng)條件95℃預(yù)變性2min，94℃變性20s，退火溫度在起始的11個(gè)循環(huán)中為65℃～60℃，每個(gè)循環(huán)遞減0．5℃，反應(yīng)40s，72℃延伸30s。在以后的24個(gè)循環(huán)中，退火溫度固定在59℃，反應(yīng)30s，最后72℃延伸2min終止所有反應(yīng)。3．3酶切反應(yīng)3．3．1反應(yīng)體系(20μl)包含10×cutsmartbuffer2μl，G8790A限制性內(nèi)切酶AluI1U，A1075G限制性內(nèi)切酶MnlI1U，PCＲ產(chǎn)物10μl，ddH207μl，酶切最適溫度為37℃，并在DK－8D型電熱恒溫水槽中過(guò)夜12h。3．3．2酶切結(jié)果將酶切產(chǎn)物稀釋10倍，上3730XL毛細(xì)管電泳進(jìn)行SNP分型。ACE2G8790APCＲ產(chǎn)物片段長(zhǎng)度為431bp，用AluI酶切后，不同基因型表現(xiàn)出不同的裂解模式。其中含A等位基因的PCＲ產(chǎn)物可被切開，長(zhǎng)度為276bp，而含G等位基因的則無(wú)法切開，長(zhǎng)度為431bp，GA基因型可部分被切開，長(zhǎng)度為276bp，431bp。ACE2基因A1075GPCＲ產(chǎn)物長(zhǎng)度為131bp，，用MnlI切酶后，含G等位基因的PCＲ產(chǎn)物可被切開，長(zhǎng)度77bp，而含A等位基因的無(wú)法切開，長(zhǎng)度為131bp，AG基因型則部分被切開，長(zhǎng)度為77bp，131bp(見圖1～圖3)。4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS19．0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行?

GTCA，G8790AＲ:CATTCTCTTCAGCAAAATTTCCATTG，A1075GF:GAAAGGGAGAGAACTTTGGAAACCTG，A1075GＲ:TCCCAAAA-CAGTATCCTTAAGTGGTGA。3．2．2反應(yīng)體系(10μl)2×GCbuffer5μl，25mmol/LMgCl20．2μl，2．5mmol/LdNTP0．8μl，DNA1μl，引物1μl，DNA聚合酶0．1μl，ddH201．9μl。3．2．3反應(yīng)條件95℃預(yù)變性2min，94℃變性20s，退火溫度在起始的11個(gè)循環(huán)中為65℃～60℃，每個(gè)循環(huán)遞減0．5℃，反應(yīng)40s，72℃延伸30s。在以后的24個(gè)循環(huán)中，退火溫度固定在59℃，反應(yīng)30s，最后72℃延伸2min終止所有反應(yīng)。3．3酶切反應(yīng)3．3．1反應(yīng)體系(20μl)包含10×cutsmartbuffer2μl，G8790A限制性內(nèi)切酶AluI1U，A1075G限制性內(nèi)切酶MnlI1U，PCＲ產(chǎn)物10μl，ddH207μl，酶切最適溫度為37℃，并在DK－8D型電熱恒溫水槽中過(guò)夜12h。3．3．2酶切結(jié)果將酶切產(chǎn)物稀釋10倍，上3730XL毛細(xì)管電泳進(jìn)行SNP分型。ACE2G8790APCＲ產(chǎn)物片段長(zhǎng)度為431bp，用AluI酶切后，不同基因型表現(xiàn)出不同的裂解模式。其中含A等位基因的PCＲ產(chǎn)物可被切開，長(zhǎng)度為276bp，而含G等位基因的則無(wú)法切開，長(zhǎng)度為431bp，GA基因型可部分被切開，長(zhǎng)度為276bp，431bp。ACE2基因A1075GPCＲ產(chǎn)物長(zhǎng)度為131bp，用MnlI切酶后，含G等位基因的PCＲ產(chǎn)物可被切開，長(zhǎng)度77bp，而含A等位基因的無(wú)法切開，長(zhǎng)度為131bp，AG基因型則部分被切開，長(zhǎng)度為77bp，131bp(見圖1～圖3)。4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS19．0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行?

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