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【摘要】：[目的]利用分子生物學技術探討杜鵑紅山茶CaAPX基因的表達模式及在模式植物煙草中所起的抗寒、耐熱作用,為今后山茶花抗逆育種奠定基礎。[方法]根據(jù)山茶花同源序列設計特異性引物,利用同源克隆和3’,5’-RACE技術,從杜鵑紅山茶嫩葉組織中克隆出抗壞血酸過氧化物酶(APX),命名為CaAPX,基因全長1 097 bp,開放閱讀框753 bp,編碼250個氨基酸。實時熒光定量PCR對杜鵑紅山茶7種組織和溫度脅迫下該基因的表達模式進行分析。[結果]表明:CaAPX基因在杜鵑紅山茶7種組織中均得到表達,但表達水平不一,表達量由高到低依次為:未成熟果實嫩葉花苞葉芽種胚花瓣花芽,其中,未成熟果實中的表達量是其它組織的2.6811.44倍;溫度脅迫處理8 h后該基因呈上調表達,CaAPX基因表達量分別是0 h的3.49和2.67倍。CaAPX基因轉化煙草分析表明,過量表達CaAPX基因后,APX活性提高了2.58 4.09倍,抗壞血酸(As A)含量提高了2.673.56倍,并且轉基因煙草植株的抗寒、耐熱能力也獲得提高。[結論]通過過量表達CaAPX基因能夠提高煙草植株的抗寒、耐熱性,為山茶花抗逆育種提供了科學依據(jù)。

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