【摘要】：【目的】分離克隆蘋果MdRCD1基因,分析其蛋白結(jié)構(gòu)和逆境響應(yīng),并初步鑒定MdRCD1在蘋果愈傷中的功能�！痉椒ā客纯寺dRCD1并測(cè)序,用DNAman和MEGA5相關(guān)軟件分析MdRCD1氨基酸序列以及進(jìn)化關(guān)系,不同逆境處理‘嘎拉’蘋果組培苗,qRT-PCR分析MdRCD1在逆境條件下的表達(dá)量。農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化方法獲得過量表達(dá)MdRCD1的轉(zhuǎn)基因愈傷,不同鹽濃度處理野生型和轉(zhuǎn)基因愈傷,觀察愈傷的長勢(shì),檢測(cè)愈傷的鮮質(zhì)量、脯氨酸和丙二醛含量,鑒定MdRCD1的初步功能�！窘Y(jié)果】從‘嘎拉’蘋果中克隆了MdRCD1(MDP0000234325)基因。該基因ORF為1 803 bp。通過進(jìn)化樹和蛋白同源性分析,表明蘋果MdRCD1和中國白梨PbRCD1進(jìn)化親緣關(guān)系最近。在MdRCD1的N端有1個(gè)保守的WWE結(jié)構(gòu)域,1個(gè)PARP催化中心,在C端有1個(gè)RST結(jié)構(gòu)域。qRT-PCR實(shí)驗(yàn)表明MdRCD1在蘋果各個(gè)組織器官中都有表達(dá),在莖中的表達(dá)量高于其他組織;同時(shí)MdRCD1的表達(dá)受Na Cl、ABA、滲透脅迫等逆境脅迫的誘導(dǎo)。通過農(nóng)桿菌侵染獲得過量表達(dá)MdRCD1轉(zhuǎn)基因蘋果愈傷。鹽脅迫處理?xiàng)l件下,過量表達(dá)MdRCD1的抗性明顯提高�！窘Y(jié)論】MdRCD1在進(jìn)化過程中比較保守,蘋果不同組織中都有表達(dá),過量表達(dá)MdRCD1蘋果愈傷的抗鹽性得到提高。
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本文編號(hào)：2578971