【摘要】：【目的】分離克隆蘋果MdRCD1基因,分析其蛋白結構和逆境響應,并初步鑒定MdRCD1在蘋果愈傷中的功能�！痉椒ā客纯寺dRCD1并測序,用DNAman和MEGA5相關軟件分析MdRCD1氨基酸序列以及進化關系,不同逆境處理‘嘎拉’蘋果組培苗,qRT-PCR分析MdRCD1在逆境條件下的表達量。農桿菌介導的遺傳轉化方法獲得過量表達MdRCD1的轉基因愈傷,不同鹽濃度處理野生型和轉基因愈傷,觀察愈傷的長勢,檢測愈傷的鮮質量、脯氨酸和丙二醛含量,鑒定MdRCD1的初步功能。【結果】從‘嘎拉’蘋果中克隆了MdRCD1(MDP0000234325)基因。該基因ORF為1 803 bp。通過進化樹和蛋白同源性分析,表明蘋果MdRCD1和中國白梨PbRCD1進化親緣關系最近。在MdRCD1的N端有1個保守的WWE結構域,1個PARP催化中心,在C端有1個RST結構域。qRT-PCR實驗表明MdRCD1在蘋果各個組織器官中都有表達,在莖中的表達量高于其他組織;同時MdRCD1的表達受Na Cl、ABA、滲透脅迫等逆境脅迫的誘導。通過農桿菌侵染獲得過量表達MdRCD1轉基因蘋果愈傷。鹽脅迫處理條件下,過量表達MdRCD1的抗性明顯提高�！窘Y論】MdRCD1在進化過程中比較保守,蘋果不同組織中都有表達,過量表達MdRCD1蘋果愈傷的抗鹽性得到提高。
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本文編號：2578971