【摘要】：煙蚜繭蜂Aphidius gifuensis Ashmaed是一種優(yōu)良的內(nèi)寄生性天敵昆蟲,可有效控制桃蚜等多種蚜蟲為害。通過調(diào)控溫光環(huán)境可誘導(dǎo)煙蚜繭蜂進(jìn)入滯育,既能提升子代煙蚜繭蜂的適應(yīng)能力和寄生能力,又能顯著延長天敵產(chǎn)品的貨架期,促進(jìn)天敵昆蟲在害蟲生物防治中的應(yīng)用。本文通過對煙蚜繭蜂的正常發(fā)育狀態(tài)(ND)、滯育狀態(tài)(D)及滯育解除狀態(tài)(PD)進(jìn)行RNA測序,改變并豐富了以往僅對正常和對照組進(jìn)行分析的常規(guī)做法,重點研究只在滯育狀態(tài)才特異表達(dá)、而在正常發(fā)育和滯育解除后無顯著變化的轉(zhuǎn)錄組學(xué)波動規(guī)律。經(jīng)分別構(gòu)建正常發(fā)育、滯育、滯育解除樣本組,再經(jīng)RNA提取與純化,c DNA合成,c DNA文庫構(gòu)建,文庫質(zhì)檢合格后進(jìn)行de novo雙端測序,根據(jù)對9個樣本的測序結(jié)果,獲取unigene 40477個,獲得ND組與D組差異表達(dá)基因458個,D組與PD組差異表達(dá)基因298個,進(jìn)一步篩選出D組與ND及PD組顯著差異、但ND組與PD組無顯著差異的滯育關(guān)聯(lián)基因59個,對后者進(jìn)行了GO富集、KEGG通路富集等表達(dá)分析,根據(jù)功能注釋發(fā)現(xiàn)這些滯育關(guān)聯(lián)基因與自身防御、耐寒性、脂類代謝、表皮黑化、轉(zhuǎn)錄調(diào)控等途徑相關(guān),是影響煙蚜繭蜂滯育進(jìn)程的重要調(diào)控和參與基因。
【圖文】：

蛋白亞型x2（gi|665796148）屬于肌動蛋白微絲系統(tǒng)；中間絲相關(guān)蛋白2（gi|665786569）屬于中間絲蛋白。同時，肌鈣蛋白C（gi|345480545）通過與Ca2+結(jié)合，發(fā)生構(gòu)變調(diào)節(jié)肌肉收縮。編碼PDZ結(jié)構(gòu)域的基因（gi|665785431）顯著上調(diào)表達(dá)，據(jù)報道，在滯育淡色庫蚊Culexpipiens中，類似結(jié)構(gòu)基因主要作為肌動蛋白細(xì)胞骨架的銜接蛋白，促進(jìn)細(xì)胞粘附并控制肌肉運動[11]。上述滯育關(guān)聯(lián)基因可能與細(xì)胞骨架的增強共建有關(guān)，增強在低溫環(huán)境下的抗寒性。滯基因育數(shù)個umberNfoiapausedsaosicatedgenes圖2煙蚜繭蜂滯育關(guān)聯(lián)基因分類Fig.2ClassificationofA.gifuensisdiapauseassociatedgenes2.3.2自身免疫防御相關(guān)基因分析結(jié)果顯示，10個滯育關(guān)聯(lián)基因參與了自身免疫防御。其中，3個絲氨酸蛋白酶基因（gi|239049675，，gi|665810610，gi|665816995）顯著上調(diào)，主要以絲氨酸作為親和攻擊的活性氨基酸，參與昆蟲的免疫級聯(lián)激活途徑，來抵御病原生物入侵和生物體的自我保護(hù)。其他基因還包括參與谷胱甘肽代謝的谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（gi|345497598）、具有鋅離子結(jié)合位點的胞內(nèi)羧肽酶（gi|340709090）、具有HSP70結(jié)構(gòu)域的DnaJ同源體（gi|665799325）、具有昆蟲體內(nèi)多功能氧化酶活性的細(xì)胞色素氧化酶（gi|645003100）、在昆蟲免疫與進(jìn)化有調(diào)控作用的γ干擾素誘導(dǎo)的溶酶體巰基還原酶（gi|665796092）、調(diào)節(jié)人體骨細(xì)胞礦物質(zhì)平衡的磷酸調(diào)節(jié)中性肽鏈內(nèi)切酶（gi|665818658）、保護(hù)昆蟲免受細(xì)菌入侵的圍食膜因子（gi|665809722）。上述基因在滯育期間的顯著表達(dá)，可能表明煙蚜繭蜂在滯育期間的自身免疫方面有多方面的變化。2.3.3脂類代謝相關(guān)基因在脂類代謝相關(guān)的滯育關(guān)聯(lián)基因中，有2個脂肪酸合成相關(guān)基因，2個脂肪酸降解相關(guān)基因，1個貯藏蛋白基因。脂?

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