【摘要】：【目的】發(fā)現(xiàn)昆蟲精巢干細胞自我更新相關基因3'UTR上的保守miRNA靶位點,為深入研究昆蟲精子發(fā)生進程中的miRNA-基因調(diào)控關系提供參考�！痉椒ā渴褂肂last搜索27種全變態(tài)昆蟲精巢干細胞自我更新相關基因,并預測這些基因的3'UTR。使用Target Scan預測這些基因3'UTR上的miRNA靶位點。對家蠶Bombyx mori和小菜蛾Plutella xylostella的Chinmo和Imp基因包含let-7-5p靶標點的3'UTR序列進行了克隆,使用雙熒光素酶報告系統(tǒng)對其靶標關系進行驗證�！窘Y果】在27種全變態(tài)昆蟲中發(fā)現(xiàn)了17個精巢干細胞自我更新相關基因。利用Target Scan在這些基因的3'UTR上預測到了203個保守的miRNA靶位點。其中Zfh-1,Chinmo,Ken及Imp的3'UTR上存在大量的miRNA靶位點,但miRNA靶位點數(shù)目在不同昆蟲類群中也存在很大差異。其中,Chinmo及Imp 3'UTR上的let-7-5p靶位點在昆蟲中保守。分別克隆了家蠶和小菜蛾Chinmo和Imp的3'UTR,通過雙熒光素酶報告系統(tǒng)轉(zhuǎn)染239T細胞證實了let-7-5p對Chinmo和Imp兩個基因的調(diào)控作用�！窘Y論】發(fā)現(xiàn)在4個昆蟲精巢干細胞自我更新相關基因Zfh-1,Chinmo,Ken和Imp的3'UTR上存在大量的miRNA靶標位點。其中Chinmo及Imp基因3'UTR上let-7-5p靶位點在大多數(shù)全變態(tài)昆蟲中保守,雙熒光素酶報告系統(tǒng)實驗證實了家蠶和小菜蛾中l(wèi)et-7-5p與Chinmo和Imp存在相互作用,為進一步研究miRNA在昆蟲精子發(fā)生進程中的功能提供了參考。
【圖文】：

8期馬行洲等:miＲNA調(diào)控昆蟲精巢干細胞自我更新相關基因的保守性分析和靶標驗證853圖1利用Miranda，Pita和ＲNAhybrid預測Chinmo與let-7-5p，，Imp與let-7-5p及Zfh-1與miＲ-12-5p的互作關系Fig.1PredictionofinteractionbetweenChinmoandlet-7-5p，Impandlet-7-5p，andZfh-1andmiＲ-12-5pbyMiranda，PitaandＲNAhybrid圖2Chinmo3'UTＲ上的保守let-7靶位點Fig.2Theconservedlet-7targetsitesonthe3'UTＲofChinmo

8期馬行洲等:miＲNA調(diào)控昆蟲精巢干細胞自我更新相關基因的保守性分析和靶標驗證853圖1利用Miranda，Pita和ＲNAhybrid預測Chinmo與let-7-5p，Imp與let-7-5p及Zfh-1與miＲ-12-5p的互作關系Fig.1PredictionofinteractionbetweenChinmoandlet-7-5p，Impandlet-7-5p，andZfh-1andmiＲ-12-5pbyMiranda，PitaandＲNAhybrid圖2Chinmo3'UTＲ上的保守let-7靶位點Fig.2Theconservedlet-7targetsitesonthe3'UTＲofChinmo


本文編號：2557114