發(fā)布時(shí)間：2019-09-27 10:36

【摘要】：通過RT-PCR和RACE技術(shù),從荔枝胚性愈傷組織中克隆得到了SUMO結(jié)合酶1基因的全長cDNA序列,命名為LcSCE1。LcSCE1 cDNA全長為840 bp,CDS全長483 bp,預(yù)測(cè)可編碼160個(gè)氨基酸。生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn):LcSCE1為帶負(fù)電的親水不穩(wěn)定蛋白,沒有信號(hào)肽和跨膜結(jié)構(gòu)域,進(jìn)化上,LcSCE1與麻風(fēng)樹SCE1蛋白親緣關(guān)系最近。利用Real-time PCR技術(shù)研究了LcSCE1在不同組織部位的表達(dá)情況,發(fā)現(xiàn)該基因在"元紅"荔枝各組織器官中均有表達(dá),在新葉與芽中表達(dá)量最高,膨大期果核中該基因的表達(dá)量也顯著高于成熟果核(p0.01)。此外,本研究還比較了該基因在醮核和正常核中LcSCE1的表達(dá)情況,發(fā)現(xiàn)它在醮核中的表達(dá)量顯著高于正常核(p0.01)。本研究結(jié)果表明LcSCE1可能在荔枝生長發(fā)育及醮核產(chǎn)生過程中發(fā)揮著重要作用。
【圖文】：

，切除幾個(gè)在羧基端的氨基酸，從而使得未成熟的SUMO修飾蛋白前體轉(zhuǎn)化為成熟的SUMO修飾蛋白；之后通過與SUMO活化酶(SUMO-activat-ingenzyme,SAE)的作用，成熟的SUMO修飾蛋白會(huì)經(jīng)過SUMO活化酶轉(zhuǎn)移到SUMO結(jié)合酶(SUMO-conjugatingEnzyme,SCE,又名Ubiquitin-conjugatingenzyme,UBC9)上；通過一個(gè)或多個(gè)的SUMOE3連接酶來識(shí)別目標(biāo)蛋白，并將成熟的SUMO修飾蛋白連接到目標(biāo)蛋白上；最后，在SUMO特異蛋白酶(SENPs)的作用下使SUMO修飾蛋白與目標(biāo)蛋白解離，恢復(fù)到單獨(dú)的游離狀態(tài)(韋瑋等,2008)，接著進(jìn)行下一個(gè)SUMO化修飾的循環(huán)(圖1)。植物SUMO化修飾過程與動(dòng)物類似，也主要包括活化、結(jié)合、連接和去SUMO化4個(gè)環(huán)節(jié)(Novatchkovaetal.,2004;初冰和陳禹先,2013)。蛋白SUMO化修飾會(huì)影響目標(biāo)蛋白的亞細(xì)胞定位(廖書勝,2008;Yangetal.,2012;李玲等,2013)、活性(Lietal.,2007;Kangetal.,2001)、信號(hào)傳遞功能(Lalioti,2002;過倩萍,2010;黃海等,2011)等，在生物生命活動(dòng)中發(fā)揮著調(diào)節(jié)作用。SCE1基因是SUMO化修飾過程中的重要酶基因，它在動(dòng)植物中的作用已有了大量報(bào)道。荔枝SCE1基因的相關(guān)研究圖1植物SUMO化修飾過程(Geiss-FriedlanderandMatunis.,2007)Figure1ProcessofSUMOmodificationinplant(Geiss-Friedlan-derandMatunis.,2007)還未見報(bào)道，因此，本研究擬根據(jù)亞麻，大豆，甜橙和麻風(fēng)樹等SUMO結(jié)合酶基因的序列信息，利用RT-PCR與RACE技術(shù)獲得荔枝SCE1基因并研究其在荔枝不同組織器官中的表達(dá)模式，以期為揭示LcSCE1在荔枝的作用機(jī)制奠定基矗1結(jié)果與分析1.1荔枝LcSCE1基因的全長cDNA的獲得通過同源比對(duì)設(shè)計(jì)SCE1保守區(qū)域擴(kuò)增引物，，擴(kuò)增獲得長度為315bp的保守序列，并通過所得到的保守序列設(shè)計(jì)3'RACE和5'RACE巢?

鞍祝囗

本文編號(hào)：2542665