【摘要】：褐飛虱是危害水稻生產(chǎn)最重要的蟲害之一。培育抗褐飛虱水稻品種被認(rèn)為是最有效的減少蟲害的方法。目前,我國(guó)在栽培品種中陸續(xù)發(fā)現(xiàn)并鑒定了大量抗褐飛虱材料,而鑒定和定位抗褐飛虱基因是培育抗蟲水稻的基礎(chǔ)。昌恢891是一個(gè)優(yōu)良的抗褐飛虱秈稻恢復(fù)系品種,為定位其中控制褐飛虱的基因,對(duì)親本昌恢891,02428及其雜種Fl,F2:3單株129個(gè)分離群體進(jìn)行抗褐飛虱鑒定,結(jié)果表明該抗性性狀由一對(duì)顯性主效基因控制,并受到微效基因的修飾。利用昌恢891/02428 F2群體,構(gòu)建了含有129個(gè)單株的F2群體的遺傳連鎖圖譜。該連鎖圖包含108個(gè)SSR標(biāo)記,覆蓋整個(gè)水稻基因組2 038.6 cM,每?jī)蓚�(gè)標(biāo)記之間的平均距離為18.8 cM。利用Windows QTL Cartographer V2.0的復(fù)合區(qū)間作圖法對(duì)F2群體的抗褐飛虱基因進(jìn)行定位,在第4染色體上檢測(cè)到一個(gè)主效抗性QTL位點(diǎn),LOD值為10.53,貢獻(xiàn)率分別為39.8%,位于第四染色體標(biāo)記RM518和RH007之間,暫時(shí)命名為qBPH4(t)。
【圖文】：

應(yīng)體積，含10×PCＲbuffer1．5μL，dNTP1．0μL，25mmol/LMgCl21．0μL，10μmol/L正、反SSＲ引物各0．6μL，Taq聚合酶(5U/μL)0．1μL，20ng模板DNA，以昌恢891、02428和F2∶3家系的基因組DNA為模板，SSＲ標(biāo)記作為引物，進(jìn)行PCＲ擴(kuò)增。SSＲ分析是參照Liu等［13］的略加修改的方法。95℃下預(yù)變性5min;94℃下變性40s，根據(jù)不同引物的退火溫度分別在50，55，61，67℃下退火40s，72℃下延伸1min，30個(gè)循環(huán);最后72℃下延伸8min。PCＲ擴(kuò)增產(chǎn)物在6%非變性聚丙烯酰胺凝膠上恒壓電泳，擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行銀染法［14］顯影。圖1接蟲評(píng)價(jià)過(guò)程Fig．1TheevaluationofBPHresistance1．4群體圖譜的構(gòu)建及連鎖分析根據(jù)Temnykh等［15］、McCouch等［16］發(fā)表的水稻分子圖譜和微衛(wèi)星數(shù)據(jù)庫(kù)(http://www．gramene．org/microsat)發(fā)表的SSＲ引物以及自己設(shè)計(jì)合成的引物，選擇覆蓋水稻整個(gè)基因組的1000余對(duì)SSＲ引物檢測(cè)昌恢891和02428之間的多態(tài)性。再利用有多態(tài)的引物檢測(cè)昌恢891/02428F2群體各單株的基因型，按照MAPMAＲKEＲ軟件的要求，將與昌恢891相同的帶型賦值為“A”，與02428相同的帶型賦值為“B”，與F1雜種相同的帶型賦值為“H”，缺失的帶型賦值為“－”。綜合SSＲ標(biāo)記實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用mapmaker軟件［17］對(duì)F2群體進(jìn)行遺傳作圖和抗性QTL檢測(cè)及遺傳效應(yīng)分析。利用Kosamhi函數(shù)將重組率轉(zhuǎn)化為遺傳圖距(centimorgan，cM)，采用MapDraw2．2［18］軟件繪制局部遺傳連鎖圖譜。2結(jié)果2．1褐飛虱抗性遺傳分析對(duì)親本昌恢891，02428及其雜種Fl，F(xiàn)2:3單株129個(gè)分離群體進(jìn)行抗褐飛虱鑒定。如圖2所示，每個(gè)品種設(shè)1個(gè)重復(fù)，從左到右的品種依次為ＲH、昌恢891、02428和TN1。圖2親本鑒定結(jié)果Fig．2BPHresistanceinfortheparents

群體各單株的基因型，按照MAPMAＲKEＲ軟件的要求，將與昌恢891相同的帶型賦值為“A”，與02428相同的帶型賦值為“B”，與F1雜種相同的帶型賦值為“H”，缺失的帶型賦值為“－”。綜合SSＲ標(biāo)記實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用mapmaker軟件［17］對(duì)F2群體進(jìn)行遺傳作圖和抗性QTL檢測(cè)及遺傳效應(yīng)分析。利用Kosamhi函數(shù)將重組率轉(zhuǎn)化為遺傳圖距(centimorgan，cM)，采用MapDraw2．2［18］軟件繪制局部遺傳連鎖圖譜。2結(jié)果2．1褐飛虱抗性遺傳分析對(duì)親本昌恢891，02428及其雜種Fl，F(xiàn)2:3單株129個(gè)分離群體進(jìn)行抗褐飛虱鑒定。如圖2所示，每個(gè)品種設(shè)1個(gè)重復(fù)，，從左到右的品種依次為ＲH、昌恢891、02428和TN1。圖2親本鑒定結(jié)果Fig．2BPHresistanceinfortheparents圖3定位群體單株褐飛虱抗性分布Fig．3ThefrequentcydistributionofBPHresistance昌恢891及其雜種Fl表現(xiàn)高抗(分別為0．5和l級(jí))，親本02428表現(xiàn)感蟲(9級(jí))(表1)。如圖3所示，129個(gè)分離群體對(duì)褐飛虱的抗性呈雙峰分布，97株表現(xiàn)褐飛虱抗性(1～5級(jí))，32株表現(xiàn)褐飛虱感(7～9級(jí))，其分離比例符合抗∶感=3∶1(χ2=0．024，χ20．05，2=5．99)，表明該抗性性狀由一對(duì)顯性主效基因控制(表2)。·234·
【作者單位】： 江西農(nóng)業(yè)大學(xué)作物遺傳育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/超級(jí)稻育種理論與技術(shù)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì);江西省九江市農(nóng)業(yè)局;南京農(nóng)業(yè)大學(xué)水稻所;
【基金】：江西省優(yōu)勢(shì)科技創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目(2010DQB01600) 贛鄱英才555工程項(xiàng)目 江西省科技廳科技項(xiàng)目(20141BBF60004)~~
【分類號(hào)】：S511.21

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本文編號(hào)：2539809