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嗜熱脂肪土芽孢桿菌普魯蘭酶基因的異源表達(dá)及重組酶性質(zhì)

發(fā)布時間:2019-09-22 01:08
【摘要】:用PCR方法擴增得到嗜熱脂肪土芽孢桿菌(Geobacillus stearothermophilus)XQ3506的普魯蘭酶編碼基因Gs P,在大腸桿菌中進(jìn)行異源表達(dá)。在沒有外源信號肽的條件下,重組酶部分分泌到周質(zhì)中,少量分泌到培養(yǎng)液中。重組酶表觀分子量約為81 k Da,純酶比活力為38.2 U/mg。重組酶最適溫度為60℃,能短時耐受70℃高溫;重組酶最適pH6.5,在pH5.5~7.5的范圍內(nèi)具有較好的穩(wěn)定性;重組酶Km值為0.086μmol/L,Vmax為0.083μmol/min;K+和Mg~(2+)對重組酶有激活作用,而Ca~(2+)則有抑制作用。重組酶水解普魯蘭糖產(chǎn)物為單一麥芽三糖,對直鏈淀粉未發(fā)現(xiàn)降解作用,是一種I型普魯蘭酶。重組酶Gs P在直鏈淀粉、抗性淀粉生產(chǎn)和粉絲酶法生產(chǎn)工藝中有一定的應(yīng)用前景。
【作者單位】: 江南大學(xué)工業(yè)生物技術(shù)教育部重點實驗室;江南大學(xué)中國高校工業(yè)微生物資源數(shù)據(jù)平臺;
【基金】:國家863高技術(shù)研究發(fā)展計劃(2013AA102101-5)
【分類號】:TS201.25

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本文編號:2539655


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