【摘要】：構(gòu)建煙草卵細(xì)胞和合子的cDNA文庫(kù),通過(guò)抑制性差減雜交和鏡像選擇進(jìn)行卵細(xì)胞特異表達(dá)基因的篩選。篩選結(jié)果得到一個(gè)卵細(xì)胞特異表達(dá)的,與胱天蛋白酶基因類似(CASP-like)的基因NtEE1。生物信息學(xué)分析表明,NtEE1蛋白由194個(gè)氨基酸組成,含有4個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域。NtEE1-GFP融合蛋白的亞細(xì)胞定位也顯示,該蛋白可能存在于質(zhì)膜和核膜上。同時(shí)擴(kuò)增擬南芥actin11基因的啟動(dòng)子序列驅(qū)動(dòng)核定位GFP的表達(dá),并對(duì)煙草進(jìn)行異位轉(zhuǎn)基因,結(jié)果發(fā)現(xiàn),actin11在煙草卵細(xì)胞中具有較強(qiáng)的啟動(dòng)子活性。這些研究結(jié)果可以為通過(guò)RNAi和過(guò)表達(dá)來(lái)研究NtEE1基因在煙草卵細(xì)胞發(fā)育和在精、卵細(xì)胞相互作用中可能的功能提供理論基礎(chǔ)。
【作者單位】： 長(zhǎng)江大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【基金】：長(zhǎng)江大學(xué)自然科學(xué)基金項(xiàng)目(2014NSFY023)
【分類號(hào)】：Q943.2

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本文編號(hào)：2538817