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基于CV-1細(xì)胞雌激素受體報(bào)告基因試驗(yàn)方法建立及雙酚A類似物雌激素效應(yīng)的檢測(cè)

發(fā)布時(shí)間:2019-09-20 04:28
【摘要】:以熒光素酶為報(bào)告基因,通過雌激素反應(yīng)元件調(diào)控的帶有熒光素酶報(bào)告基因質(zhì)粒pERE-TATA-Luc和雌激素受體表達(dá)質(zhì)粒rERa/pCI,采用瞬時(shí)共轉(zhuǎn)染方法,將Luc報(bào)告基因質(zhì)粒和受體表達(dá)質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染至非洲猴腎CV-1細(xì)胞,以雌二醇作為陽(yáng)性對(duì)照物,其濃度為10~(-10)mol·L~(-1)時(shí)顯著誘導(dǎo)熒光素酶的表達(dá),濃度為10~(-9)mol·L~(-1)時(shí)達(dá)最大值,半數(shù)效應(yīng)濃度EC50值為6.1×10~(-11)mol·L~(-1)。通過雌二醇、己烯雌酚和木黃酮檢測(cè)系統(tǒng)的靈敏性、有效性和穩(wěn)定性驗(yàn)證,建立實(shí)驗(yàn)室穩(wěn)定、靈敏的雌激素受體報(bào)告基因細(xì)胞系;诜侵藓锬ICV-1細(xì)胞受體報(bào)告基因試驗(yàn),研究雙酚A類似物擬雌激素干擾活性,雌激素活性大小順序?yàn)锽PAFBPFBPBBPABPZBPAPBPSBPP。結(jié)果表明,CV-1細(xì)胞受體報(bào)告基因試驗(yàn)是一種篩選雌激素活性內(nèi)分泌干擾物的快速、有效的方法。
【作者單位】: 環(huán)境保護(hù)部南京環(huán)境科學(xué)研究所;
【基金】:中央級(jí)公益性科研院所基本科研業(yè)務(wù)專項(xiàng)(20160407) 江蘇省自然科學(xué)基金(BK20151100)
【分類號(hào)】:R114

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本文編號(hào):2538545

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