【摘要】：本研究以玉米(Zea mays)為材料,通過農(nóng)桿菌(Agrobacterium tumefaciens)介導的莖尖轉(zhuǎn)化法將對除草劑2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)降解的Tfd A基因轉(zhuǎn)入玉米,篩選出對除草劑2,4-D具有高抗性的轉(zhuǎn)基因玉米植株。研究表明,噴施20 g·L~(-1)的2,4-D溶液7 d后,91%的野生型玉米植株出現(xiàn)根和莖腫脹畸形且橫向生長、葉片枯黃脫落等現(xiàn)象,而轉(zhuǎn)基因植株生長良好,未出現(xiàn)明顯的受害癥狀。隨2,4-D處理時間的推移,轉(zhuǎn)基因和非轉(zhuǎn)基因玉米植株的葉綠素含量均逐漸下降,但后者的降幅極顯著高于前者。二氨基聯(lián)苯胺(DAB)染色后發(fā)現(xiàn),經(jīng)2,4-D處理的野生型植株葉片H_2O_2積累顯著高于轉(zhuǎn)基因植株,且前者的丙二醛(MDA)含量也顯著高于后者,分別為3.34和2.08μmol·g-1(蛋白)。在2,4-D處理3 d后,轉(zhuǎn)基因植株的超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)和過氧化物酶(POD)活性峰值分別為34.88、4.10和31.56 U·mg-1(蛋白),是其野生型的1.65、1.4和1.7倍(差異極顯著)。綜上結(jié)果表明,轉(zhuǎn)Tfd A基因玉米顯著提高了對除草劑2,4-D的抗性。
[Abstract]:In this study, the Tfd A gene of 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) was transferred to maize by Agrobacterium tumefaciens-mediated stem-point transformation method, and the transgenic corn plants with high resistance to the herbicide 2,4-D were screened. The results showed that after 7 days of spraying of 20 g 路 L ~ (-1) 2,4-D solution,91% of the wild-type maize plants had the phenomena of root and stem swelling, lateral growth, and shedding of the leaves. The chlorophyll content of the transgenic and non-transgenic maize plants decreased gradually with the time of 2,4-D treatment, but the decrease of the latter was significantly higher than that of the former. The H _ 2O _ 2 accumulation of wild-type plant leaves treated with 2,4-D was significantly higher than that of the transgenic plants, and the content of malondialdehyde (MDA) in the former was significantly higher than that of the latter, 3.34 and 2.08. m The activity of superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and peroxidase (POD) in transgenic plants was 34.88, 4.10 and 31.56U 路 mg-1 (protein) after 3 days of 2,4-D treatment, which was 1.65, 1.4 and 1.7 times (significant difference) of wild type. The results showed that the tfd A gene maize significantly increased the resistance to the herbicide 2,4-D.
【作者單位】： 貴州大學農(nóng)業(yè)生物工程研究院/生命科學學院山地植物資源保護與種質(zhì)創(chuàng)新省部共建教育部重點實驗室;貴州省農(nóng)業(yè)科學院;
【基金】：國家轉(zhuǎn)基因生物新品種培育科技重大專項(2016ZX080-10003-009) 貴州省科技廳轉(zhuǎn)基因?qū)ｍ?黔科合2004NGZ004)~~
【分類號】：S482.4;S513

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本文編號：2499507