【摘要】：4-二磷酸胞苷-2-C-甲基-D-赤蘚醇激酶(4-diphosphocytidyl-2-C-methyl-D-erythritol kinase,CMK)是植物萜類化合物生物合成途徑甲基赤蘚醇-4-磷酸途徑(methylerythritol-4-phosphate pathway,DXP/MEP)上的第4個(gè)關(guān)鍵酶。該研究根據(jù)樟樹(shù)轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),利用RT-PCR(reverse transcription-PCR)方法從藥用植物樟樹(shù)Cinnamomum camphora中克隆得到4-二磷酸胞苷-2-C-甲基-D-赤蘚醇激酶基因,命名為Cc CMK1(Gene Bank登錄號(hào)Ku376098),對(duì)其序列進(jìn)行生物信息學(xué)分析,結(jié)果表明該基因開(kāi)放閱讀框(ORF)為1 212 bp,編碼403個(gè)氨基酸,推測(cè)其相對(duì)分子質(zhì)量為44.46 k Da,等電點(diǎn)(theoretical p I)為4.99�？缒そY(jié)構(gòu)分析表明CMK蛋白不存在跨膜結(jié)構(gòu)。信號(hào)肽分析表明其為非分泌蛋白,不存在信號(hào)肽。亞細(xì)胞定位表明其定位于葉綠體中。利用熒光實(shí)時(shí)PCR檢測(cè)了龍腦樟、油樟、芳樟、腦樟和異樟5種化學(xué)型樟樹(shù)中Cc CMK1基因的表達(dá)量,結(jié)果表明Cc CMK1基因在油樟中的表達(dá)量最高,龍腦樟中表達(dá)量最低,為樟樹(shù)萜類化合物生物合成途徑關(guān)鍵酶基因元件挖掘提供研究基礎(chǔ)。
[Abstract]:Cytidine 4-diphosphate 2 / C-methyl-D-monositol kinase (4-diphosphocytidyl-2-C-methyl-D-erythritol kinase,CMK) is a biosynthesis pathway of plant terpenoids, methyl gibberellin-4-phosphate pathway (methylerythritol-4-phosphate pathway,). The fourth key enzyme on DXP/MEP. Based on the data of camphor transcriptional group, the 4-cytidine diphosphate 2 / C-methyl-D-erythritol kinase gene was cloned from Cinnamomum camphora by RT-PCR (reverse transcription-PCR). The sequence of Cc CMK1 (Gene Bank accession number Ku376098 was analyzed by bioinformatics analysis. The results showed that the open reading frame (ORF) of the gene was 1 212 bp, encoding 403amino acids, and its relative molecular weight was 44.46k Da,. The isoelectric point (theoretical p I) is 4.99. Transmembrane structure analysis showed that CMK protein did not have transmembrane structure. Signal peptide analysis showed that it was a non-secretory protein and there was no signal peptide. Subcellular localization showed that it was located in chloroplasts. The expression of Cc CMK1 gene in Cinnamomum camphora, Cinnamomum camphora and Cinnamomum camphora was detected by fluorescence real-time PCR. The results showed that the expression of Cc CMK1 gene was the highest in Cinnamomum camphora and the lowest in Cinnamomum camphora. It provides a research basis for the mining of key enzyme gene elements in the biosynthesis pathway of terpenoids in camphor trees.
【作者單位】： 中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中藥資源中心道地藥材國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地 安徽中醫(yī)藥大學(xué)
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(30901963)
【分類號(hào)】：S567.19;Q943.2

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 童宇茹;蘇平;趙瑜君;張萌;王秀娟;胡添源;高偉;黃璐琦;;雷公藤4-(5'-二磷酸胞苷)-2-C-甲基-D-赤蘚醇激酶基因的全長(zhǎng)克隆與表達(dá)分析[J];中國(guó)中藥雜志;2015年21期

2 李勇鵬;張力維;姚瑤;黃蕊;杜麗;;香樟Actin基因的克隆及表達(dá)分析[J];生物技術(shù)通報(bào);2015年05期

3 張力維;李勇鵬;姚瑤;梁優(yōu);杜麗;;香樟延伸因子EF1a基因片段的克隆及表達(dá)分析[J];中南林業(yè)科技大學(xué)學(xué)報(bào);2015年05期

4 劉星星;張茜;郭夏麗;龔上佶;江香梅;付宇新;羅麗萍;;不同化學(xué)型樟樹(shù)葉揮發(fā)性成分組成的多變量分析[J];植物學(xué)報(bào);2014年02期

5 江香梅;伍艷芳;肖復(fù)明;熊振宇;徐海寧;;樟樹(shù)5種化學(xué)類型葉片轉(zhuǎn)錄組分析[J];遺傳;2014年01期

6 呂婧;劉貫山;龔達(dá)平;孫玉合;;野生煙草甲羥戊酸激酶NsyMK基因克隆與序列分析[J];作物雜志;2013年05期

7 胡文杰;高捍東;江香梅;楊海寬;;樟樹(shù)油樟、腦樟和異樟化學(xué)型的葉精油成分及含量分析[J];中南林業(yè)科技大學(xué)學(xué)報(bào);2012年11期

8 郭溆;羅紅梅;陳士林;;三七甲羥戊酸激酶PnMVK1基因的克隆和生物信息學(xué)分析[J];藥學(xué)學(xué)報(bào);2012年08期

9 王學(xué)勇;崔光紅;黃璐琦;高偉;袁媛;;丹參4-(5′-二磷酸胞苷)-2-C-甲基-D-赤蘚醇激酶的cDNA全長(zhǎng)克隆及其誘導(dǎo)表達(dá)分析[J];藥學(xué)學(xué)報(bào);2008年12期

10 吳航,王建軍,劉馳,朱亮鋒;黃樟化學(xué)型的研究[J];植物資源與環(huán)境;1992年04期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 劉攀峰;杜仲M(fèi)EP途徑系列基因全長(zhǎng)cDNA分離鑒定及序列特征研究[D];中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院;2012年

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 姜福星;魏丕偉;寇亞平;賈茵;陳其兵;;臺(tái)灣金線蓮轉(zhuǎn)錄組特性研究[J];分子植物育種;2015年12期

2 付濤;王志龍;;GC-MS法分析不同部位仿野生與組培快繁鐵皮石斛中的揮發(fā)性成分[J];中成藥;2015年12期

3 童宇茹;蘇平;趙瑜君;張萌;王秀娟;胡添源;高偉;黃璐琦;;雷公藤4-(5'-二磷酸胞苷)-2-C-甲基-D-赤蘚醇激酶基因的全長(zhǎng)克隆與表達(dá)分析[J];中國(guó)中藥雜志;2015年21期

4 姜福星;楊麗娟;高素萍;高順;陳其兵;;碰碰香葉片的轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析[J];分子植物育種;2015年10期

5 姜福星;江欣燕;吳生;楊麗娟;李文驥;陳其兵;;虎眼萬(wàn)年青鱗莖轉(zhuǎn)錄組特性分析[J];分子植物育種;2015年09期

6 姜福星;楊麗娟;陳其兵;高順;;瀘定百合轉(zhuǎn)錄組測(cè)序與特性分析[J];西北林學(xué)院學(xué)報(bào);2015年05期

7 胡文杰;江香梅;楊海寬;;異樟葉精油及其主成分含量的動(dòng)態(tài)變化研究[J];湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2015年04期

8 李群;譚韻雅;魏琴;汪超;游玲;;樟屬植物葉水浸提液對(duì)油樟懸浮細(xì)胞培養(yǎng)的影響[J];天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā);2015年07期

9 高偉;胡添源;郭娟;呂冬梅;戴住波;周雍進(jìn);黃璐琦;;丹參酮合成生物學(xué)研究進(jìn)展[J];中國(guó)中藥雜志;2015年13期

10 張曉東;李彩霞;趙靜;楊嬌;王元忠;;滇龍膽甲羥戊酸激酶基因的克隆與表達(dá)分析[J];生命科學(xué)研究;2015年03期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 李鐵柱;杜仲4種活性成分合成系列基因多樣性及序列特征[D];中南林業(yè)科技大學(xué);2015年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 肖政;李紀(jì)元;范正琪;殷恒福;;荔波連蕊茶肌動(dòng)蛋白基因全長(zhǎng)cDNA的克隆及其表達(dá)分析[J];林業(yè)科學(xué)研究;2014年03期

2 張勇;湯浩茹;羅婭;王小蓉;陳清;劉澤靜;;草莓FaCBF1基因的克隆及表達(dá)分析[J];園藝學(xué)報(bào);2014年02期

3 蔣曉梅;張新全;嚴(yán)海東;張瑜楊;盛婷;黃琳凱;;柳枝稷根組織實(shí)時(shí)定量PCR分析中內(nèi)參基因的選擇[J];農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào);2014年01期

4 李高;楊杞;張燁;王穎;張濤;李國(guó)婧;王瑞剛;;檸條錦雞兒肉桂酰輔酶A還原酶基因克隆和分析[J];中國(guó)生物工程雜志;2014年01期

5 蘇曉娟;樊保國(guó);袁麗釵;崔秀娜;盧善發(fā);;實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析中毛果楊內(nèi)參基因的篩選和驗(yàn)證[J];植物學(xué)報(bào);2013年05期

6 周峰;劉燕;馬永貴;黃原;;真核翻譯延伸因子1A蛋白家族功能位點(diǎn)的進(jìn)化蹤跡分析[J];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2013年08期

7 周靜;張煒;李大明;張錫九;陳其兵;;藍(lán)花楹JaCBF1轉(zhuǎn)錄因子片段的序列分析及耐寒性功能驗(yàn)證[J];林業(yè)科學(xué)研究;2013年04期

8 祝傳書;馮慧娜;薛璐莎;楊廣隸;馮俊濤;張興;;雷公藤胚狀體培養(yǎng)合成雷公藤甲素與總生物堿的初步研究[J];農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào);2013年06期

9 MAKSUP Sarunyaporn;SUPAIBULWATANA Kanyaratt;SELVARAJ Gopalan;;High-quality reference genes for quantifying the transcriptional responses of Oryza sativa L. (ssp. indica and japonica) to abiotic stress conditions[J];Chinese Science Bulletin;2013年16期

10 高偉;程琪慶;馬曉惠;何云飛;蔣超;袁媛;黃璐琦;;丹參2-C-甲基-D-赤蘚糖醇2,4-環(huán)焦磷酸合成酶(SmMCS)基因全長(zhǎng)克隆及其生物信息學(xué)分析[J];中國(guó)中藥雜志;2012年22期

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 荊禮;鄭漢;姚娜;陳美蘭;申業(yè);黃璐琦;;樟樹(shù)4-二磷酸胞苷-2-C-甲基-D-赤蘚醇激酶基因的克隆及表達(dá)分析[J];中國(guó)中藥雜志;2016年09期

2 施文鈞;張雪蓮;張e，

本文編號(hào)：2491591