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茶樹磷酸烯醇式丙酮酸轉(zhuǎn)運(yùn)子CsPPT2基因的克隆和分析

發(fā)布時(shí)間:2019-06-02 22:07
【摘要】:以茶樹(Camellia sinensis)白葉1號(hào)為材料,應(yīng)用RT-PCR和RACE技術(shù)克隆獲得茶樹磷酸烯醇式丙酮酸轉(zhuǎn)運(yùn)子家族一個(gè)基因CsPPT2的c DNA序列,并與茶樹體內(nèi)另一個(gè)磷酸烯醇式丙酮酸轉(zhuǎn)運(yùn)子家族的基因CsPPT1在不同時(shí)期和不同部位的表達(dá)進(jìn)行比較。CsPPT2的c DNA全長(zhǎng)1 469 bp,其中開放閱讀框(ORF)為1 218 bp,編碼406個(gè)氨基酸。通過(guò)生物學(xué)信息分析表明,CSPPT2蛋白分子量為44.6 k D,理論等電點(diǎn)為9.90,CsPPT2有6個(gè)跨膜區(qū),屬于疏水性葉綠體跨膜蛋白。聚類分析顯示,茶樹磷酸烯醇式丙酮酸轉(zhuǎn)運(yùn)子家族分為2個(gè)亞組,而CsPPT1與CsPPT2屬于不同亞組。熒光定量結(jié)果分析表明,兩個(gè)基因可能在茶樹體內(nèi)功能不同,CsPPT2在所考察的組織中均有表達(dá),且在根和成熟葉片中表達(dá)量遠(yuǎn)大于CsPPT1;CsPPT1在莖和復(fù)綠前的幼嫩芽葉中表達(dá)量高于CsPPT2。在白化期起始時(shí)CsPPT2有短暫的升高,但伴隨白化受到較大的抑制,表明CsPPT2的表達(dá)抑制可能是白葉1號(hào)低兒茶素高氨基酸品質(zhì)形成的關(guān)鍵因素。
[Abstract]:A c-DNA sequence of a gene, CsPPT2, was obtained by using RT-PCR and RACE to obtain a gene CsPPT2 from the family of tea tree (Camellia sinensis). And compared with the expression of the gene CsPPT1 in the other phosphoenolpyruvate transporter family in the tea tree in different times and at different parts. The total length of c-DNA of CsPPT2 was 1,469bp, and the open reading frame (ORF) was 1,218 bp, encoding 406 amino acids. The molecular weight of the CSPPT2 protein is 44.6 kD, the theoretical isoelectric point is 9.90, and the CsPPT2 has 6 transmembrane domains, and belongs to the hydrophobic chloroplast transmembrane protein. The cluster analysis showed that the trienol-type pyruvate transport subfamily of the tea tree was divided into 2 subgroups, and CsPPT1 and CsPPT2 belong to different subgroups. The results of fluorescence quantitative analysis show that the two genes may be different in the tea tree, and CsPPT2 is expressed in the tissues examined, and the expression of CsPPT1 in the root and the mature leaves is much higher than that of CsPPT1; and the expression of CsPPT1 in the leaves of the young shoots before the stem and the compound green is higher than that of CsPPT2. At the beginning of the albino stage, the CsPPT2 has a short increase, but the concomitant whitening is greatly inhibited, indicating that the inhibition of the expression of CsPPT2 may be a key factor for the formation of the low-catechin high-amino-acid quality of the white-leaf No.1.
【作者單位】: 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)茶葉科學(xué)研究所;福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所;
【基金】:現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)資金(CARS-23) 江蘇高校優(yōu)勢(shì)學(xué)科建設(shè)工程資助項(xiàng)目 國(guó)家自然科學(xué)基金(31570691) 江蘇省科技支撐計(jì)劃(BE2009313-1)
【分類號(hào)】:S571.1

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本文編號(hào):2491450


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