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三七NAC轉(zhuǎn)錄因子基因PnNAC1的克隆及表達(dá)特性分析

發(fā)布時(shí)間:2019-04-27 02:38
【摘要】:為了揭示三七抗病防衛(wèi)反應(yīng)的調(diào)控機(jī)制,對(duì)三七的一個(gè)NAC轉(zhuǎn)錄因子的全長(zhǎng)cDNA進(jìn)行了克隆和表達(dá)特性分析。以一年生三七幼苗為材料,根據(jù)編碼NAC轉(zhuǎn)錄因子的三七轉(zhuǎn)錄組Unigene設(shè)計(jì)引物,采用快速擴(kuò)增cDNA末端技術(shù),克隆得到一個(gè)新的NAC轉(zhuǎn)錄因子基因,命名為PnNAC1。序列分析表明,該基因全長(zhǎng)815 bp,含有24 bp的5'非翻譯區(qū)和215 bp的3'非翻譯區(qū),以及576 bp開(kāi)放閱讀框,共編碼191個(gè)氨基酸,具有保守的NAC結(jié)構(gòu)域。實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示茉莉酸甲酯預(yù)處理三七根部大幅提高了PnNAC1在根中的轉(zhuǎn)錄水平,接種茄腐鐮刀菌后,PnNAC1的表達(dá)進(jìn)一步上升,在接種后4 h轉(zhuǎn)錄水平達(dá)最大值;無(wú)菌水預(yù)處理的三七中,PnNAC1也快速響應(yīng)茄腐鐮刀菌的侵染,但表達(dá)水平明顯低于茉莉酸甲酯預(yù)處理的樣品。接種人參鏈格孢后PnNAC1在葉片的表達(dá)量受抑制。茉莉酸甲酯、乙烯利、水楊酸和過(guò)氧化氫4種信號(hào)分子處理三七根部均誘導(dǎo)PnNAC1的表達(dá)。表明PnNAC1響應(yīng)幾種逆境相關(guān)信號(hào)分子,并參與三七對(duì)茄腐鐮刀菌和人參鏈格孢的防衛(wèi)反應(yīng)。
[Abstract]:In order to reveal the regulatory mechanism of resistance and defense response of Panax notoginseng, the full-length cDNA of a NAC transcription factor of Panax notoginseng was cloned and analyzed. Using one-year-old Panax notoginseng seedlings as materials, primers were designed according to the transcription group Unigene encoding NAC transcription factor, and a novel NAC transcription factor gene named PnNAC1. was cloned by rapid amplification of cDNA terminal technique. Sequence analysis showed that 815 bp, contained a 5 'untranslated region of 24 bp and a 3' untranslated region of 215 bp, as well as an open reading frame of 576 bp, encoding a total of 191 amino acids and a conserved NAC domain. The results of real-time fluorescence quantitative PCR showed that methyl jasmonate pretreatment significantly increased the transcription level of PnNAC1 in roots of Panax notoginseng. After inoculation with Fusarium solanacearum, the expression of PnNAC1 increased further, and reached the maximum at 4 h after inoculation. In aseptic water pretreated Panax notoginseng, PnNAC1 also responded rapidly to Fusarium solanacearum infection, but the expression level was significantly lower than that of methyl jasmonate pretreatment. The expression of PnNAC1 in leaves was inhibited after inoculation with Radix Ginseng. The expression of PnNAC1 was induced by methyl jasmonate, ethephon, salicylic acid and hydrogen peroxide in roots of Panax notoginseng. It is suggested that PnNAC1 responds to several stress-related signal molecules and participates in the defense response of Panax notoginseng to Fusarium solanacearum and Radix Ginseng.
【作者單位】: 昆明理工大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81560610) 云南省應(yīng)用基礎(chǔ)研究計(jì)劃項(xiàng)目(2014FA003)
【分類(lèi)號(hào)】:S567.236

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本文編號(hào):2466618

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