【摘要】：采用RT-PCR結(jié)合RACE技術(shù)從陸地棉中棉所12中克隆得到全長為1280 bp的苯甲酸/水楊酸羧基甲基轉(zhuǎn)移酶基因序列,命名為GhBSMT1。預(yù)測該轉(zhuǎn)移酶分子量40.8 kD,等電點6.12,為不穩(wěn)定的親水蛋白。通過原核表達(dá)獲得大小約41 k D的可溶性重組目標(biāo)蛋白。利用實時熒光定量PCR技術(shù)檢測了棉花中GhBSMT1在植物激素處理和棉鈴蟲取食后表達(dá)轉(zhuǎn)錄情況,發(fā)現(xiàn)GhBSMT1在棉花的根、莖和葉中均有表達(dá)。水楊酸甲酯(Me SA)處理能夠引起GhBSMT1下調(diào)表達(dá),而茉莉酸甲酯(Me JA)處理對靶標(biāo)基因影響不顯著。另外,棉鈴蟲取食棉株6 h或48 h后,GhBSMT1表達(dá)量顯著降低。結(jié)果表明,GhBSMT1在棉花各組織均有分布并受外源Me SA調(diào)控,該基因的表達(dá)還被棉鈴蟲取食抑制。
[Abstract]:The total length of 1280bp benzoic acid/ Salicylic acid-base methyltransferase gene was obtained by using RT-PCR and RACE technique from the cotton in Gossypium hirsutum L. to name GBSMT1. The molecular weight of the transferase is predicted to be 40.8 kD and the isoelectric point is 6.12, which is an unstable hydrophilic protein. A soluble recombinant target protein of a size of about 41 k D was obtained by prokaryotic expression. The expression of GhBSMT1 in cotton was detected by real-time fluorescence quantitative PCR, and the expression of GhBSMT1 in the roots, stems and leaves of cotton was found. The treatment of methyl salicylate (Me SA) can cause the down-regulation of GhBSMT1, and the effect of methyl jasmonate (Me JA) on the target gene is not significant. In addition, the expression of GhBSMT1 decreased significantly after 6 h or 48 h of the cotton bollworm. The results showed that GhBSMT1 was distributed and regulated by the exogenous Me SA, and the expression of the gene was also inhibited by the cotton bollworm.
【作者單位】： 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院;中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所/植物病蟲害生物學(xué)國家重點實驗室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31471778,31672038,31621064)
【分類號】：S562

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本文編號：2446841