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瓜葉菊‘大花’Mlo基因RNAi載體的構(gòu)建及其遺傳轉(zhuǎn)化研究

發(fā)布時(shí)間:2019-03-24 16:06
【摘要】:為進(jìn)一步研究瓜葉菊Mlo基因的功能以及為將來獲得具有廣譜與持久的白粉菌抗性瓜葉菊種質(zhì)資源奠定基礎(chǔ),以瓜葉菊(Pericallis hybrida B.Nord)‘大花’為試驗(yàn)材料,克隆瓜葉菊‘大花’Mlo基因保守片段,構(gòu)建了瓜葉菊‘大花’RNAi載體;同時(shí)構(gòu)建了瓜葉菊‘大花’高頻再生體系;并利用根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化瓜葉菊‘大花’進(jìn)而建立了遺傳轉(zhuǎn)化體系。經(jīng)酶切鑒定,成功構(gòu)建了Mlo基因的RNAi載體質(zhì)粒pTCK303-mlo-RNAi,構(gòu)建了瓜葉菊‘大花’高頻再生體系,最終確定瓜葉菊‘大花’最佳愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)基為:MS+6-BA 2.4mg/L+NAA 1.0mg/L+KT 0.3mg/L+2,4-D 1.0mg/L;瓜葉菊‘大花’愈傷組織的分化培養(yǎng)最適培養(yǎng)基為:MS+6-BA 2.0mg/L+NAA0.1mg/L;瓜葉菊‘大花’生根培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基為1/2MS+NAA 0.5mg·L-1,并且初步探索了瓜葉菊‘大花’Mlo基因轉(zhuǎn)化體系。
[Abstract]:In order to further study the function of the Mlo gene and to lay a foundation for the future to obtain a broad-spectrum and long-lasting powdery mildew-resistant melon-leaf chrysanthemum germplasm resource, the method comprises the following steps of: A large-flower 'RNAi vector is constructed, and the high-frequency regeneration system of the large-flower's-flower' is constructed, and the genetic transformation system is further established by using the agrobacterium-mediated transformation of the root cancer. The best callus induction medium was MS + 6-BA 2.4 mg/ L + NAA 1.0 mg/ L + KT 0.3 mg/ L + 2,4-D 1.0 mg/ L, and the optimum medium for callus differentiation and culture was as follows: MS + 6-BA 2.4 mg/ L + NAA 1.0 mg/ L + KT 0.3 mg/ L + 2,4-D 1.0 mg/ L. MS + 6-BA 2.0 mg/ L + NAA0.1 mg/ L; the best culture medium for rooting culture of the large-flower 'flower' of the melon leaves is 1/ 2MS + NAA 0.5 mg 路 L-1, and the transformation system of the large-flower 'Mlo gene of the flower of the melon leaves is preliminarily explored.
【作者單位】: 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院;
【基金】:黑龍江省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(C201112)
【分類號(hào)】:S682.11

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本文編號(hào):2446477

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