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花生AhNCED1基因的克

發(fā)布時(shí)間:2019-03-20 17:51
【摘要】:脫落酸(ABA)在植物生長(zhǎng)發(fā)育中起著重要的作用,9-順式環(huán)氧類胡蘿卜素雙加氧酶基因(NCED)是其合成途徑中的關(guān)鍵基因。采用逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)技術(shù)在花生種子中克隆到其同源基因AhNCED1,預(yù)測(cè)該基因開(kāi)放閱讀框?yàn)? 806 bp,編碼601個(gè)氨基酸,蛋白質(zhì)的分子質(zhì)量為66.8 ku,等電點(diǎn)為8.49。通過(guò)生物信息學(xué)分析表明,該基因含有2種跨膜區(qū),但均不明顯;由17個(gè)絲氨酸、8個(gè)蘇氨酸、5個(gè)酪氨酸參與磷酸化過(guò)程;同源比較發(fā)現(xiàn),該基因與來(lái)自擬南芥、柱花草等的NCED具有較高的同源性,進(jìn)化分析表明該基因與柱花草NCED的親緣關(guān)系最近。筆者成功構(gòu)建了該基因的亞細(xì)胞定位載體AhNCED1-GFP和超表達(dá)載體p Cambia2300EC-AhNCED1,為進(jìn)一步研究花生中AhNCED1基因的功能奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Abscisic acid (ABA) plays an important role in plant growth and development. 9-cis-carotenoid dioxygenase (NCED) gene is the key gene in the synthesis of 9-cis-carotenoid dioxygenase gene. Reverse transcription PCR (RT-PCR) technique was used to clone the homologous gene AhNCED1, in peanut seeds, which predicted that the open reading frame of the gene was 1 806 bp, encoding 601 amino acids and the molecular weight of the protein was 66.8 ku, isoelectric point 8.49. Bioinformatics analysis showed that the gene contained two transmembrane regions, but none of them were obvious, and 17 serine, 8 threonine and 5 tyrosine were involved in the phosphorylation process. It was found that the gene had high homology with NCED from Arabidopsis thaliana and Stylosanthes et al. The phylogenetic analysis showed that the gene was closely related to Stylosanthes NCED. The subcellular localization vector AhNCED1-GFP and over-expression vector p-Cambia2300EC-AhNCED1, were successfully constructed to further study the function of AhNCED1 gene in peanut.
【作者單位】: 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);山東省花生研究所;
【基金】:國(guó)家花生產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(編號(hào):CARS-14) 山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院青年科研基金(編號(hào):2016YQN17、2015YQN13);山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院重大科技成果培育計(jì)劃(編號(hào):2014CGPY09)
【分類號(hào)】:S565.2;Q943.2

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