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過表達海馬齒SpSOS1基因能增強轉基因擬南芥的耐鹽性

發(fā)布時間:2019-01-02 15:53
【摘要】:細胞膜Na~+/H~+逆轉運蛋白SOS1在植物耐鹽過程中起重要作用。本研究將鹽生植物海馬齒中的細胞膜Na~+/H~+逆轉運蛋白基因SpSOS1構建到植物雙元表達載體pCAMBIA1304上,采用農(nóng)桿菌介導的方法將SpSOS1基因轉入到擬南芥中,在含有50μg/mL潮霉素B的MS培養(yǎng)基上篩選轉基因后代,結合目標基因和標記基因的PCR驗證,獲得了超表達的轉基因擬南芥。利用T_3代轉基因幼苗進行耐鹽性分析。研究表明,轉SpSOS1基因的擬南芥在50 mmol/L NaCl的培養(yǎng)基中發(fā)芽率在80%以上,明顯高于野生型擬南芥的45%。轉SpSOS1基因擬南芥幼苗的耐鹽性明顯提高,在100 mmol/L NaCl條件下能正常生長,具有較高的生物量、根長和側根數(shù),而野生型擬南芥在50 mmol/L NaCl的脅迫下明顯萎蔫、失綠、甚至死亡。說明過表達SpSOS1基因顯著提高了擬南芥的耐鹽性。
[Abstract]:Na~ / H- reverse transporter SOS1 plays an important role in salt tolerance in plants. In this study, the cell membrane Na~ / H- reverse transporter gene SpSOS1 from the halophytic plant sea horse teeth was constructed into the plant double expression vector pCAMBIA1304, and the SpSOS1 gene was transferred into Arabidopsis thaliana by Agrobacterium tumefaciens. Transgenic progenies were screened on MS medium containing 50 渭 g/mL hygromycin B, and superexpressed Arabidopsis thaliana was obtained by PCR verification of target gene and marker gene. The salt tolerance of transgenic seedlings of T _ 3 generation was analyzed. The results showed that the germination rate of Arabidopsis thaliana transgenic with SpSOS1 gene was more than 80% in 50 mmol/L NaCl medium, which was significantly higher than that of wild type Arabidopsis thaliana. The salt-tolerance of transgenic Arabidopsis thaliana seedlings with SpSOS1 gene increased significantly, and could grow normally under the condition of 100 mmol/L NaCl, with high biomass, root length and lateral root number, while wild-type Arabidopsis thaliana was wilted and green under 50 mmol/L NaCl stress. Even death. The results showed that overexpression of SpSOS1 gene significantly improved the salt tolerance of Arabidopsis thaliana.
【作者單位】: 海南大學農(nóng)學院海南省熱帶生物資源可持續(xù)利用重點實驗室;
【基金】:海南省科技重大專項基金(HNGDhs201502)資助
【分類號】:Q943.2

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