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木欖超活性突變基因BgSOS1-3000的分離及功能分析

發(fā)布時(shí)間:2018-11-23 09:48
【摘要】:采用PCR的方法,分離到木欖質(zhì)膜Na~+/H~+逆轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因BgSOS1 3'-末端缺失的突變基因BgSOS1-3000。BgSOS1-3000缺少了SOS1蛋白末端的自抑制區(qū)。構(gòu)建酵母表達(dá)載體BgSOS1-pYPGE15和BgSOS1-3000-p YPGE15,在酵母突變體AXT3K中分析它們的功能,結(jié)果發(fā)現(xiàn)與轉(zhuǎn)全長(zhǎng)BgSOS1基因的酵母相比,轉(zhuǎn)突變基因BgSOS1-3000的轉(zhuǎn)基因酵母耐鹽性更強(qiáng),可在200 mmol/L Na Cl條件下生長(zhǎng),而且超活性突變體增強(qiáng)耐鹽性不依賴于植物體內(nèi)的SOS2/SOS3蛋白復(fù)合體。通過測(cè)定轉(zhuǎn)基因酵母的離子含量,發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)BgSOS1-3000基因的酵母中的Na+顯著低于轉(zhuǎn)BgSOS1基因的酵母,說明BgSOS1-3000超活性突變體通過外排更多的Na+能提高酵母的耐鹽性。這為提高植物耐鹽性提供了新材料。
[Abstract]:By means of PCR, the mutant gene BgSOS1-3000.BgSOS1-3000, which is the mutant of Na~ / H- reverse transporter gene BgSOS1 3, lacks the self-inhibition region at the end of SOS1 protein. The yeast expression vectors BgSOS1-pYPGE15 and BgSOS1-3000-p YPGE15, were constructed to analyze their functions in yeast mutant AXT3K. The results showed that the transgenic yeast transformed with BgSOS1-3000 gene was more salt-tolerant than the yeast transformed with full-length BgSOS1 gene. It could grow at 200 mmol/L Na Cl, and the superactive mutants enhanced salt tolerance independent of SOS2/SOS3 protein complex in plant. By measuring the ion content of transgenic yeast, it was found that the Na in the transgenic yeast with BgSOS1-3000 gene was significantly lower than that in the yeast transformed with BgSOS1 gene, indicating that BgSOS1-3000 superactive mutants could improve the salt tolerance of yeast by excrete more Na. This provides a new material for improving plant salt tolerance.
【作者單位】: 海南大學(xué)農(nóng)學(xué)院海南省熱帶生物資源可持續(xù)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31260218,31160185)資助
【分類號(hào)】:Q943.2

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本文編號(hào):2351135

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