【摘要】：以擬南芥At5NC056820為研究對象,構(gòu)建其過表達(dá)載體,以蘸花法侵染擬南芥,經(jīng)半定量PCR鑒定成功獲得了12株過表達(dá)株系,并測定轉(zhuǎn)基因植株在干旱脅迫下的生理指標(biāo),分析轉(zhuǎn)基因植株的抗旱性,以明確At5NC056820對干旱脅迫的響應(yīng),為進(jìn)一步揭示lncRNA影響植物抗旱性的分子機(jī)制提供依據(jù)。結(jié)果顯示:(1)成功構(gòu)建出含有At5NC056820的載體,并得到了12株陽性植株。(2)陽性植株經(jīng)RCR驗(yàn)證,證實(shí)At5NC056820已在擬南芥中過表達(dá);轉(zhuǎn)基因擬南芥A-3、A-7和A-8在干旱處理下均較野生型長勢良好。(3)干旱處理10d后,轉(zhuǎn)基因擬南芥的游離脯氨酸含量為2 429.58μg·g~(-1),比野生型高2.2~2.5倍;轉(zhuǎn)基因擬南芥葉綠素含量為0.82mg·g~(-1),平均下降了48.9%,而野生型擬南芥下降了63.0%;轉(zhuǎn)基因擬南芥丙二醛含量為2.15 mmol·L~(-1)·g~(-1),其上升量較野生型少1.19mmol·L~(-1)·g~(-1);轉(zhuǎn)基因擬南芥的植物組織相對含水量為53.73%,其下降量較野生型少19.0%。研究表明,lncRNA-At5NC056820能夠在一定程度上提高擬南芥的耐旱性。
[Abstract]:The overexpression vector of Arabidopsis thaliana At5NC056820 was constructed, and infected Arabidopsis thaliana with flower dipping method. Twelve over-expressed lines were successfully identified by semi-quantitative PCR, and the physiological indexes of transgenic plants under drought stress were determined. The drought resistance of transgenic plants was analyzed in order to clarify the response of At5NC056820 to drought stress and to provide the basis for further revealing the molecular mechanism of lncRNA affecting drought resistance of plants. The results showed that: (1) the vector containing At5NC056820 was successfully constructed and 12 positive plants were obtained. (2) the positive plants were verified by RCR that At5NC056820 had been overexpressed in Arabidopsis thaliana. The transgenic Arabidopsis thaliana A-3, A-7 and A-8 had better growth than wild type under drought treatment. (3) after drought treatment for 10 days, the free proline content of transgenic Arabidopsis thaliana was 2 429.58 渭 g / g ~ (-1). It was 2.5 times higher than the wild type. The chlorophyll content of transgenic Arabidopsis thaliana was 0.82mg g-1, which decreased by 48.9% on average and 63.0% by wild-type Arabidopsis thaliana. The malondialdehyde content of transgenic Arabidopsis thaliana was 2.15 mmol L ~ (-1) g ~ (-1), which was less 1.19mmol L ~ (-1) g ~ (-1) than that of wild type. The relative water content of transgenic Arabidopsis thaliana was 53.73, which was 19.0% less than that of wild type. The results show that lncRNA-At5NC056820 can improve drought tolerance of Arabidopsis thaliana to some extent.
【作者單位】： 西北農(nóng)林科技大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【基金】：神華集團(tuán)科技創(chuàng)新項(xiàng)目(01300/K403021408)
【分類號】：Q943.2

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本文編號：2334473