【摘要】：本文針對大豆內(nèi)源基因Lectin和轉(zhuǎn)基因大豆DAS44406-6品系的5'端插入位點(diǎn)序列,設(shè)計(jì)特異性引物及探針,建立同時(shí)檢測轉(zhuǎn)基因大豆DAS44406-6品系和大豆內(nèi)源基因Lectin的多重?zé)晒舛縋CR方法,并運(yùn)用15種轉(zhuǎn)基因大豆、3種轉(zhuǎn)基因玉米、1種轉(zhuǎn)基因油菜、1種轉(zhuǎn)基因水稻和非轉(zhuǎn)基因大豆對該方法進(jìn)行特異性評價(jià),并分析該方法的靈敏度和穩(wěn)定性。結(jié)果顯示,該方法能準(zhǔn)確從20種轉(zhuǎn)基因樣品和1種非轉(zhuǎn)基因樣品中檢出靶目標(biāo),檢測結(jié)果與待檢樣品信息一致,表明本方法具有良好的特異性;靈敏度高達(dá)0.01%;重復(fù)性實(shí)驗(yàn)表明DAS81419品系4種含量、9次重復(fù)反應(yīng)Ct值的標(biāo)準(zhǔn)偏差介于0.050~0.222,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差介于0.169%~0.677%,均在可接受范圍內(nèi)。該方法特異性強(qiáng)、靈敏度高、穩(wěn)定性強(qiáng),適用于各口岸實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行轉(zhuǎn)基因大豆DAS44406-6的快速、準(zhǔn)確的檢測。
[Abstract]:In this paper, specific primers and probes were designed to detect the 5 'terminal insertion site sequences of soybean endogenous gene Lectin and transgenic soybean DAS44406-6 strain, and a multiplex fluorescence quantitative PCR method was established for simultaneous detection of DAS44406-6 strain and Lectin gene in transgenic soybean. The sensitivity and stability of this method were evaluated by using 15 kinds of transgenic soybean, 3 kinds of transgenic corn, 1 kind of transgenic rape and 1 kind of transgenic rice and non-transgenic soybean, and the sensitivity and stability of the method were analyzed. The results showed that the method could detect target accurately from 20 kinds of transgenic samples and 1 kind of non-transgenic samples. The detection results were consistent with the information of the samples to be tested, which indicated that the method had good specificity. The reproducibility test showed that the standard deviation of Ct value of the four DAS81419 strains was between 0.050 and 0.222, and the relative standard deviation was between 0.169 and 0.677, which was within the acceptable range. This method has the advantages of high specificity, high sensitivity and strong stability. It is suitable for rapid and accurate detection of transgenic soybean DAS44406-6 in port laboratories.
【作者單位】： 中國檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院;汕頭出入境檢驗(yàn)檢疫局;湛江出入境檢驗(yàn)檢疫局;暨南大學(xué)理工學(xué)院食品科學(xué)與工程系;
【基金】：廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2014A040401029) 轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品抽制樣和精準(zhǔn)檢測技術(shù)(2016ZX08012-001) 廣州市科技計(jì)劃項(xiàng)目(2014J4100105)
【分類號】：S565.1

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 崔寧波;張正巖;;轉(zhuǎn)基因大豆研究及應(yīng)用進(jìn)展[J];西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào);2016年08期

2 Clive James;;2015年全球生物技術(shù)/轉(zhuǎn)基因作物商業(yè)化發(fā)展態(tài)勢[J];中國生物工程雜志;2016年04期

3 趙將;生吉萍;;轉(zhuǎn)基因食品標(biāo)識的問題與困惑[J];中國農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2015年03期

4 朱琳峰;彭煥;黃文坤;張東升;孔令安;彭德良;;抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆Cp4-epsps基因快速簡便的LAMP檢測方法[J];植物保護(hù);2015年03期

5 Seung-Ah Chung;Michael G.Francom;Kathryn Ting;;韓國農(nóng)業(yè)生物技術(shù)年報(bào)(2011年)[J];生物技術(shù)進(jìn)展;2013年01期

6 魏霜;陳貞;蘆春斌;馬駿;白衛(wèi)濱;吳希陽;;多重PCR檢測轉(zhuǎn)基因水稻的轉(zhuǎn)基因成分[J];食品科學(xué);2012年12期

7 王渭霞;賴鳳香;洪利英;傅強(qiáng);;實(shí)時(shí)定量PCR檢測轉(zhuǎn)基因水稻科豐6號插入拷貝數(shù)和轉(zhuǎn)基因含量[J];農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào);2012年01期

8 王永;蘭青闊;張莉;趙新;朱珠;程奕;;改良Chelex-100法和CTAB法用于轉(zhuǎn)基因抗草甘膦大豆檢測效果的比較[J];大豆科學(xué);2008年05期

9 金蕪軍,賈士榮,彭于發(fā);不同國家和地區(qū)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品標(biāo)識管理政策的比較[J];農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào);2004年01期

10 呂山花,常汝鎮(zhèn),陶波,李向華,欒鳳俠,郭珊花,邱麗娟;抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆PCR檢測方法的建立與應(yīng)用[J];中國農(nóng)業(yè)科學(xué);2003年08期

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 尹全;李憶;鄧強(qiáng);敬媛;;一種可同步檢測3種外源基因的多重PCR方法[J];山西農(nóng)業(yè)科學(xué);2017年01期

2 余林輝;蔡曉騰;徐萍;向成斌;;植物抗旱節(jié)水:從實(shí)驗(yàn)室到田間[J];中國科學(xué):生命科學(xué);2017年01期

3 魏霜;孟茹;乾義柯;孫凱;劉中勇;鄞杰平;周廣彪;吳希陽;;基于DPO引物的實(shí)時(shí)熒光PCR檢測微生物肥料中的鼠李糖乳桿菌[J];新疆農(nóng)業(yè)科學(xué);2017年01期

4 沈平;武玉花;梁晉剛;盧新;章秋艷;王顥潛;劉鵬程;;轉(zhuǎn)基因作物發(fā)展及應(yīng)用概述[J];中國生物工程雜志;2017年01期

5 孟彥辰;周超;;我國轉(zhuǎn)基因食品標(biāo)識制度相關(guān)法律問題研究[J];醫(yī)學(xué)與社會;2017年01期

6 付偉;任嬌;魏霜;袁俊杰;周廣彪;吳希陽;朱水芳;劉中勇;;轉(zhuǎn)基因大豆DAS44406-6多重?zé)晒舛縋CR檢測方法的建立[J];食品工業(yè)科技;2017年04期

7 邢珍娟;董立明;劉娜;夏蔚;李蔥蔥;李飛武;;應(yīng)用直接PCR技術(shù)快速篩查轉(zhuǎn)基因玉米方法研究[J];玉米科學(xué);2017年01期

8 郭籽實(shí);張雷;鄧宗豪;;印度轉(zhuǎn)基因生物發(fā)展現(xiàn)狀及政策研究[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2016年32期

9 董立明;李蔥蔥;邢珍娟;邵改革;夏蔚;閆偉;李飛武;;利用多重PCR技術(shù)快速檢測五個(gè)轉(zhuǎn)基因大豆品系[J];大豆科學(xué);2016年06期

10 柴帥杰;武鵬程;榮瑞娟;郝育杰;史佳楠;郭亞璐;丁國濤;韓宇寧;趙志靜;魏健;尹長城;劉國振;;轉(zhuǎn)基因水稻中CP4-EPSPS蛋白質(zhì)的檢測及其表達(dá)特征研究[J];核農(nóng)學(xué)報(bào);2017年01期

【二級參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 劉穎;;轉(zhuǎn)基因大豆檢測技術(shù)分析[J];中外企業(yè)家;2016年03期

2 徐雪高;沈貴銀;;關(guān)于當(dāng)前我國大豆產(chǎn)業(yè)發(fā)展?fàn)顩r的若干判斷及差異化戰(zhàn)略[J];經(jīng)濟(jì)縱橫;2015年12期

3 鄭金英;翁欣;;國際轉(zhuǎn)基因大豆對中國大豆產(chǎn)業(yè)及其期貨市場的影響[J];亞太經(jīng)濟(jì);2015年05期

4 蘇燕;許麗;徐萍;;全球商業(yè)化轉(zhuǎn)基因作物發(fā)展現(xiàn)狀和趨勢[J];生物產(chǎn)業(yè)技術(shù);2015年05期

5 苗潤蓮;;基于專利分析的轉(zhuǎn)基因大豆技術(shù)現(xiàn)狀研究[J];大豆科學(xué);2015年04期

6 杜艷艷;劉陽;;全球轉(zhuǎn)基因作物種植現(xiàn)狀及啟示[J];全球科技經(jīng)濟(jì)w，

本文編號：2258771