【摘要】：本文針對(duì)大豆內(nèi)源基因Lectin和轉(zhuǎn)基因大豆DAS44406-6品系的5'端插入位點(diǎn)序列,設(shè)計(jì)特異性引物及探針,建立同時(shí)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因大豆DAS44406-6品系和大豆內(nèi)源基因Lectin的多重?zé)晒舛縋CR方法,并運(yùn)用15種轉(zhuǎn)基因大豆、3種轉(zhuǎn)基因玉米、1種轉(zhuǎn)基因油菜、1種轉(zhuǎn)基因水稻和非轉(zhuǎn)基因大豆對(duì)該方法進(jìn)行特異性評(píng)價(jià),并分析該方法的靈敏度和穩(wěn)定性。結(jié)果顯示,該方法能準(zhǔn)確從20種轉(zhuǎn)基因樣品和1種非轉(zhuǎn)基因樣品中檢出靶目標(biāo),檢測(cè)結(jié)果與待檢樣品信息一致,表明本方法具有良好的特異性;靈敏度高達(dá)0.01%;重復(fù)性實(shí)驗(yàn)表明DAS81419品系4種含量、9次重復(fù)反應(yīng)Ct值的標(biāo)準(zhǔn)偏差介于0.050~0.222,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差介于0.169%~0.677%,均在可接受范圍內(nèi)。該方法特異性強(qiáng)、靈敏度高、穩(wěn)定性強(qiáng),適用于各口岸實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行轉(zhuǎn)基因大豆DAS44406-6的快速、準(zhǔn)確的檢測(cè)。
[Abstract]:In this paper, specific primers and probes were designed to detect the 5 'terminal insertion site sequences of soybean endogenous gene Lectin and transgenic soybean DAS44406-6 strain, and a multiplex fluorescence quantitative PCR method was established for simultaneous detection of DAS44406-6 strain and Lectin gene in transgenic soybean. The sensitivity and stability of this method were evaluated by using 15 kinds of transgenic soybean, 3 kinds of transgenic corn, 1 kind of transgenic rape and 1 kind of transgenic rice and non-transgenic soybean, and the sensitivity and stability of the method were analyzed. The results showed that the method could detect target accurately from 20 kinds of transgenic samples and 1 kind of non-transgenic samples. The detection results were consistent with the information of the samples to be tested, which indicated that the method had good specificity. The reproducibility test showed that the standard deviation of Ct value of the four DAS81419 strains was between 0.050 and 0.222, and the relative standard deviation was between 0.169 and 0.677, which was within the acceptable range. This method has the advantages of high specificity, high sensitivity and strong stability. It is suitable for rapid and accurate detection of transgenic soybean DAS44406-6 in port laboratories.
【作者單位】： 中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院;汕頭出入境檢驗(yàn)檢疫局;湛江出入境檢驗(yàn)檢疫局;暨南大學(xué)理工學(xué)院食品科學(xué)與工程系;
【基金】：廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2014A040401029) 轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品抽制樣和精準(zhǔn)檢測(cè)技術(shù)(2016ZX08012-001) 廣州市科技計(jì)劃項(xiàng)目(2014J4100105)
【分類(lèi)號(hào)】：S565.1

【參考文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2258771